Способ получения производных цефалоспорина или их солей с щелочными металлами

Способ получения производных цефалоспорина или их солей с щелочными металлами

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗЬБРЕТЕН ИЯ (11) 1005664

Союз Советскни

Соттнвпнстнческни

Респубики

Ж вЂ” ф -.

К ПАТЕНТУ (61) Дополнительный к патенту (22) Заявлено 08.05.80 (21) 2921249/23-04

t (23) Приоритет - (32) 1. 05. 79 (З1) ? 916376 (ЗЗ) Великобритания (51) М, Кл.

С 07 0 501/06

С 07 О 501/36 иА 61 K 31/545. Государственный комитет )публиковапо 15.03.83 Бюллетень йа 10 во девам иэвбрвтеиий и отирытий (») УДК 547.869. . 1. 07 (088. 8) Дата опубликования описания 18.03.83 (72) Авторы изобретения

Иностранцы

Джулиано Наннини, Этторе Перроне, и Сильвио Грассо (Италия) Иностранная фирма

"Фармиталиа Карло Эрба С.п.А" (Италия) (71 ) Заявитель

Ю (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ ЦЕФАЛОСПОРИНА

ИЛИ ИХ СОЛЕЙ С ЩЕЛОЧНЫИИ МЕТАЛЛАИИ

t 2

Целью изобретения является получение новых антибиотиков цефалоспоринового ряда, расширяющих арсенал средств воздействием на живой орга5 низм.

Эта цель достигается тем, что согласно основанному на известной, реакции получения 7-ациламидоцефалоспоринов ацилированием 7-аминоцефалото споринов способу получения производных цефалоспорина формулы

RPN ь . -.и

О

СН;5 -- )т —

0R

s форме син-изомеров, где Р,1 — атом водорода или защитная с . группа, такая как тритил;

R - атом водорода, защитная группа, такая как тритил, или низший алкил, незамещенный или замещенный карбоксигруппой; лом (1).

Изобретение относится к способу получения новых антибиотиков цефалоспоринового ряда, а именно новых производных цефалоспорина или их солей с щелочными металлами, которые могут найти применение в качестве лекарственных веществ в медицине и ветеринарии.

Известен способ получения биологически активных производных 7-(2-(2-аминотиазолил-4)-2-алкоксииминоацетамидо3 -3-(1,2-,4-тиадиазолил-5)-3-цефем-4-карбоновой кислоты или их солей с щелочными металлами взаимодействием 7-амино-3-(1,2,4-тиадиазолил-5)-3-цефем-4-карбоновой кислоты с 2-(2-аминотиазолил-4)-2-.алкоксиминоуксусной кислотой, в которой аминогруппа защищена, или с ее реакционноспособным производным с последующим снятием защитной группы и выделением целевого продукта в виде свободной кислоты или ее сопи с щелочным металФерруччио асафчйй&(,"-, >

1005664

10 положительных и грамотрицательных

R 1ж !

М С-СООН

11

1 .ОЯ

20 (lii) .Rg - амино- или карбоксигруппе 1 или карбамоил, или их солей с щелочными металлами, заключающемуся в том, что соединение формулы

К нж

\ 1

К

СН2 р -я М

Ц

СООН где Rg имеет указанные значения, подвергают взаимодействию с кислотой формулы в форме син-изомера, где К4 и R> имеют указанные.„выше зна4 чения, приведенные для R4 и R>, кроме атома водорода, или с ее реакционноспособным производным,, в растворителе в присутствии основания и, в случае необходимости, в присутствии конденсирующего агента, при охлаждении или при комнатной температуре и, в случае необходимости, удаляют защитные группы, если они имеются и, в случае необходимости, превращают полученный в свободном состоянии прод ;т в соль щелочного металла или целевой продукт, полученный в виде соли щелочного металла, переводят в свободную кислоту.

l3 соединении формулы ll.ñâîáîäíûå карбоксигруппы могут быть защищены, в случае необходимости, до проведения реакции. Примерами защищающих групп являются трет-бутил, бензгидрил, п-метоксибензил, п-нитробензил, тритил или триалкилсилил. Затем защитные группы могут быть удалены в конце реакции, например, путем мягкого кислотного гидролиза или каталитическим гидрированием.

Реакционноспособным производным соединения формулы III является, например, его галоидангидрид, ангидрил, смешанный ангидрид, азид, реакционноспособный эфир- или соль, например, образованная щелочным металлом или щелочноземельным металлом,» аммиаком или органическим основанием. Реак25

3S

4 ционноспособным эфиром может быть, например, и-нитрофениловый эфир, !

2,4-динитрофениловый эфир, пентахлорфениловый эфир, й-оксисукцинимидный эфир или N-оксифтальимидный эфир.

Соединения настоящего изобретения обладают высокой противомикробьэй активностью как в организме животных, так и людей не только против грамбактерий, обычно восприимчивых к цефалоспоринам, например стафилококков, стрептококков, диплококков KEebs eII1а, Escherichiàñoá, Proteus mIrabi 1(s, Sa 5nonellla, ShigeEEa, Haemophi-, Rus и Neisseria, но также против сильных, производящих бета-лактамаэу грамотрицательных микроорганизмов, например К1еЬ51egPa aегоgenes 1082Е, EscherIchia coIII Tem, Entегоbacter с1оасае P-99, индол-положительного

Proteus и т.п °, а также против штаммов Pseudomonas aeruginosa, которые обычно стойки по отношению к боль шинству цефалоспоринов. Поэтому эти соединения особенно пригодны для лечения инфекций, вызванных грамотрицательными бактериями. например заболеваний мочевого тракта и респираторного тракта.

Активность соединений, полученных по предложенному способу, как против бактерий, обычно восприимчивых к цефалоспоринам, так и против производящих бета - лактамазу выше, чем активность цефазолина и цефуроксима.

Например, соединение 3- 1(8-амино-б-тетраэоло-(1,5-Ь)пиридазинил)-

-тиометил)-7-12"(2-амино-4-тиазолил)—

-2-метоксииминоацетамидо) -3-цефем-4-карбоновая кислота (син-изомер) (F СЕ 20127) приблизительно в 24 раза более активно, чем цефазолин, против стрептококков и приблизитепьно в

30 более активно, чем цефазолин и цефуроксим, против большинства грамотрицательных бактерий, Кроме того, соединение F СЕ 20127 приблизительно в 20-60 раз более активно, чем цефуроксим, против некоторых производителей бета-лактамаэы, таких как

Ktebsie27a aегоgenes 1082 E, Entегоbacter cloacae Р99, Escherichia col.

Tem. Соединение F СЕ 20127 было также испытано на ряде 10 штаммов Pseudomonas aeruginosa, 4 штаммов Proteus

vuIgaris и 4 штаммов Proteus morganii было .найдено, что оно в несколько раз

100566 активнее, чем цефазолин и цефур оксим.

Соединение 3- 1(8-карбокси-6-тетраэоло(1,5-Ь)пиридазинил)-тиометил -7-P-(2-амино-4-тиаэолйл)-2-метокс-.. иминоацетамидо)-3-цефем-4-карбоновая кислота (син-изомер) (Г CE 20485) приблизительно в 5 раз активнее цефазолина против стрептококков и приблизительно в 32 рауа активней цефазолина и в 40 раз активнее цефуроксима против большинства грамотрицательных бактерий. Против Entегоbacter aегоgenes АТСС 8308, Entего- .

bacter с1оасае 1321 Е, SaRmonekga 45

typhI Matson u ShIgeRRa Sonoei

АТСС 11060 соединение F СЕ 20485 в

15-50 раз активнее цефазолина и в

50- 100 раз активнее цефуроксима.

Кроме того, соединение F CE 20485. 20 по крайней мере в 100-500 раз активнее цефазолина и цефуроксима против

Proteus vu lgaris Х20 и Proteus mirabiEis АТСС 9921. Кроме того, соединение,F СЕ 20485 показало значитель- 25 ную активность вне организма против

Pseudomonas aerug. nosa G и BacCe-

roi des f rag i Ri s VP I 9032.

Другим важным свойством соединения F СЕ 20485 является очень длительный период полураспада плазмы в организме мышей (около 90 мин) и крыс (около 100 мин) после внутривенного введения, в то время, как период полураспада плазмы.при введении цефазолина составляет соответственно 16 и 20 мин. Следовательно, соединение F СЕ 20485 показало высокую активность при испытаниях в организме, например, на мышах, зараженных микроорганизмами Escheriсп1а соRi G, К2еЬэ1еИа pneumoni aå АТСС 10031, Proteus mIrabi gIs АТСС 9921, Escherichia coRi Tem, Haemophi Rus 1пГЬenzae, SaRmoneHa тур Watson и 45

Proteus vuRgaris Х20, это соединение было в 20-200 раз более активным, чем цефазолин.

Токсичность соединений по изобретению совершенно незначительна На- . пример, приблизительная острая токсичность (0 ) соединений F CE 10127 и F СЕ 20485 для мышей, найденная по единичному внутривенному введению возрастающих доэдровок и измеренная на седьмые сутки такого лечения, была выше 2000 мг/кг. Аналогичной активностью и токсичностью

4 6 обладают и другие соединения по изоб-ретению.

Следовательно соединения изобретения являются полезными при лечении инфекций, вызванных либо грамположи-тельными, либо грамотрицательными. микроорганизмами, такими как заболевания респираторнбго тракта, напри" мер бронхиты, бронхопневмония, niiee-, рит; гепатобиллиарные и брюшные заболевания, например холецистит, перито" нит; заражения крови и сердечно-сосудистой системы, например септицемия; заражения мочевого тракта, например пиелонефрит, цистит; обстетрикальная и гинекологическая инфекции, например цервицит, эндометрит; инфекции

yx*, горла и.носа, например отит, синузит, паротит.. Соединения по изобретению могут. назначаться или людям, или животным в виде различных дози" ровок, например, перорально в форме таблеток, капсул, капель или сиропов; реактально в виде суппозиториев; парэнтерально, например внутривенно или внутримышечно (в виде растворов или суспензий), причем внутривенное введение является предпочтительным на стадии возникновения; путем ингаляции в виде аэрозолей или растворов для распыления; интравагинально, например бужированием, или .местно в виде примочек, кремов и мазей.

Фармацевтические или ветеринарные композиции, содержащие соединения по изобретению в сочетании с фар мацевтически или ветеринарно приемлемым эксцепиентом, получают, используя традиционные эксцепиенты, обычно носители и/или разбавители, используемые для других цефалоспоринов. Общепринятыми носителями или разбавителями являются, например, вода, желатина, лактоза, крахмал, стеарат ° магния, тальк, растительные масла,, целлюлоза и т.п. Суточные дозировки в пределах 1-100 мг на 1 кг веса тела могут использоваться для различных видов животных, причем точная дозировка зависит от возраста, веса и состояния излечиваемого существа и от частоты и пути введения.

Предпочтительным способом введения соединений изобретения является парэнтеральный; в этом случае соединения могут вводиться взрослым людям в количестве 100-200 кг в дозе предпочтительно 150 мг I-4 раза в

005664 8

1О

26

25 ь

30 т

П р и м е. р 1. 3-1(8-Амино-6-тетразоло (1, 5- Ь)-пиридазинил)-тиометил1-7-12-(2-амино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетамидо) -3-цефем-4-карбоновая кислота (син-изомер).

Перемешиваемый раствор безводного хлористого метилена (70 мл), содержащий 2-(2-тритиламино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетоуксусную кислоту (син-изомер) (4,43 r, 0,01 моль) и триэтиламин (1 41 мл, 10 ммоль), охлаждают до 0 С,.и по частям добавляют пятихлористый фосфор (2,08 r, 10 ммоль). После перемешивания в течение 10 мин при 0 С и 1 ч при ком7 1 сутки растворенными в соответствую- щем растворителе, например стерильной воде или растворе хлористоводородного лидокаина для внутримышечных инъекций или стерильной воде, .физиологических солевых растворах, растворе декстроэы или внутривенных жидкостях или электролитах для внутривенных инъекций.

Кроме того, соединения могут использоваться в качестве противомикробных агентов в профилактических целях, например при очистке, или в виде композиций, дезинфицирующих поверхность, например, при концентрациях приблизительно 0,2- 14 от веса такой композиции, смешанной, суспендированной или растворенной в традиционных инертных сухих или водных носителях для использования путем промывания или опрыскивания. Кроме того, они полезны в качестве питательных добавок к пище животных.

Ниже приведены примеры, иллюстрирующие изобретение.

Оценка температур плавления в некоторых случаях является затруднител ной, так как эти соединения имеют тенденцию удерживать растворитель.

Спектры ИК записывали в твердой фазе (KBr) или в масле "Нуджол" на спетрофотометре "Перкин-Эльмер 125";

Уф-спектры - в буферном фосфатном растворе при рН 7,4 или в 13-ном рас воре NaHC0 на приборе "Бауш-Ломб".

Спектры ЯИР записывали на приборе "Брукер НХ-90" (90 ИГц) для конечных продуктов и на приборе "Перкин-Эльмер R-24Вн (60 МГц) для промежуточных веществ в растворе ДИСО (диметилсульфоксида) или СОЯ, используя в качестве внутреннего стан. дарта тетраметилсилан. натной температуре смесь выпаривают . при пониженном давлении, растворяют в смеси ацетона и бенэола, снова выпаривают, для того чтобы удалить следы оксихлорида фосфора, и растворяют в 50 мл безводного ацетона, Эатем фильтрацией удаляют хлористоводородный триэтиламин. Полученный таким образом ацетоновый раствор

2- {2-тритиламино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетилхлорида добавляют по каплям к тщательно перемешиваемому охлаждаемому льдом раствору 6-амино-3-1(8-амино- б-тетразоло(1,5-Ь)-пиридазинил)-тиометил)-3-цефем-4-карбоновой кислоты (3,8 г, 10 ммоль) бикарбоната натрия (0,84 г) и триэтиламина (2,82 мл) в смеси воды и ацетона (75 мл : 50 мл). Суспенэии перемешивают в течение 1/2 ч при

0-5 С и затем 1,5 ч при комнатной температуре, растворяют в 500 мл этилацетата, промывают водной хлористоводородной кислотой (50 мл), затем водным раствором хлористого натрия {100 мл), высушивают сульфатом натрия и выпаривают досуха. Остаток перемешивают в 5 мл хлористого метилена, затем добавляют 50 мл этилацетата и 50 мл диэтилового эфира. Образовавшийся осадок собирают, растворяют в теплом хлористом метилене (30 мл), охлаждают и обрабатывают при перемешивании с диэтиловым эфиром (100 мл). После 20 мин перемешивания отфильтровывают белое твердое вешество промывают эфиром и вы I сушивают, получая таким образом

4,3 г 3- ((8-амино-6-тетразоло (1,5-Ь) пиридазинил)-тиометил -7-1 2-(2-тритиламино-4-тиаэолил)-2-метоксииминоацетамидо1-3-цефем-4-карбоновую кислоту (син-изомер) в виде белого порошка.

Упомянутое выше соединение(2,0 г) по частям добавляют к перемешиваемому горячему (55 С) раствору муравьио ной кислоты (13 мл) в 13 мл воды.

Продолжают перемешивание и нагревание при той же температуре в течение

25 мин и затем отфильтровывают твердое вещество из охлажденной смеси.

Твердое, вещество растирают в порошок в 903-ной муравьиной кислоте (1 мл) затем добавляют 2 мл воды и отфильтровывают чистый трифенилметанол.

Подкисленные маточные растворы объединяют и выпаривают, получая оса9 10056 док. После полного удаления воды и муравьиной кислоты с последующим растиранием в порошок с безводным этанолом получают твердое вещество (1,225 r). Неочищенный продукт суспенДируют в воде (70 мл) и добавляют достаточное количество NaHCO, чтобы получить раствор. Значение рН раствора понижают до 2,0, добавляя 2 н, соляную кислоту и спустя 20 мин выпав IÎ ший в осадок продукт собирают, тщательно промывают водой и высушивают в течение 18 ч при 75 С. Таким обрао зом, получают 1;13 г целевого продукта, который разлагается без плавле-. ts ния при температуре выше 225ОС.

Найдено,3: С 37,90; Н 3„14; и 26,78; S 16,83

С.® Н4. Nq1 05эЭ

Вычислено, i: С 38,53; Н 3;04; ро

N 27,33; S 17,07

ИК-спектр (см - ), (КВг): 33203180 йн, 1520 - CONH (втор. амид), 1030 (-N-О-СН ), 1760 С=О (беталактам); 25

SIMP, 100 МГц (DMCO - d<); млн.д.:

3,74 (2H, дубл. -2-CH<), J = 17 Гц, 3,88 (3Н, с., -ОСН); 4,36 (2Н, д., 3-CH S) 4 = 13 Гц, 5,20 (1Н, д., 6-H) J = 5 Гц; 5,83 (1н, д,, 7-н) зо

J = 5 Гц + 8 Гц; 6,41 (1Н, с., 7-Н

s пиридазиновом кольце); 6,82 (1H, с., 5-Н в тиазоловом кольце); 6,807,80 (2Н, шир., с., NH> в тиазоловом кольце), 8,02 (2Н, шир., с., -йн в пиридазиновом кольце); 9,69 (1Н, д., -CONH) J - =8 Гц.

Используя этот метод, получают

3- Г(8-карбокси-б-тетразоло(1,5-Ь) пиридазинил)-тиометил1-7-(2-(2-амино- 4о

-4-тиазолил)-2-оксииминоацетамидо -3-цефем-4-карбоновую кислоту (синизомер).

Найдено,i: С 39,71; H 3,06; и 22,88; S 15,82

С оН ЕНо0 З

Вычислено,З: С 39,60; Н 2,99;

И 23,09; S 15,86

ИК-спектр (KBr) (см ): 1775 C=o (бета-лактам); 1715 С = 0 (карбоновая кислота); 1660-CONH (втор, 10 амид.).

ЯМР-спектр 100 ИГц, (DMSO - 4 ) (К .доли): 1,26 (ЗН,, -0СН,СН );

3,73 (2Н, dd, 2-СН ), 4,22 (2Н, q, -0-СН СН ) 4,52 (2H, dd, З-СН ), 5,18 (1Н, d, 6Н), 5,82 (1Н, dd, 7-Н),1

6,82 (1Н, S, 5-Н на тиазольном коль64 10 це), 7,30 (2Н, широк. S -NH> на тиазольном кольце), 8,02 (1Н, S, 7-Н на пиридазиновом кольце); 9,47 (1H, d, -C0NH).

Пример 2. 3- Г(8-Аминокарбонил-б-тетразоло 1,5-Япиридазинил)-тиометил1-7-(2-(2-амино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетамидо)-3"цефем,-4-карбоновую кислоту (син-изомер) получают путем взаимодействия 2-(2тритиламино-4-тиазолил)-2-метоксииминоуксусной кислоты с 7-амино-3- ((8-аминокарбонил-б-тетразоло 1,5-Д пиридазинил)-тиометил1-3-цефем"4- .

-карбоновой кислотой, применяя ме тодику, описанную в примере 1; т. пл. 220 С (разл.).

Найдено,6: С. 38,71; Н 2,96;

N 25,01; S 16,01

- С„ФН,П „106S3

Вычислено,4: С 38,57; Н 2,89; и 26,04; S 16,26 . Тонкослойная хроматография (ТСХ):

CHC0 . Me 0H : HC00H : H 0 = 140

75 : 20 : 20. Rf = 0,42.

7-Амино-3- Ц8-аминокарбонил-6- тетра золо Г1, 5- Ь1пиридазинил) -тиоме тил1-3- цефем- 4- карбоновую кислоту, используемую в качестве исходного вещества,. получают следующим образом.

6-Хлор-8-аминокарбонилтетразоло (1,5-b)пиридазин.

К охлаждаемому льдом раствору

3-гидразино-4-аминокарбонил-6-хлорпиридазина (4,2 г, 0,0244 моль) в.

15.6-ной уксусной кислоте по каплям добавляют раствор нитрита натрия (1,55 г) в 10 мл воды. После перемео шивания в течение 1 ч при 5-10 С вы. павший осадок фильтруют, кристаллизуют из воды, снова фильТруют и высушивают в вакууме при 50 С, получая

3,44 г (77,56) указанного выше соединения, т.пл. 226 С (разл.).

Найдено,4: С 30,11; Н 1,44;

N 42,00; О 17,69 .

С CR N60

Вычислено, r.; С 30,24; Н 1,52; и 42,32- CE 17 85.

6-Иеркапто-8-аминокарбонилтетразоло(1,5-Ь)пиридазин. с

К перемешиваемому раствору NASH H O (10 г, 0,135 моль) в 150 мл воды добавляют 10 r (0,05 моль) 6-хлор-8-аминокарбонилтетразоло(1,5-b)пирид, азина и смесь тщательно перемешивают

90 мин. После охлаждения при 0 С реакционную смесь подкисляют 236-ной

11 1Ои56 соляной кислотой. После охлаждения в течение 1 ч при О С. отбирают твердое вещество, промывают небольшим . количеством холодной воды. Получают указанное выше соединение, т.пл. 185- s

187 С (разл), ИК-спектр (нуджол): ЯН 2480 см

С = О 1675 см ". .ТСХ в СНС . сн Он : нсоон = 160 : 70 : 30чистый продукт. о

УФ-спектр (буфер фосфатный, рН 7,4):) ццсс = 262; Е"„ 818.

Найдено,3: С 30,65; Н 2,00; и 42,53; S 16,16, .СБН4МЬ 05

Вычислено,/: С 30,60; Н 2,05; и 42,84„ S 16,34.

7-Амино-3- (8-карбокси-.б-тетразоло . азоло(1,5-Ь)-пиридазинил)-тиометил)20

-3-цефем-4-карбоновая кислота.

12 оксииминоацетамидо)-3-цефем-4-карбоновую кислоту, которую по каплям добавляют к горячему (55 С) леремешиваемому раствору 503-ной муравьиной кислоты (140 мл). Перемешивание и нагревание при той же температуре осуществляют в течение 30 мин и затем твердое вещество отфильтровывают из охлажденной смеси. фильтрат выпаривают досуха в вакууме, оставляя осадок. После полного удаления воды и муравьиной кислоты с последующим растиранием с водой получают твердое вещество. Неочищенный продукт кристаллизуют из

501-oro этанола, получая 9,1 г (604) целевого продукта, который разлагается при 255 С.

К горячему раствору (50-55 C)

6-меркапто-8-аминокарбонилтетразоло (1,5-Ь) пиридазина (2 г, 10 смоль) и

2,8 r бикарбоната натрия в 90 мл фос25 фатного буфера ° (РН 6,4) по частям добавляют 4,6 г (0,017 моль) 7 АЦК (7-аминоцефалоспорановой кислотц) и смесь нагревают 4 ч при 60 С. После о охлаждения при 10 С выпавшую в осадок

7-амино-3- ((8-аминокарбонил-6-тетразоло1 1,5- Ь)пиридазинил)-тиометил)-3-i;epee-4-карбоновую кислоту собирают фильтрацией. Твердое вещество суспендируют в 150 мл смеси ацетона и воды (1:2;, перемешивают в течение 30 мин и фильтруют снова. Собранный осадок промывают ацетоном и высушивают в вакууме при 60 С. Получают целевой продукт (803), т.пл. 228-230 С (разл.) 4o

Найдено,4: С 37,93; Н 2,93;

k 27113; S 15,45

С„ Н ЧВО4Ь

Вычислено,Ф: С .38,22; Н 2,96; и 27,43; S;15,70 4

ИК- спектр (нуджол): С = О-беталактам, 1780 см"".

Уф-спектр (1Ж йаНСО ): p> 1 e =

= 249 и 332.

Пример 3. 3- ((8-Карбокси-6- so

-тетразоло (1,5- Ь)пиридазинил)-тиометил)-7-(2-(2-амино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетамидо) -3-цефем"4-карбоновая кислота (син-изомер).

Перемешиваемый раствор безводного и хлористого метилена, содержащий 2-(2-тритиламино-4-тиазолил)-2-метоксииминоуксусную кислоту{сии-изомер)(11,35 г

25,6 ммоль) и триэтиламин (3,61 мл, 25,6 ммоль), охлаждают при О С и по частям добавляют 5,6 г (27 ммоль) пятихлористого фосфора. После перемео шивания в течение 15 мин при О С и

1 ч при комнатной температуре смесь выпаривают при пониженном давлении, растворяют в безводном бензоле, снова выпаривают для удаления следов оксихлорида фосфора. Эту обработку повторяют дважды (2- 50 мл). Остаток суспендируют в 50 мл безводного ацетона, затем удаляют фильтрацией хлористоводородный триэтиламин. Ацетоновый раствор 2-(2-тритиламино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетилхлорида, полученный таким образом, прикапывают в тщательно перемешиваемый и охлаждаемый льдом раствор 7-амино—

-3- 1(8-карбокси-6-тетразоло 1,5-b) пиридазинил)-тиометил1-3-цефем-4карбоновой кислоты (10 г, 23,2ммоль) и 15 r бикарбоната натрия в смеси воды и ацетона (500:250 мл). Смесь о перемешивают 30 мин при 0-5 С и затем в течение 90 мин при комнатной

I температуре, отфильтровывают нерастворившееся вещество и .удаляют ацетон выпариванием в вакууме. Доводят значение РН водной фазы до 2,0 с помощью 84- ной соляной кислоты и экстрагируют этилацетатом (3 раза по

400 мл), промывают водным хлористым натрием, высушивают сульфатом натрия и выпаривают досуха. Остаток перемешивают с диэтиловым эфиром 20 мин, отфильтровывают белое твердое вещество, промывают эфиром и высушивают.

Получают 3- ((8-карбокси-6-тетразоло (1,5-Ь)пиридазинил)-тиометил)-7-(2-(2-тритиламино-4-тиазолил)-2-мет1005664

55

13

Найдено,r.: С 38,10; Н 2,91;

N 23,34; S 15,93

С 9 НМ N a О

Вычислено,Ф: С 38,50; Н 2,72;

N 23,63; S 16,23

ТСХ в СНСЕЗ . МеОН : НСООН : Н О =

140: 75: 20; 20, Rf = 0,25.

ИК-спектр (KBr): 3500-2300 см связанная — СООН; 1765 см." С = О, бета-лактам;.1710 см. - СО кислота;

1650 см " втор. амид.; 1620-1580 см (С = и оксим,.Д (С - Й) + d(N — Н);

1540 см-" V (С вЂ” N) + д (й - H) амид.

ЯМР-спектр, 100 МГц (ОМСО - d ), млн. доли: 3,68 (1Н, д., 2-СНз), 3,86 (1Н, д., 2-СН2), 3,92 (ЗН, с;, =N-осн ), 4,36 (1н, д., 3-сн s), 4,69 (1нс д., 3-СН -s)э 5у21 (1H д., 6-Н), 5,85 (1H, д,д., 7-Н), 6,83 (1H. с., 5-Н в кольце тиазола), 2о

7,30 (2Н, шир. с., -Мн в кольце тиазола), 8,02 (1Н, синг., 7Н, в кольце пиридазина), 9,28 (1Н, д., . -C0NH).

7-Амцно-3- (8-карбокси-6-тетразо- 25 ло 1,5-Ь)пиридазинил)-тиометил)-3цефем-4-карбоновую кислоту, используемую в качестве исходного вещества, получают следующим образом. .3"Гидразино-4-карбокси-6-хлор- ЗО пиридазин.

Смесь 20 (0,103 моль) 3,6-дихлор-4-карбоксипиридазина и 22 мл

983-ного гидразингидрата в 200 мл

504-ного этанола кипятят с обратным холодильником при перемешивании в течение 1 ч. После охлаждения при 5 С собирают твердый осадок, промывают

20 мл безводного этанола. Твердое вещество суспендируют в 100 мл воды, ю смесь доводят до значения рН 1-2 с помощью 234-ной соляной кислоты; после охлаждения при 5 С твердое вещество фильтруют, высушивают в вакууме при 80 С, получая 118,29 г (93,44) 45 указанного выше соединения, т.пл. 198201 С.

Найдено,4: С 31,64; Н 2,64;

М 29,32; Cf 18,53

С Н5С н4 0

Вычислено,Ф: С 3 1,84; Н 2,67;

N 29,71; С(18,80

ЯМР-спектр (ОМСО - д ): 7,8 (1Н, с., 5-Н в кольце пиридазина), 9,2 (4Н, шир., с., -СООН, -NHNy).

6-Хлор-8-карбокситетразоло(1,5-Ь1 пиридиазин.

14

К охлаждаемой льдом суспензии

З-гидразино-4-карбокси-Ь-хлорпиридази. на (1.,88 r,10 ммоль) в 153-ной уксусной кислоте по каплям добавляют раствор нитрита натрия (0,70 r) a воде (5 мл), перемешивают 1 ч при 516 С, выделившийся осадок отфильтровывают и промывают безводным этанолом. Твердое вещество суспендируют в 2 н. соляной кислоте, смесь перемешивают 30 мин, твердое вещество отфильтровывают, промывают холодной во" дой и высушивают в вакууме при 70 С, получая 1,73 r (873) указанного выше соединения, т.пл. 225 С.

Найдено,Ф: С 29,95; H 0,98; и 35,15; СЕ 17,58

С -Н СРИ.О, ВычйслейоД: С 30,09; Н 1,00;

N 35,09; СЕ 17,76

ИК-спектр (нуджол): <,C = О

1730 см ".

ЯМР-спектр (ОМСО " д ): 8,33 (1Н, с., 7-Н в кольце пиридазина).

6-Меркапто-8-карбокситетразоло

11, 5- Ь) пиридазин.

К перемешиваемому раствору NASH" ч Н. О (10 г, 0,135 моль) в 150 мл воды добавляют 1О г (0,05 моль) б-хлор-8-,карбокситетразоло 11,5-Ь) пиридазина и смесь интенсивно пере" мешивают 2 ч. После охлаждения при

0 С реакционную смесь подкисляют

233-ной соляной кислото". После охлаждения при О с в течение l ч отде. ляют твердое вещество, промывают не-. большим количеством холодной воды, получая 9 г (91,5ь) указанного выше соединения, т.пл. 210 С (разл.).

Элементный анализ

Найдено,4: С 30,41; Н 1,52;

N 35,61; S 16,19 с 5 Н3 М 0 Я

Вычислено,Ф: С 30,45; Н 1,53;

N 35,52; S 16,26

ИК-спектр (KBr): 2540 см " (S-Н), 1725 (С = О).

УФ-спектр (фосфатный буфер при рН 7 4): 3 макс = 258.; Е м = 962.

7-Амино- ((8-карбокси-6-тетразоло

t.1,5-Ь)пиридазинил)-тиометил)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

К горячему раствору (40"С) 6-меркапто-8- ка рбокситетразоло 1, 5-Ь) пи ридазина (8, 2 г, 41, 5 ммоль) и.

11,69 г бикарбоната натрия в 265 мл фосфатного буфера (рН 6,4) по частям добавляют 18,5 г 7-АЦК (68 ммоль) .

40

15 1005 и смесь нагревают, перемешивая, при

60 С в течение 5 ч. После .охлаждения при 20 С отфильтровывают нерастворенное вещество и раствор подкисляют

234-ной соляной кислотой до рН 4,4.

Остаток отФильтровывают, промывают смесью ацетона и воды (3:1) и затем ацетоном, получая натриевую соль указанного выше соединения (75Ж) т.пл. выше 270 С (разл.). 10

Найдено,Ф: С 35,80; Н 2,66;

N 22,43; S 14,66; Na 5,10

С<> H„ Н„О Б На

Вычислено,3: С 36,19; Н 2,33; и 22,72; S 14,86; Na 5,32 )s

ИК-спектр (нуджол): С = О, беталактам, 1770 см "

Уф-спектр (1i НаНСО ):P1 „ = 246; f (о .E = 432 °

Натриевую соль суспендируют в во- 20 де и подкисляют 83-ной соляной кислотой. Получают твердое вещество, которое отфильтровывают, промывают водой, т.пл. 245 С (разл.).

Найдено,Ф. С 38,45; Н 2,90;

N 23 55; S 15,10

С,рьН!! М О Ь

Цычислено,4: С 38,13; Н 2,70;

И 23,94; S 15,76.

Используют этот же способ, полу- зя чают 3 !(8-амино-6-тетразоло 11,5-bl пиридазинил) тиометил1-7-! 2-(2-амино-4-тиазолил)-2-карбоксиметоксииминоацетамидо.1-3-цефем-4-карбоновую кислоту (син-изомер).

Найдено,4: С 37,21; Н 3,02

N 24,98; S 15,64

Вычислено,3: С 37,56; Н 2,82;

N 25,36; S 15,83

ИК-спектр (KBr) (см ),: 1770 С=О

1 (бета-лактам) .

ЯМР-спектр 100 ИГЦ, (ОМНО. - d<) (Д млн.д.): 3 76 (2H, dd, 2"СН ); 4

4 39 (2Н, dd, 3-CH@S); 4,64 (2Н, S, -О-СНФСООН); 5,21 (1Н, d, 6-Н); 5 84 (1H, dd, 7-H); 6,40 (1H, S, 7-Н на пиридазиновом кольце); 6,81 (1Н, S, 5-Н на тиазольном кольце); 6,90-7,50 (2Н, широк. S, -ИН на тиазоле);

7 96 (2Н, широк. S, -МН на пиридазиновом кольце); 9,55 (1Н, d, -CONH-).

Пример 4. 3-E(8-Лмино-6" -тетразоло (1,5-Ь пиридазинил)-тиометил)-7-(2"(2-амино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетамидо)-3-цефем-4-, -карбоновая кислота (син-изомер).

664 16

N, N — Дициклогексилкарбодиимид

t (0,9 r, 4;38 ммоль) добавляют к охлажденному до 0-5 С раствору 2-(2о

-тритиламино-4-тиазолил)-2-метоксииминоуксусной кислоты (3,675 г, 8,28 ммоль) в 13 мл безводного хлористого метилена. После перемешивания в течение 40 мин .при 5 С и 30 мин при комнатной температуре полученную суспензию разбавляют безводным хлористым метиленом. Выделенное твердое вещество дициклогексилмочевину (0,98 г, количественный выход) отфильтровывают и промывают свежим хлористым метиленом. Объединенные растворы в хлористом метилене выпаривают досуха и получают симметричный ангидрид исходной кислоты, который немедленно растворяют в безводном ацетоне (30 мл). Полученный раствор при перемешивании прикапывают к охлажденному на ледяной бане раствору

7-амино-3- ((8-амино-6-тетразоло

1„1,5-b) пиридазинил)-тиометил)-3-цефем-4-карбоновой кислоты (1,65 г, 4,36 ммоль}, триэтиламина (1,22 мл, 8,72 ммоль) и йаНСО (0,347 г, 4,14 ммоль) в водном ацетоне (1:

:1,120 мл). После перемешивания в о течение 1 ч при 0-5 С удаляют баню со льдом и после выдерживания дополнительно в течение 2 ч смесь растворяют в этилацетате (500 мл) и встряхивают с 1н. соляной кислотой (100 мл). Нерастворяющееся вещество (небольшое количество непрореагироваашего 7-аминоцефема) отфильтровывают, органический слой промывают водным раствором хлористого натрия.

Высушивают над сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают. Большая часть исходной 2-(2-тритиламино-4-тиазолил)-2-метоксииминоуксусной кислоть, содержащейся в неочищенной реакционной смеси:, осаждается из диоксанового раствора (30 мл) при медленном добавлении дициклогексиламина (1,4 мл). Спустя 20 мин при

12 С эту циклогексиламиновую соль отфильтровывают, раствор разбавляют этилацетатом (200 мл), подкисляют

1 н. соляной кислотой, и водный слой выбрасывают. Органическую фазу промывают водным раствором хлористого натрия, высушивают. над сульфатом натрия, концентрируют до небольшого объема, затем добавляют к диэтиловому эфиру, получая при этом 3,1 г

17 10056

3- (8-амино- Ь-тетразоло Р,5-Ь) пиридазинил)тиометил)-7-(2-(2-тритиламино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетамидо)

-3-цефем-4-карбоновой кислоты (синизомер). Это вещество обрабатывают 5

504-ной муравьиной кислотой, как описано в примере 1, в результате получают целевой продукт, который, как было показано методами ТСХ, ИКи ЯМР-спектроскопии идентичен продукту, полученному в примере.1.

Используя этот же метод, получают

3- ((8-ами но-6- те тра золо(1, 5- Ь) пиридазин) — тиометил1- 7- (2- (2-амино-4-тиазолил)-2-карбоксиметоксиимино- 15 ацетамидо)-3-цефем-4-карбоновую кислоту (син-изомер); (элементный ана- - лиз приведен в примере 3j.

П р и и е р 5. 3- (8-Карбокси-б-тетразоло11,5-Ь(пиридазинил)-тио- 20 метил)-7- Р-(2-амина-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетамидо)-3-цефем-4-карбоновая кислота (син-изомер).

N и -Дициклогексилкарбодиимид

1 (О, 9 г „4, 38 ммоль) добавляют к ох- 25 лажденному до 0-5 С раствору 2-(2-тритиламино-4-тиазблил)-2-метокси- иминоуксусной кислоты (3,675 г, 8,28 ммоль) в безводном хлористом метилене {,13 мл). После перемешива- so ния в течение 40 мин при 5 С и 30 мин при комнатнсй температуре полученную суспензию разбавляют безводным хлористым метиленом. Выделившееся твердое вещество, а именно дициклогексил. 3s мочевину (0,98 г, количественный вы. ход), отфильтровывают и промывают чистым хлористым метиленом. Объединенные растворы хлористого метилена выпаривают досуха и получают симмет- 40 ричный ангидрид исходной кислоты, который немедленно растворяют в безводном ацетоне (30 мл). Полученный раствор прикапывают при перемешивании к охлажденному на ледяной бане раствору 7-амино-3- (8-карбокси-6-тетразоло (1,5-Ь)пиридазинил)-тиометил)-3-цефем-4-карбоновой кислоты (1,78 г, 4,36 ммоль), 1,22 мл триэтиламина (8,72 ммоль) и бикарбоната натрия (0,347 r, 4,14 ммоль) в водном ацетоне (1:1, 120 мл) ° После перемешива. ния в течение 1 ч при 0-5 С баню со льдом убирают и спустя 2 ч смесь растворяют в этилацетате (500 мл) ss и встряхивают с водным 1 н. раство-. ром НСК (100 мл). Нерастворившееся вещество (небольшое количество не64 18 прореагировавшего 7-аминоцефема) отфильтровывают, органический слой промывают водным раствором хлористого натрия, высушивают над сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают.

Большая часть исходной 2-(2-тритилО амино-4- тиазолил) -2-мето ксииминоуксусной кислоты,. содержащейся в неочищенной реакционной смеси,-осаждается из диоксанового раствора (30 мл) при медленном добавлении дициклогексиламина (1,4 мл). Спустя 12 мин при

12 С соль дициклогексиламина отфильто ровывают, раствор разбавляют 200 мл этилацетата, подкисляют 1 н ° соляной кислотой и водный слой выбрасывают.

Органическую фазу промывают водным раствором хлористого натрия,.высушивают над сульфатом натрия, концентрируют до малого объема, затем добавляют к диэтиловому эфиру, получая в результате 3,3 г 3- 1(8-карбокси-6-тетразоло 11,5-Ь)пиридазинил)тиометил) -7-(2-(2-тритиламино-4-тиазо- . лил)-2-метоксииминоацетамидо)-3-цефем-4-карбоновой кислоты (синизомер). Это вещество обрабатывают

503-ной муравьиной кислотой, как описано в примере 3, в результате получают целевой продукт, который идентичен продукту, полученному в приме" ре 3, согласно данным ТСХ, ИК- и

ЯМР-спектроскопии..

Пример 6. 3- ((8-Амино-тетразоло (1,5-Ь1пиридазинил)-тиометил -7-(2-(2-амино-4-тиазолил)-2-окси" иминоацетамидо)-3-цефем-4-карбоновая кислота (син-изомер).

К раствору 2-(2-тритиламино-4-тиазолил)-2-тритилоксииминоуксусной кислоты (2,25.г, 3,35 ммоль) и триэтиламина (0,47 мл, 3,35 ммоль) в безводном хлористом метилене, охлажо денному до -5 С, в один прием добавляют 0,697 г (3,35 ммоль) пятихлористого форфора. После перемешивания при -5 С в течение 20 мин и 1 ч при комнатной температуре реакционную смесь выпаривают при пониженном давлении без внешнего обогрева до тех пор, пока весь РОСК не израсходует- ся. Остаток растворяют в безводном ацетоне (50 мл) и отфильтровывают хлористоводородный триэтиламин. lloлученный ацетоновый раствор 2-(2-три тиламино-4-тиазолил)-2-тритилоксииминоацетилхлорида прикапывают к раствору, содержащему 0,76 г (2 ммоль),1005

19

7=ами но-3- ((8- амино-6- тетра золо.Х °

1,5-о)пиридаэинил)-тиометил)-3-це- . фем-4-карбоновой кислоты, 0,562 мл (4 моль) триэтиламина и 0,281 г (3,35 ммоль) бикарбоната натрия в 5

35 мл воды и 25 мл ацетона, охлажден- ному до 0 С.

После добавления раствора суспензию перемешивают при ООС в течение .

30 мин и при 25 C - 90 мин. Реакцион- to ную смесь выливают в этилацетат (350 мл) при тщательном перемешива" .нии; добавляют 50 мл воды и потом добавляют такое количество 2 н. соляной кислоты, чтобы довести зна- 1 чение рН водной фазы до 2,0. Отделяют, органическую фазу, промывают водным. раствором хлористого натрия, высушивают сульфатом натрия и выпаривают досуха. Полученную пену растирают в 20 . порошок с диэтиловым эфиром, получая

1,98 r неочищенного продукта,,содержащего значительное количества исходной кислоты. Большая часть этой примеси удаляется при растворении 2 неочищенного материала в диоксане (10 мл) и прикапывании полученного раствора в 70 мл диэтилового эфира.

После перемешивания в течение 10 мин „ отделяют фильтрацией белый осадок, 30 получая в результате 1,02 г 3- 1(8-амино"6-тетразоло Р 5-Ь)пиридаэинил) тиометил)-7-(2-(2-тритиламино-4-тиазолил)-2-тритилоксииминоацетамидо1-3-цефем-4-карбоновой кислоты (син-иэомер).. Полученное выше соединение (1 r) добавляют при перемешивании к 503-ной водной муравьиной кислоте (40 мл), выдерживают при 55 С (масляная баня). Через 35 мин смесь охлаждают до 25 С и фильтруют с отсасыванием; твердое вещество промывают свежей порцией (20 мл) 503«ной муравьиной кислоты и затем дистиллированной во- 4 дой и выбрасывают. Подкисленные растворы объединяют и выпаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют в 99ь-ном этаноле и снова выпаривают, растворяют в 993-ном этаноле, выпаривают до малого объема (5 мл) и фильтруют. Полученный порошок растворяют в 23-ном водном растворе бикарбоната натрия (20 мл) и добавляют древесный уголь. Профильт рованный раствор подкисляют до рН 2 соляной кислотой (2 н.) и перемешивают 5 мин. Осадок собирают фильт664 20 рацией, тщательно промывают водой, затем небольшим количеством этанола и высушивают при 65 С в течение 16 ч,, получая 0,25 г 3-((8-амино-6-тетразоло11,5-Ъ)пиридазинил)-тиометил)-7 2-(2-амино-4-тиаэолил)-2-оксииминоацетамидо1-3-цефем-4-карбоновой кислоты (син-изомер) в виде белого порошка разлагающегося беэ плавления прио близительно при 205 С.

Найдено,3: С 36,81; Н 2,88;

27 73; S 16 92

С41 Н Nqy 0 5

Вычислено,4: С 37,15; Н 2,75 и 28,03; S 17,20

ИК-спектр (KBr), см : 3400 (-NH)

3000 (-ОН), 1760 (» С = О, бета-лактам).

ЯМР-спектр, 100 МГц (ОМСΠ— dg), млн.д.: 3,61 (1H, д., 2-.СН ); 3,89 (1Н, д., 2-СН ), Х = 17 Гц; 4,16 (1Н, A 3-CHgS), 4,60 (1Н, д., 3-CH S) 3 = 13 Гцр 5,21 (1H, д.

8-Н, 5,86 (1Н, дд. 7Н), 6,42 (lH, с., 7-Н в кольце пиридазина), 6,76 (1H, с., 5H в кольце тиазола), 7,20 (2Н, шир. с., -ИН в кольце тиазола); 8,02 (2Н, шир., с., -NH> в кольце пиридазина); 9,56 (1Н, д., -C0NH-), 11,66 (1Н, шир. с., -N-OH).

Пример 7. К суспензии 3- ((8-амино-б-тетразоло(1,5-b)-пиридазинил)-тиометил)-7-(2-(2-амино-4-тиазолил)-2"метоксииминоацетамидо1"3-цефем-4-карбоновой кислоты (синизомер, 5,63 г) в 80 мл воды добавJlRloT стехиометрическое количество бикарбоната натрия, при этом достигается полное растворение соединения. Этот раствор затем лиофилизуют для получения натриевой соли 3-((8-амина-б-тетразоло(1,5-bj пиридазинил)"тиометил)-2-(2-(2-амино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетамидо"1-3-цефем-4-карбоновой кислоты (син-изомер), т.пл.: выше 240 С (разл.) °

Найдено,3: Na 3,80

Вычислено,3: Na 3,90

ИК-спектр (KBr), 1760 см у С=-0 (бета-лактам).

Пример 8. К суспензии 3-((8-карбокси-6-тетразоло Г1„5-Ь1-пиридаэинил)-тиометил)"7-(2-(Z-амино-4-тиазолил) "2-метоксииминоацетамидо) 3-цефем-4-карбоновой кислоты (син-иэомер, 5,92 г) в 80 мл воды добавляют два эквивалента бикарбоната натрия для полного растворения соединения. Этот

21 раствор затем лиофилизуют, чтобы получить натриевую соль 3- ((8-карбокси-6-тетразол3 11,5-bjпиридазинил)--тиометил)-7-(2-(2-амино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетамидо)-3-цефем-4 карбоновой кислоты (син-изомер), т.пл. выше 270 С (разл.). о

Найдено,r.: Na 6,91

Вычислено,б: Na 7,19

ИК-спектр (KBr): 1765 см, С=О, О бета-лактам.

Пример 9 ° К раствору 5 92

3-((8-карбокси-6-тетразоло1 1,5-Ь1пиридазинил)-тиометилД-7-1 2-(2-амино-4-тиаэолил)-2-метоксииминоацетамидо 1

-3-цефем-4-карбоновой кислоты (сийизомер) в 400 мл ацетона добавляют два эквивалента 303-ного раствора натриевой соли 2-зтилгексановой кислоты в. иэопропиловом спирте. После перемешивания в течение 30 мин при комнатной температуре смесь разбавляют петролейным эфиром и полученный осадок фильтруют> получая динатриевую

664 22 соль 3- ((8- ка рбо к си- Ь- те т ра эоло (1, 5- Ь1 пиридазинил) - тиометил)-7- t 2- (2-амино-4- тиазолил) -2-метоксииминоацетамидо)-3-цефем-4-карбоновой кис" лоты (син-изомер), т ° пл. выше 270 С о (разл. ) . Найдено,3: Na 6,91

Вычислено,3: Na 7,19

ИК-спектр (KBr) 1765 см б С = О, бета-лактам.

Э

Пример IQ. Фармацевтическую композицию для инъекций готовят путем растворения 100-150 мг динатриевой соли 3- ((8-карбокси-6-тетразоло (1, 5- Ь) пи ридазинил) -тиометил.)-7- (2- (2-амино-4-тиазолил) -2-метоксииминоа