Способ получения биомассы энтеробактерий используемой для адсорбций антител

Способ получения биомассы энтеробактерий используемой для адсорбций антител

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ, ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ДЛЯ. АДСОРБЦИИ АНТИТЕЛ, путем посева бактерий на плотную питательную среду, содержащую источники азота, углерода, минеральные сопи и стимулятор роста, с последующим инкубироваШ1ем и сбором полученной биомассы, о тличающийся тем, что, с цепью повышения выхода целевого продукта, посев осуществляют на среду, содержащую в качестве стимулятора роста натрий гипосульфит 4-6 г/л среды, натрий сернокислый кристаллический 8-12 г/п, экстракт кормовых дрожжей 4-6 г/л, глицерин 15-25 мл/л и анионообменную смолу АВ-17 4-1О г/л. СО

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„Я0„„1 008243 д(д) С 12 К 1/20

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCHOIVIV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (2 1 ) 3318241/28-13 (22 ) 16,07.81 (46) 30.03.83. Бкщ. ¹ 12 (72) B. К. Голшмид, Л. Н. Богословская, Н. М. Ландсман, Т. Н. Токинова и Ю. А. Ратинер (7 1 ) М ос ковский научно-исследова тель ° ский институт вакцин и сывороток им.

И. И. Мечникова (53 ) 576.8,093 (088.8) (56) . 1. Смирнов В. В. и др. Научные основы производства диагностических препаратов, Киев. Наукова Думка

1 960.

2. Терентьев Л. И. и др, — В кн.: Материалы 1 Всесоюзного рабочего со» вешания. Махачкала, 1975, с. 73-76 (прототип). (54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ, ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ДЛЯ AllCOPEUHH АНТИТЕЛ, путем посева бактерий на плотную питательную среду, содержащую источники азота, углерода, минеральные соли и стимулятор роста, с последующим инкубированием и сбором полученной биомассы,о тл н ч а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, посев осушествляют на среду, содержащую в качестве стимулятора роста натрий гипосульфит 4-6 г/л среды, натрий сернокислый кристаллический 8-12 гlл, экстракт кормовых дрожжей 4-6 г/л, глицерин 15-25 мл/л и анионообменную смопу АВ-17 4-10 г/л.

1 1008243 2 ится к микробиоло- личными комбинациями добавок. Среда попьзовано при про- приготовлена на основе триптического чееких антнтельных гидролизата сгустков крови лабораторных. животных и содержит 170 мг% амннного получения биомассы к азота и 3% агара. Расплауленную среду ьэуемой для адсорб- как без добавок, так и с добавками разыращивания бакте- ливают в матрацы и стерилизуют автоельной среде, содер- клавированием (112ОС, 30 мин). Матраеиновую основу, или цы с горячей простерилиэованной средой . ходов производства 19 оставляют в горизонтальном положении а лощади, сгустков при комнатной температуре для застываких свинок и т.n.) (1). получения биомассы В качестве добавок используют глицеьэуемоя» для адсорб рин (15-25 мЛ), или экстракт кормовых осева бактерий на . 3$ дрожжей (4-6 г), или натрий гипосульсреду, содержащую фит (4-6 г), натрий сернокислый (8— ерода, минеральные 12 г), глицерин 15-25 мл}, аминообменна основе гндроли- ную смолу АВ»17 (4-10 г) или натрий изводства с добавле- гипосульфит (4-6 г), натрий сериокислый иэата Хоттингера и 20 (8-12 r), экстракт кормовых дрожжей аиде натрия сернокис. (4-6 r), глицерин (15-25 мл) и анионоинкубированием и обменную смсду AB-17 (4-10 r). Колиомассы $2). чества добавок указаны иэ расчета на способы не обеспе .. один литр среды. Все вешества, кроме ода биомассы, по- 2> анионообменной смолы АВ-17, вносят в ммы реагируют на среду до разлива в матрацы. Смолу вноемых стимуляторов сят отдельно в каждый матрац до стери хода биомассы. лиэации, — повышение выхода Поверхность застывших сред засева30 ют различными сероварами эшерихий (по достигается тем, 20 мл бульонной культуры). Выращивания биомассы энтеро- ние проводят при 37 С в течение 18ой для адсорбции 20 ч. Выросшую культуру смывают растбактерий на плот- вором натрия хлорида (100 мл раствора у, содержащую ис- З> на 1 матрац). Полученные суспензии бакода, минеральные со терий одного серовара сливают из разных а, с последующим матрацев вместе перемешивают и опреором полученной био- деляют объем и густоту суспенэии по твляют на среду, со- оптической плотности на ФЭК-М в сравстимулятора роста ненни со стандартами (см. табл. 1).

Изобретение относ гни и может быть.ис изводстве диагности препаратов.

Известен способ энтеробвктерий, испол ции антител, путем в рий на плотной питат жащей мясную и каз приготовленной иэ от (эритроцитов, фибрин крови кроликов, морс

Известен способ энтеробактерий, испол ции антител, путем п плотную питательную источники азота, yrn

c:îëè, приготовленную эатов иэ отходов про нием мясного гидрол стимулятора роста в лого, с последукзцим сбором rëëó÷eííîé би

Однако известные чивают высокого вых скольку не все шта присутствие использу роста увеличением вь

Бель изобретения целевого продукта.

Поставленная цель что в способе получе бактерий, испопьэуем антител, путем посева ную питательную сред точники азота, углер ли и стимулятор рост инкубированием и сб массы, посев осущес держащую в качестве

40 натрий гипосульфит 4-6 г/л среды, натрий сернокислый кристаллический 812 г/л, экстракт кормовых дрожжей 46 г/л, глицерин 15-25 мл/л и анионообменную смолу AB-17 4-10 г/л.

Пример 1, Испытывают воротную питательную среду без добавок и с разПолученные бактериальные суспензии используют для адсорбции гетерологичес . ких антител иэ сывороток и рассчктывают расход питательных сред для получения бактериальной массы, достаточной для адсорбции одного литра сыворотки.

1008243

0Q с9 л4 с )

+ + о о сч л сО

Я сч

Р» о с с9 о о

Р3

cu O о

1-1 о

tQ . с 3 о

t сО сО л1 о а iC д C

e л

3 у 2

Я с .о ф

Ж f» в g

g.

Д О

Q,а а ь о

Ф (Б.аа уя

6 р

Бщ е Ц

g p

Ю Ц и

А р

О р

Е о со- и» л с Г л1 о со»

Ч л Я сО сО сО сО сО

m o, Г О) л л сО О О сч" - л л о о со

cD сч ч л

О-О» сО с» л л ас»Л е, о

o., т4 ев lQ с ф» о ®5а3

Ф»

gJ о .. -мсЧ с о о о" фаа..

"И ©й0 3

5 1008243 4

Как видно из табл 1, плотность попу- си на среде с добавкой экстракта кормочениых взвесей эшерихий всех испытан- вых дрожжей 5,9 млрд/мл. иых рм новидностей наибольшая при на- Пример 2. Испытывают плотную личии в среде всех пяти добавок. питательную среду на основе мясных гидS ролизатов Хоттингера и ту же среду с доТак, например, прирост плотности ВаВе бавками. Состав добавок и методика носи штамма 0144 на среде с четырьмя до- лучения адсорбента аналогичны примеру 1. бавками, но без ЭДК (по сравнению со сре- В табл.2 приведены данные интенсивносдой без добавки), составляет 8,6 млрд/мл, ти эшерихий на мясной среде Хоттингера и а прирост пложости бактериальной взве- 14 влияния на этот показатель различных добавок.

Табли ца 2

Интенсивность роста эшерихий (млрд/мл) на мясной среде

Хоттингера с 3%-ным агаром

Мясная среда Хоттингера

17,4

18,6

18,1

19,2

Мясная среда Хоттингера + 0,5%-ная ЭКД+

0,5%-ный гипосульфит+ 1%-ный натрий сернокислый + 2%-ный глицери н+ О, 5%-ная смола

34,3

31,0

35,1

33,0 равного объема сыворотки необходимое количество адсорбента получают с меньшего числа матрацев.

Составитель П, Бонарцев

Редактор Е, Кинив Техред Т.Маточка Корректор О. Билак

Заказ 2272/35 Тираж 521 Подписное

В11ИИГП1 Государственного комитета СССР по лелям изобретений и открытИй

1130, 35, Москва, Ж-35, Раушская наб„д. 4/5

Филиал 1И111 "11яте т, r, Ужгород, ул. Проектная, 1

Из -таблицы видно, что добавление рекомендованной совокупности стимуляторов роста обеспечивает увеличение концентрации бактерий на этой среде в 1,5-2,0 раза.

Приведенные примеры показывают пре имушество предлагаемого способа, обеспечиваемое повышением, выхода бактериальной биомассы, что сопровождается экономией питательных сред, расходуемых для изготовления адсорбента.

Экономический эффект применения изоб-, ретения обуславливается не только умень-. шением расхода питательных сред, но и снижением затрат труда, рабочего времени и посуды, так как для обработки

11омимо этого, высокий выход биомассы на средах с питательной основой, изготовленной из отходов производства диаг. ностических препаратов, может значительно сократить использование в производстве пишевых продуктов (мясо или Высокосортный казеин) для приготовления питательных сред, а в случае использования сред на основе пишевого сырья — экономию этих продуктов. Эффект достигается и частичной утилизацией отходов, загрязняюших окружаюшую среду.