Способ определения жизнеспособности зооспорангиев возбудителя опухолей картофеля
Патент 1014880
Авторы
Классы МПК
Способ определения жизнеспособности зооспорангиев возбудителя опухолей картофеля
Иллюстрации
Реферат
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ ЗООСПОРАНГИЕВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ОПУХОЛЕЙ КАРТОФЕЛЯ, включающий окрашивание :юс раствором производного тетразолия в присутствии гриба-активатора , отлич ающи йся тем, что, с целью ускорения процесса, окрашивание проводят 0,5 - 0,7%-ным раствором нитросинего тетраэолия при Зб-ЗВ с в присутствии гомогената гриба Aspergillus niger 36.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
3(59 С12Ы1 00
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ OCOP
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ABTOPCHCNIY СВИДЕТЕЛЬСТВУ
)1 И 1»:,. ( (t
l(21) 3338996/30-15 (22) 22,09.81 (46) 30е04.83. Бюл. у 16 .(72) Н.Е.Сурнакова, Е.Н.Феофилова и К;Е.Круглякова (71) Ордена Ленина институт химичес.кой физики АН СССР (53) 576.807(088.8) . (56) 1, Рак картофеля, Л., Колос, 1978, с. 72.
2. Phytopathology, 1967, 9 57, р. 965-968.
„.SU„„!1 014880 А (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ ЗООСПОРАНГИЕВ ВОЗБУДИТЕЛЯ
ОПУХОЛЕЙ КАРТОФЕЛЯ, включающий окрашивание ик раствором производного тетразолия в присутствии гриба-активатора, отличающийся тем, что, с целью ускорения процесса, окрашивание проводят 0,5 — 0,7В-ным раствором нитросинего тетразолия при
36-38оС в присутствии гомогената гриба Aspergillus niger Зб.
1014ВВО
Изобретение относится к микробиологическим исследованиям и может быть использовано в сельском хозяйстве и в Государственных инспекциях по карантину р1ля определения жизнеспособных зооспорангиев возбудителя опухо-, 5 лей картофеля.
Единственно достоверным способом определения жизнеспособных эооспорангиев является биологический, т.е„ высаживание восприимчивых к раку сор- 10 тов картофеля в почву, содержащую зооспорангии патогена (1) .
Однако результаты биологической проверки могут быть получены только через 60 сут после высадки картофеля )5 в почву, так как это вегетационный период развития растений картофеля, после которого проводят учет зараженных и незараженных растений по опухолевым наростам на клубнях, столонах и стеблях картофеля.
Известен также способ определенияжизнеспособных зооспорангиев возду- i дителя опухолей картофеля, заключающийся в окрашивании их 0,5%-мыа три125 фенилтетразолхлоридом {ТТХ) при 35©С в присутствии гриба-активатора Озрех gilius tumigatus. Bce жизнеспособные зооспорангии окрашиваются в розовый цвет на 45 сутки (2).
Недостатком способа является его длительность.
Цель изобретения - ускорение про цесса
Для достижения цели в способе определения жизнеспособности зооспо,рангиев возбудителя опухолей картофе.ля, включающем окрашивание их растяором производного. тетраэолия в присутствии гриба-активатора, окрашивание проводят 0,5-0,7%"ным раствором нит росинего тетразолия при 36-38 C s присутствии гомогената гриба Aspergillus niger 36.
Пример, К 50 мг эооспорангиев добавляют 2 мл 0,5% НСТ, 6 мл
0,05 И КН РО и 5 капель гомогената
0spergillus niger Зб и термостатируют при 37©С. Микроскопирование про" водят на каждые 3-4 сутки.
На ll сутки инкубирования жизне- способные зооспорангии окрашиваются в черный и бурйй с синим оттенком цвета 904 и 10% не окрашиваются (зеленые) - проросшие или пустые зооспорангии1 ., Контроль - зооспорангии убитые автоклавированием в течение 11 ч (4ч+ 4ч+ Зч) при 125 С и 1,5 атм.
Убитые зооспорангии окрашиваются в розовый цвет 75%, в бурй и черный цвета 22% (10%+12%} и ЗЪ не окрашиваются (пустые зооспорангии).
Результаты окрашивания жиъых и убитых зооспорангиев приведены в таблице./
1014880
66 х) }
1
1
-I
3! !
)
I
1
1 l
1
;3
:1
3 о
Р» !
I Ф Ц
I
I
1
3
3
1
1
)
ИЪ а
Ю
+1
»В ю
° Ь
I
»h а
Ю
+I
О
° Ь
1!
»Ч
»»Ъ
М
ОЪ
I
1
3 !
I !
f !
I
1
1
I
I
»»Ъ
М а ( (1
» »Ъ
»-»
МЪ
% »3»
° Н
Г Ъ »3» а 1
»»Ъ
» ) I
»Ъ
+! ьь
I о
Q о
И о
0
И
ОФ
ОФ
Я М
Ц»»3
N Р
I !
I !
I
1 о
И
ОФ
Ф И хи
И Ю хо
I») V
j) iI
»»!
Ц о
Р
Е» о
М о
Р» о
I
I -o
I! с
} Р»! Q
I 3fI
1 Ф
I М
1 й
1»»3
1 Р» о 1 . И
Q о о
1 Ц
I Ж
) i
l a!
I 3
1 9
1 Р»
; 1 )3(I 1
I 9
I Я о
3 tO I о ! Р» I ! 3 ! Ж ! Ф и ! 9 I
» и 1 1
» Э
-l A
I 9 I I » 1
1 I
i I
9 I
I 3 I
I I»I 1. о о а
l Я
I Е! Ф
1 Ф
»»Ъ !
»»
I 1.! 9 !
I 3.й О I L !
I 4t
3 Д
» Ь .(Л
+1
Ж
) о
+I ю"1 CO
»»
»»Ъ
»(-»»Ъ
»»Ъ ф
СЧ
»Ъ с
»(! g
Г Ъ»-» .
М
l +}
РЪ
CI
»»Ъ
СЧ
1
<М
) ! !
I
I.
I
1
1
1
1 !
1 (I
3
I
I
1
1, !
I
I (I
1014880
Составитель М.Мирзаев
Редактор E.Ëóøíèêoâà Техред Ж.Кастелевич Корректор A.дзятко
Заказ 3132/2l Тираж 523 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35„ Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП Патент, r.Óæãoðoä, ул.Проектная, 4 Она включает М+ tim и достоверности различий Ы окрашенных зооспорангиев в разные цвета (черных ат бурых, бурых от зеленых, зеленых от розовых). Условие достоверности 2,18.
Использование предлагаемого способа обеспечивает более быстрое опрецеление жизнеспособных зооспорангиев (11 сутки) и высокую достоверность определения