Способ консервирования ткани яичника человека

Способ консервирования ткани яичника человека

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ ТКАНИ ЯИЧНИКА ЧЕЛОВЕКА путем инкубирования его в криозащитном растворе с последующим охлаждением в два дтапа и помещением в жидкий азот, отличающийся тем, что, с целью повышения жизнеспособности и функциональной активности, ткань яичника инкубируют в течение 30-40 мин в криозащитном растворе, а замораживание ведут со скоростью 0,5 2°/мин до (-6) - (-8)С, после чего осуществляют изотермическую выдержку в течение 8-10 мин, а Затем - ей скоростью . 9-10/мин до (-40) - (-60)С перед погружением в жидкий азот.

09) (1И

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

М 0 А 01 Н-1 0

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСН0МУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ л

Э.Ф., Ъа

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР . ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) .33М995/28-13 (22) 29.06.81 (46) 15.05.83. Ьол. И 18. (72) В.И.Грищенко, Г.С.Лобынцева, Л.Г.Демина, H.Н.Чуб, В.Ф.Козлова, «А.В.;Черкашина и Ю.П.Тимошенко (7 1) Институт проблем криобиологии и криомедицины АН Украинской CCP (53) 615 361.651(088.8) (56) 1. Пушкарь Н.С. и др. Низкотемпературная консервация и трансплантация яичника, Рига, 1972, с.480. (54)(57) CROCOS КОНСЕРВИРОВАНИЯ ТКАНИ

ЯИЧНИКА ЧЕЛОВЕКА путем инкубирования

его в криозащитном растворе с последующим охлаждением в два зтапа и помещением в жидкий азот, о т л ичающий с я тем, что, с целью .повышения жизнеспособности и функциональной активности, ткань яичника инкубируют в течение 30-40 мин в криозащитном растворе, а замораживание . ведут со скоростью 0,5-2 /мин до (-6) — (-8) С, после чего осуществляют изотермическую выдержку в течение

8-10 мин, а затем - со скоростью .

9-10 /мин до (-40) - ("60)оС перед погружением в жидкий азот.

1017251

Составитель С.Малютина

Редактор А.Долинич Техред М.Костик Корректор А.Повх

Заказ 3413/4 Тираж 721 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, 3-35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к медицине

:И может найти применение при консервировании яичников с целью последующей их трансплантации.

Известен способ консервирования ткани яичника путем инкубирования .его в криоэащитном растворе различной концентрации "с последующим охлаждением ,в.два этапа: сначала со скоростью

1 /мин до -15 С, далее со скоростью

10о/мин до -196 С..и помещением в жидкий азот t. 1)-.

Однако этот способ не обеспечивает

"сохранения высокой жизнеспособности и функциональной активности ткани

15 яичника человека, Цель изобретения - повышение жизнеспособности и функциональной активности ткани яичника человека. .Цель достигается тем, что согласно способу консервирования ткани яичника человека путем инкубирования его в криозащитном растворе с последующим охлаждением в два этапа и помещением в жидкий азот ткань яичника инкубируют в течение: 30-40 мин в криоэащит-. ном растворе, а замораживание ведут со скоростью 0,5-2в/мин до (-6) -(-8)C, после чего осуществляют изотермическую выдержку в течение 8-10 мин, а .затем - со скоростью 9-10е/мин до .(-40) - (;60) С перед погружением в, жидкий азот.

° Способ осуществляют следующим об- з5 разом.

Кусочки ткани яичника размером

О,:5 х 0,5 х 0,5 см помещают вместе с . консервирующим раствором в полиэти.леновые цилиндрические ампулы, гер- 40 метизируют и после 30-40 мин экспозиции замораживают со скоростью 0,52 /мин до (-6) - (-8) С и выдерживают . при этой температуре 8-10 мин, а затем - со скоростью 9-10 /мин до (-40) - (-50) C, после чего погружаю1 в жидкий азот.

Размораживание осуществляют в два этапа: от -196 С до (-60) - (-70) С путем погружения в спиртовую баню с температурой -70 С на 5-7 мин, затеи от (-60) - (-70)оС до 0 - (+1) С в водяной бане при 40"С.

Пример. В.условиях операционной у больной по поводу миомы матки и кистозных изменений яичника удаляют яичник и помещают в стерильный физиологический раствор с антибиотиками.

Перед замораживанием яичник трижды промывают стерильной средой - 199 с антибиотиками, измельчают в этой же среде и кусочки размером 0,5х0,5х0,5 см помещают в полиэтиленовые ампулы с консервирующим раствором, содержащим

90 мл среды - 199, 12 мл ПЭО-400 и 2 мл

NaHC0 . В каждую ампулу объемом 2 мл помещают 5-6 кусочков ткани, необходимых для одноразовой трансплантации больному, Материал герметизируют и замораживают со скрростью 1 /мин до

-6 С выдерживают при этой температуре 10 мин, затем со скоростью 10 /мин охлаждают до -40 C .после чего погру" жают в жидкий азот и хранят в течение 2-х лет.

Оттаивание производят. в 2 этапа: от - 196 C до -70 С путем погружения в спиртовую баню с температурой -70 С ь в течение 5 мин, а затем от -70 С до

О С - в водяной бане при +40 С.

Способ позволяет сохранять жизнеспособность и гормональную активность ткани яичника в течение длительного периода времени (до 2-х: лет).Клиническое применение консервированной ткани яичника позволяет отказаться от длительной (до 1 г) гормональной терапии и повысить уровень деторождаемости.