Штамм @ @ @ 673/67 @ используемый в качестве тест-культуры для определения тимидина в питательных средах

Штамм @ @ @ 673/67 @ используемый в качестве тест-культуры для определения тимидина в питательных средах

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ШТАММ VIBRIO CHOtERAE ELTOR :б73/67 {муэей живых культур Всесоюзного НИ противочумного института Микроб используемый в качестве тесткультуры: для определения тидшдина в питательных средах.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИДЛИстИЧЕСНИХ

РЕСГ)УБЛИН

ИЮ (Н) З(Я) С 12 и 1/00//С 12 N 1/О

ОПИСАНИЕ ИОБРЕТ

К ABTOPCHQMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3357011/28-13 .. (22) 07. 09,,81

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ, СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЦТИЙ (46) 15.05 ° 83. Бк>л. 9 18 (72) iC.È.Áîãäàíîâà и Б.Н.Иншанькин (71) Ростовский-на-Дону государствен. ный научно-исследовательский противочумный институт (53) 576.8.093.1(088.8) (54) ШТУДИИ I SRI 0 CHOLERAE ELTGR ,673/67 P,испольэуемый в качестве тест„культуры для определения тимидина в

1питательных средах. (57) ШТРИХИ VLPPIO CHOLL,RAE БИТОК

673/67@ (муэей живых культур Всесовэ ного НИ противочумного института "Микроб" используемый в качестве тесткультуры для определения тимнднна в питательных средах.

1017726

I йолимиксина. Образует вибрионы. Не лиэогенен.

Лизируется холерным д.;агностическим бактериофагом эльтор. Агглютинируется до титра видовой холерной

О-сывороткой и типовой "Огава" сыворот. кой.

Факультативный аэроб.

Особенностью штамма является хромосомальная мутация, обусловливающая его зависимость от экзогенных добавок тимидина .(0,1-10 мкг/мл среды).

Определение тимидина осуществляют как в жидких средах пробирочным методом в ряду стандартных растворов тимидина в пределах 0,1-10 мкг/мл, так и в плотных средах чашечным методом в ряду стандартных растворов тимидина 0,5-50 мкг/мп.

Пример. Определение проводят в минимальной солевой среде М-9, Na

1 г, 20%-ного раствора глюкозы 20 мл, 0,1 М раствора Мд$01. 10 мл, 0.01 М раствора ЯаС12 10 мл, дистиллированной воды до 1000 мл, рН 7,6.

Готовят два параллельных ряда пробирок с последовательными десятикратными разведениями исследуемой питательной среды. Разводят до.10 ЪИнимальной средой беэ добавления тимидина.

Для .построения стандартной кривой роста тест-штамма два параллельных ряда пробирок заполняют 4,5 мл синтетической средой (4,5 мл) с добавлением тимидина в концентрациях

100, 10, 1, 0,1 и 0,01 мкг/мл. Затем в каждую пробирку как в опытном, так и в стандартном рядах вносят по

0,5 мл суспензии культуры тест-штамма. Посевы выдерживают при 37 С в течение 24 ч,после чего производят регистрацию- интенсивности роста штамма путем измерения мутности среды с помощью нефелометра.

Индикаторную:культуру предварительно инкубируют в питательном бульоне Мартена рН 7,6 в течение 18 ч с добавлением до 10 мкг/мл тимидина и перед началом определения дважды отмывают .буферои от бульона с помощью центрифугирования. Концентрацию клеток доводят до 10"кл/мл физиологического раствора.

Использование штамма позволяет определять тимидин в концентрации 0,350 мкг/мл среды.

Предложенный штамм может найти применение для рЕшения вопросов бутими нового мутагенеза, выявления причин гибели клеток нри бестиминовом голодании, синхронизации деления бактерий и для других целей.

Изобретение относится к области микробиологии и касается штамма

Vibrio choEerae eItor 673/67 ", кото.рый может быть использован для микробиологического определения тимидина в различных жидких и плотных питатель-5 ных средах при исследовании качества питательных сред для диагностики холеPH °

Целью изобретения является создание штамма Vibrio cholerae eItor 10

673/67+ ь", используемого в качестве тест-культуры для определения тимидина B питатепьных средах.

Штамм получен путем воздействия супермутангеном (нитрозоизанидином ) на делизогенизированный вариант

V.eItor 673/67 с последующей селек. цией на триметопрнме.

Хранится в коллекции Всесоюзного музея живых культур патогенных микроорганизмов института "Микроб" под .номером 673/67 ь"-.

Шт амм Vibrio е.йо1е гае e3tor

673/67 "характеризуется следующими свойствг;ми.

Культурально-морфологические признаки. Клетки суточной культуры штамма.представляют. собой слегка изогнутые грамотрицательные палочки с уме,ренно выраженным полиморфизмом вели- З0 чиной 1,5-2,0 х 9,3 - 0,4 мкм.

Агар Мартена с добавками 10 мг/мл тимидина (рН 7,6-7,8). Через 12-16 ч вырастают округлые плоские колонии с ровным краем, прозрачные в прохо- 35 1ящем и слегка голубоватые в отраженном свете.

Бульон Мартена и 1В-.ная пептонная вода со щелочным значением рН. Клетки штамма дают равномерное помутнение 40 с нежной пленкой на поверхности.

Глюкоэо-минеральные синтетические среды (среда Бхаскарана и Роули М-9) рН 7,8-8,0 с добавЛением 10 Мкг/мЛ тимидина. Образуются полупрозрачные колонйи с ровными гладкими краями размером 1,5-2,0 мм с несколько замедленным ростом (24 ч).

Физиолого-биохимические признаки., штамм обладает оксидазной активною- 50 тью ферментирует.до кислоты без газа;: гюпокозу в среде Хью H Лейфсона в аэ робных и анаэробных условиях.

ДекарбоксилИруют лизин и не обла-, дают дигидролаэой аргинина. В средах 55

Гисса ферментирует сахарозу, манноэу, . маннит. Арабинозу и лактозу не сбра-, живает; Обладает диагностической активностью. Образует индол и не образует сероводород. Продуцирует ацетил-.60 метилкарбинол. Не гомолитичен. Растет на среде. с добавлением 50 мкг/мл вниипн Заказ 3481/28

Тираж 523 Подписное

Филиал ППП "Патент", г.ужгород,ул.Проектная,4