Питательная среда для культивирования балантидий свиней

Питательная среда для культивирования балантидий свиней

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БАЛАНТИДИП СВИНЕЙ, Содержащая натрий хлористый,натрий фосфорнокислый двузамещенный, калий фосфорнокислый одноэамеценный, крахмал -и воду, отлич я-с я тем, что, с целью удлинения сроков переживания балантидий и увеличения их биомассы, среда дополнительно содержит биогенный стимулятор ФиБС при следующем соотношении ингредиентов, г/л: Натрий -хлористый 6,0-8,0 Натрий фосфорнокислый двузамещенный 1,0-2,0 Калий фосфорнокислый однозамещенный 0,6-1,0 Биогенный стимулятор ФиБС80,0-150,0 Крахмал6,25-1(0 водаДо 1 л

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСЛУБЛИН

3(50 С 12 N 1 10

0,6-1,0

80 0.-150,0

6,25-10 0

До 1 л

0CV)3APCTBEHHblA HOMHTET CCCP

fIO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3384720/30-15 (22) 29.12 ° 81 (46) 15 05 ° 83. Бюл. Р 18 (72) А.Ф. Манжос,Л.К. Лихвоэ и В.С. Сумцов (71) Украинский ордена Трудового

Красного Знамени научно-исследовательский институт экспериментальной. ветеринарии (53) 616.993.1 (088 8) (56) 1. Авторское свидетельство СССР

9 699015, кл. С 12,N 5/02, 1978. (54)(57) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БАЛАНТИДИЙ СВИНЕИ, содержащая натрий хлористый, натрий фосфорнокислый двуэамещенный, калий

„„SU„„1017727 фосфорнокислый одноэамещенный, крахмал "и воду, отличающаяся тем, что, с целью удлинения сроков переживания балантидий и увеличения

Нх биомассы, среда дополнительно содержит биогенный стимулятор ФиБС при следующем соотношении ингредиентов, г/л:

Натрий хлоюистый 6,0-8,0

Натрий фосфорнокислый двуэамещенный 1,0-2,0

Калий фосфорнокислый одноэамещен ный

Биогенный стимулятор

ФИБС

Крахмал

Вода

1017727 лены в табл.1.

1

Изобретение относится к биологии, а именно к средам для культивирования паразитических инфузорий, и может быть использовано в работе диагностических лабораторий.

Известна среда для культивирования 5 балантидий свиней, содержащая хлористый натрий, двуэамещенный фосфорнокислый натрий, одноэамещенный фосфорнокислый калий, лизат слизистой оболочки кишечника свиней, крахмал 10 и воду (.1g.

Однако на укаэанной среде баланти: ий хорошо растут и размножаются s течение первых 72 ч. В дальнейшем среда мутнеет и для поддержания интен;5 сивного роста паразитов необходимо проводить частые пересевы.

Целью изобретения является удлинение сроков переживания балантидий и увеличение их биомассы.

Поставленная цель достигается тем, что среда дополнительно содержит биогенный стимулятор ФиБС при следующем соотношении ингредиентов,. г /л:

Натрий хлористый 6,0-8,0

Натрий фосфорнокислый двуэамещенный 1,0-2,0

Калий фосфорнокислый однозамещенный О, 6-1 0

Биогенный:стимулятор

ФиБС 80,0-150,0

Крахмал . 6,25"10,0

Вода До 1 л

П р, и м е р 1..Питательную среду приготавливают следующим образом. 35

Взвешивают 6 5 r хлористого натрия, 1 2 r натрия фосфорнокислого двузамещенного 0,6 г калия фосфорнокислого однозамещенного и растворяют их в 1000 мл дистиллированной воды ° В 40 течение 10 мин раствор стерилиз:ют кипячением. После стерилизации удаляют осадок путем двукратного фильтрования через фильтровальную бумагу и доводят объем дис-иллированной во- 45 дой до первоначального.. Измеряют рН среды и титруют ее 53-ным водным раствором едкого натрия до 7,2-8,0.

Среду разливают в пробирки по 9 мл и стерилнзуют в автоклаве при l атм в течение 20 мин, после остывания добавляют на кончике скальпеля рисовый крахмал и оставляют до полного просветления ° Хранят среду в бытовом холодильнике до 30-45 дней.

Перед посевом балантидий в каждую 55 пробирку добавляют ФиБС s дозе 1 мл.

ФиБС - это биогенный стимулятор, приготовленный из отгона лиманной грязи и содержащий коричную кислоту, кумарины. Представляет собой бесц- 60 ветную жидкость, рН 4,6-5,4, расфасован в ампулы по 1 мл.

Пример 2. От 26 поросят отобран ма ериал (фекальные массы), который исследовали микроскопически на предмет обнаружения балантидий.

В 17 пробах обнаружены простейшие (до 2500 экземпляров в 1 грамме). Со

scex проб произвели высев на предлагаемую питательную среду и известную среду, которая служила в качестве контроля (по 3 пробирки из каждой пробы). Высев производили фекальными массами (плотные - величиной с горошину, жидкие 2-5 капель).

Размножение простейших на предлагаемой среде наблюдалось уже к 18-му часу после посева. Плотность паразитов достигала 1500 в 1 мл. Размножение балантидий на известной среде к этому времени не отмечалось.

Результаты исследований представПервый пересев на обе среды производили на 24-м часу. Максимум роста отмечали к 48-му часу. Последующие пересевы на предлагаемую среду осуществляли через каждые 120 ч. На известную среду пересевы делали через

48-72 ч, так как через 96 ч она,становилась мутной, с хлопьями, и через

144 ч культура погибала, Переживаемость балантидий на предлагаемой среде достигала 336 ч. Культурально балантидий вЫделены иэ всех 26 проб. Всего произвели 12 пассажей.

В.табл. 2 представлены среды с оптимальным, минимальным и максимальным содержанием компонентов. !

Влияние содержания компонентов на рост балантидий в культуре показано в табл.3 °

Как видно из табл.3, оптимальное содержание компонентов в среде способствует более длительному периоду активного роста простейших (до 96 ч), позволяет получить более высокую концентрацию возбудителя (до 5 тыс. в 1 мл) и достичь .общей переживаемости культуры до 14 сут.

Предложенная среда пригодна как для выделения балантидий из фекалий, так и для дальнейшего их пассирова" ния и накопления, биомассы возбудителя, Среду используют также в диагностических целях.

Применение указанной среды экономит химреактивы и время исследователя, так как пересевы производят через 5 сут, а также нет необходимости в приготовлении лизата слизистой оболочки кишечника свиней (ФиБС выпускается промышленностью).

1017727

ТаблиЦа.1

1 е

Размножение балантиднй на предлагаемой и известной средах

Ю

Количество трофозоитов балантидий в 1 мл среды, тыс .

Время после посева, ч

Предлагаемая

Известная

18.1,5 1,5

2,0-2,5

3,0-5,0

3,0-5,0

3,0-5,0

2,5-4,0

120

0,5

144

2,0-2,5

168

192

216

240

0,5-1,0

264

288

0,5

0,5

312

0i5

336

360

Т а б л и ц а 2

Ю

Содериание в среде, г/л нимальное оптималъное максималънов

Компоненты

6,0

Натрий хлористый

6,5

3,0

Натрий фосфорнокислый двузамещенный

0,8

1,2

2,0

Калий фосфорнокислый сдноэамещенный

0,4

0,6

1,0

80 100,0

ФиВС

Крахмал

150 0

6 25

7,5

10 юмам

1,5-2,0

1,0-1,5

1,0-1 i 5

0,5-1,0

2,5-3 0

2,5-3 0

2,0-2,5

1,0-1,5.

1017727

Таблица 3

Интенсивность роста балантидий (тыс. в 1 мл) на среде с содержанием компонента минимальным оптимальным максимальным

Время после посева

l,5

0,5

0,5-1, 0

1,0-1 5

1,5-2,0

1,0-1,5

96

120

0 5

144

0,5

168

192

1,.0-1,5

1,0-1,5

0,5-1 0

216

24 О.

264

0,5-1,0

0,5

288

312

0,5

336

0,5

360

Составитель A. Филиппова

Редактор Л. Веселовская ТехредМ.Коштура Корректор Н. Шаро :

Заказ 3481/28 Тираж 523 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035 Москва, Ж-35, Раушская наб., д 4/5

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

2,0-2,5

3,0-5,0

3,0-5,0

3,0-5,0

2,5-4,0

2,0-2,5

1,5-2,0

1,0-1,5

1,5-2,0

1,5-2,5

1,0-2,0

1,0-1,5

0,5-1,0