Питательная среда для глубинного культивирования продуцентов пектолитических ферментов

Питательная среда для глубинного культивирования продуцентов пектолитических ферментов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Ö9) ИИ

СОКИ СОНЕТОИИХ

OIUNIIN

РЕСПУБЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ и свтссснссст ссидссвъствт

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИЖГ ССОР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОЗНРЫТИЙ (2l) 3315464/28-13 (22) 09с07с81 . (46) 15 05.83.. Бюл. 9 18 (72) И.В, Самойлова, Г.Б. Бравова

Т.Е. Смирнова и В.В. Щелкунова (73,) Всесоюзный научно-исследовательский. биотехнический — ийститут (53) 577 ° 15(688.8) (56) l Chesson A.> Сойпек R.Ñ. The васекасйоп-of vegetable tissue .by а

strain of BacltCus subtitle. — Х.Appt..

8act..1978, v. 44, р. 347-364.

2. Бравова Г.Б., Калунянц К.A.

Гребешова Р.Н., Дуда В.И., Купцова Г.B Технология культивирования-. анаэробных бактерий рода СРозйкЫ1аи: продуцентов цектолитических фермент- . ных препаратов. В сб. Ферменты,.

Получение и применение в народном хозяйстве . . И., 1974 . выл.2, с. 71„72 (прототип)., (54)(57) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ГЛУ-. БИННОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ПРОДУЦЕНТОВ

3Ю. 12 N 1/20) С 12 И 9/14.

ПЕКТОЛИТИЧЕСКИХ . ФЕРМЕНТОВ, состоящая из свекловичного жома, минеральных солей, источнкка. факторов роста,- водопроводной воды, о т,л и ч а ю: щ а- . я с я - тем,что, с.целью цовыщения синтеза пектат- транс-элиминаэы и эндо-полигалактуройазы, среда содер- жит в качестве источников .факторов роста щелочной гидролизат кормовых дрожжей, а в.качестве минеральных солей хлористый аммоний, двузамещен- .. ный фосфат.-калия-и хлористый кальций при следующем соотнааении:компонентов, мас.Ъ:

Свекловичный жом 1,3

Хлористый аммоний 0,1-0,5

Двузамещенный фос- . Я фат калия 0,75-1,25

Хлористый кальций, - 0,01-0 05

Щелочной гидро-.-лизат кормовых дрожжей . . . -. 0,5-1,5

Водопроводная вода Остальйое Ф

leeL

1017728

Среца

Активность, ед/мл

ПТЭ эндо-ПГ

Продуце н т

0i1

5,3

16,4

6 0

Опыт

0,6

6,9

Прототип

Опыт

2,0

Bacillus sp. 8.0,6

0,34

Прототип

Опыт

Прототип

Опыт

3,2

2,7

Baci09us sp. P-12

0,67

0,5

5 6

9,7

Изобретение относится к ферментной отрасли микробиологической промышленности и может быть использовано для производства мацерирующих ферментов при глубинном культивировании микроорганизмов. 5

Известна питательная-среда для глубинного культивирования продуцента пектолитических Ферментов Baci80us зиЬИР1э, содержащая, вес.Вг

Пшеничные отруби 2,0

Глюкоза 2,0 (NH ) HPO 0,4

° Дрожжевой экстракт 0,15

NgB0@ 7Н2О 0,2

СаСОЗ 0,05

AKTHBHocTb пектат-транс-элюминазы на этой среде составляет 50 ед/мл.

За единицу активности принято такое количество фермента, которое вызывает снижение оптической плотности при длине волны 235 нм на 0,01 за

1 мин при 25 С (1 ).

Недостатком среды является то . что она содержит дорогостоящие и дефицитные вещества: глюкозу, дрожжевой25 экстракт и не может быть рекомендована для получения технических фер- . ментных препаратов.

Известна также среда для глубинного культивирования Ctostridium

pectinofermentans 15 - продуцейта пектолитических ферментов, состоящая из свекловичного жома, минеральных солей, источников фактора роста и воды при следующем соотношении компонентов, вес.Ъ: 35

Свекловичный жом 2,0

Кукурузный экстракт 0,3

СаСО 0,5 (М 2НРО+

0,75

КН 2РО, 0,1 40

Активность пектат-транс-элюминазы на этой среде составляет 0,6 ед/мл.

3а единицу активности фермента приBaciEOus с1гсц9апз 31 Прототип

C8ostridium pectinofermentans l5 нято такое количество фермента, которое вызывает увеличение оптической плотности на 0,555 за 1 ч в условиях реакции (2 ).

В ферментативном комплексе мацерирующего препарата, полученного из глубинной культуры продуцента CI?

pectinofermentans 15, который выращивают на среде-прототипе, отсутствуют гидролитические и лиазные ферменты эндо-действия, а активность пектат-транс-элюмкназы недостаточно высока. Это значительно снижает мацерирующее действие препарата на растительные субстраты.

Цель изобретения. — повышение синтеза пектат-транс«элюминазы (ПТЭ) и эндо-полигалактуроназы (эндо-ПГ) .

Поставленная цель достигается тем, что питательная среда для глубинного культивирования продуцентов пектолитических ферментов, состоящая из свекловичного жома, минеральных солей и источника факторов роста, водопроводной воды, содержит в качестве источников факторов роста щелочной гидролизат кормовых дрожжей, а в-качестве минеральных солей †.хлористый аммоний, двузамещенный фосфат калия и хлористый кальций при следующем соотношении компонентов, вес. В:

Свекловичный жом 1-3

Хлористый аммоний 0,1-0,5

Двузамещенный фосфат калия 0,75-1,25

Хлористый кальций 0,01-0,05

Щелочной гидролизат кормовых дрожжей 0,5-1,5

Водопроводная всда Остальное

В таблице представлена сравнительная характеристика ферментативной активности штаммов - продуцентов пектолитических Ферментов.

1017728

Составитель Е. Воробьева

Техред М. Коштура . Корректор М DISAP

Редактор Л. Веселоэская

Заказ 3481/28 Тираж 523 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Щтаммы - продуценты пектолити ческих Ферментов выращивали в 3-литровых колбах без аэрации культуральной жидкости. Питательные среды стерилизовали при 1 атм в течение 0,5 ч, корректировали значение рН до 8,0)8,4 и заражали посевным материалом в количестве 5%. Выращивание проводили в течение 30 ч при 37 С. По окончании процесса в культуральной жидкосpm определяли активность ПТЭ прямым . спектрофотометрированием при длине волны 230-235 нм (за единицу активности принято такое количество фермента, которое в условиях реакции . вызывает увеличение оптической плотности на 0,1 за 1 ч) и активность эндо-ПГ вискозиметрическим методом.

При использовании щелочного гидролиза кормовых дрожжей рН питательной среды сдвигается в щелочную зону и достигает значений 7,8-8,3.-0птамальные значения рН питательной среды для глубинного культивирования

Вас. c1rcu0ans 31 с целью биосинтеза мацерирующих Ферментов находятся в интервале 8,0-8,4. Следовательно, использование щелочного гидролизата

10 кормовых дрожжей позволяет. исключить операцию корректировки питательной среды перед,ее засевом,- что упрощает технологическую схему получения культуральной жидкости продуцента.

Таким образом, изобретение позволяет повысить синтез пектат-транс» элюминазы и эндо-полигалактуроназы.