Питательная среда для выращивания гриба @ @ -продуцента рибофлавина
Иллюстрации
Показать всеРеферат
СОЮЗ СО8ЕТСНИХ
IWIIOIIH
РЕСПУБЛИН зд) С 12 и l 14 С -12-Р 25/00
ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPhfAO
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ- ::: -. .И ABTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ.(21) 3440308/28-13 (22) 19.05.82 (46)- 07.09.83. Бюл. II 33 (72) В.А.Ширшов, Т.Ф.Костенко, В .К .Скоропад, Е.В,Васильева, В .А.Ла. рионова и Б.В.Рафальская (71) Всессюэный научно-исследовательский институт микробиологических средств защиты растений и бактери- . альных препаратов (53) 663: 577.164.12(088.8) (56) 1. Авторское свидетельство СССР
Н 436080, кл. С 12 Р25/00, 1972.
2. Авторское свидетельство СССР:
N 529211, кл. С 12 и 1/20, 1975.
3. Авторское свидетельство СССР
I1 389132, кл. С 12 P 25/00, 1972 (прототип) ...Я0„,» 962 A (54) (57) питАтельнАя, сРедА для BbIPAщиВАния ГРИБА екеиОтнесГОм AsHBYI I.ПРОДУЦЕНТА РИБОФЛАВИНА, содержащая гидрол, мел химический и воду водопроводную, о т л и ч à ю щ а я с я тем, что, с целью повышения выхода рибофлавина и удешевления среды, она . дополнительно содержит биомассу сухоro активного ила или его серно-кис" лотный гидролиэат при следующем соотношении компонентов, мас.Ф/ 100 мл воды:
Гидрол 3,0-6,0
Мел химический 0 5-0,6
Биомасса сухого активного ила, или его сернокислотный гидролиэат. 1,0-4,0
10 39962
Ф
Изобретение относитcR к микробиологическои промьншленности, а именно к питательной среде для выращивания продуцента рибофлавина.
Известна питательная среда для выращивания гриба El8f110theciUN
ashbyIi - продуцента рибофлавина, в состав которой входят отходы пе" реработки семян масличных культур, кукурузный экстракт, гидрол, сахар, солод, мел химический, дрожжи, соль поваренная, сернокислый магний, сернокислое железо, микроэлементы, жир технический и вода. 1 ).
Недостатком данной среды явля" ется низкая активность рибофлавина, которая составляет в среднем
1400 мкг/мл, кроме того, эта среда дорогостоящая, так как содержит двенадцать компонентов, два иэ ко" 20 торых являются пищевыми (сахар и поваренная соль).
Известно использование сухого активного ила в качестве питатель" ной среды для выращивания бактерий Baci11us thur 1ngiersus, который является источником азота, ви" таминов и минерального питания $2 ), Наиболее близкой к изобретению по составу является среда для культивирования гриба Eremothecium
ashbyii, продуцирующего, рибофлав ин, включающая соевую муку и кукурузный экстракт в качестве источника азота и фосфора, солод, мел химический,, поваренную соль, дрожжи сухие, сахарозу и гидрол в качестве источника углерода и необходимые минеральные соли, используемая в промышленности как регламентная питательная среда (3g.
Недостатком известной среды является низкая активносfb рибофлавина, составляющая 1000-1200 мкг/мл.
Целью изобретения является повышение выхода рибофлавина и удешевле ние среды.
Поставленная цель достигается тем, что питательная среда для выращивания гриба Er ashbyii " продуцента рибофлавина, содержащая гидрол, мел химический и воду водопро- 50 водную, дополнительно содержит био" массу сухого активного ила или его серно-кислотный гидролизат при следующем соотношении компонентов„ мас.Ф/
:100 мл воды: 55
Гидрол 3, 0-6,0
Мел химический 0,5-0,6
Биомасса сухого активного ила или его серно-кислотный гидролиэат 1,0-4,0
Гидрол, входящий а состав питательной среды, получают как отходы при производстве кристаллической глюкозы, По химическому составу гидрол содержит глюкозу, Фосфор и поааренную соль, а для культивирования Er, а sbbyii наилучшим источником углерода является глюкоза. В связи с этим сахар, входящий в состав регламентной питательной среды, может быть заменен на гидрол, а поваренная соль исключена иэ нее.
В производственном отношении сухой активный ил является удобным сырьем: он накапливается а аэротенках в процессе биологической очистки жидких отходов, получаемых при производстве сухих кормовых дрожжей (БВК а также при производстве органических растворителей.
Сухой активный ил, получаемый на заводах кормовых дрожжей и органических растворителей, по своим питательным качествам обладает ценными свойствами:содержит 50-57,0ь сырого протеина, витамины и минеральные,элементы. Таким образом,. сухой активный ил является источником азота, витаминов и минераль-! ного питания для микроорганизмов.
П р и и е р 1. Состав применяе,мой среды, мас.4:
Сухой активный ил 1,0
Гидрол. 3,0
Иел химический 0,5
Вода водопроводная - до 100 мл, рН после стерилизации 6,6-6,. 8
Приготовление среды для ферментеров ведется в специальных чанах-смесителях, установленных в отделении для приготовления питательных сред.
Среду готовят в две партии. Состав ферментационной среды: 1 партиясухой активный ил, мел химический и вода водопроводная; 2 партиягидрол, вода водопроводная.
Первую партию среды готовят а чане-смесителе 15 мз, оборудованном мешалкой и барботером для подачи пара. Набирают 3-5 м з аодопраподной воды, загружают ",ухой активный ил
62
Условия приготовления и стерилизации по примеру 1. Активност.ь рибофла вина 1869 мкгlмл.
П р и м е p 5+ Состав приготовля" емой среды, мас.Ф:
Серно-кислотный гидролиэат сухого активного ила 1
Гидрол 6
Иел химический 0,5
Вода водопроводная- до 100 мл.
Условия,те же, что и в примере 1. Акт тивность рибофлавина на среде этого состава составляет 1840 мкг/мл-.
Результаты проведенных исследований показывают, что питательные среды с сухим активным илом или его серно-кислотным гидролизатом повышают выход кормового концентрата рибофлавина при культивировании Ег.
ashbyii на 10-15ь по сравнению с регламентной средой, содержащей сое-. вую муку, кукурузный экстракт, сахар и поваренную соль. Оптимальное количество сухого активного ила 2,0-3,0Ф, гидрола 6,04, (3,0ь по редуцирующим веществам) и мела 0,5ь. Увеличение в питательной среде сухого активного ила до 4,04 не дает положительных результатов.
Наличие в среде сухого активного ила создает благоприятные условия для развития Er. ashbyii - продуцента рибофлавина.
Таким образом, питательная среда, содержащая биомассу сухого активного ила или его серно-кислотный гидролизат, гидрол, мел химический, может быть использована для производства кормового рибофлавина на основе Er. àshbyii и соевую муку и ку" курузный экстракт - пищевой и дефицитный продукт можно заменить на био массу сухого активного ила или его серно-кислотный гидролизат, а сахар и поваренную соль - гидролом, что приводит к удешевлению питательной среды, раж 523 Подписное од, ул. Проектная, 3,0
6,0
0,5
10399 и мел при помощи вакуума, создаваемого в чане вакуум-насосом, затем загружают в нужном количестве 303-ную щелочь из мерника для подведения рН до 7,8, среду нагревают до
90 С и выдерживают при этой температуре 15-20 мин.
Вторую партию среды готовят в чане-смесителе, оборудованном мешалкой и барботером для подачи пара. И}
Набирают 1-2 м водопроводной воды, задают в нужном количестве гидрол, затем среду нагревают до 80 С, стери" лизуют питательную среду в установ" ке непрерывного действия. Стериль-,15 ныл питательные среды подают насосом в ферментер, Для доведения до нужного объема среды в ферментер подают стерильную водопроводную воду.
После заполнения ферментера среду 20 о охлаждаот до 30 С. Полученную среду для ферментации засевают жидкой по" севной культурой Ег . ashbyii, После стерилизации перед засевом рН среды должно быть 6,6-6,8. Активность 25 рибофлавина на этой среде равна
1348 мкгlмл.
П р и м.е р 2. Состав приготовляемой среды, мас.4:
Сухой активный ил 2,0
Гидрол 4,0 (23 по РВ) °
Мел химический 0,6
Вода водопроводная - до 100 мл, рН после стерилизации 6,7-6,8
Условия приготсаления и стерилизации среды те же, что и в примере 1.
Активность рибофлавина на этой сре де 1616 мкг/мл.
Пример 3. Состав приготовля- 40 емой среды, мас.4:
Сухой активный ил
Гидрол
Иел химический
Вода водопроводная до ll00 мл; рН после стерилизации 6,7-6,8
Условия приготовления среды и стерилиэацйи те же, что и в примере 1.
Активность рибофлавина составляет ©
1815 . мкгl мл. .5О
ll р и м е р 4. Состав среды, мас.Ф:
Сухой активный ил 4,0
Гидрол 6,0
Иел химический 0,5 ода водопроводная до 100 мл
ВНИИПИ Заказ 6819/26 Ти
Филиал ППП "Патент", г. Ужгор
Таким образом, предлагаемая среда по своему составу отличается от известной тем, что взамен соевой муки и кукурузного экстракта в нее введен сухой активный ил (или гидролизаты его),т.е. значительно проще по составу.