Штамм а (ленинград) 299/80 вируса гриппа,используемый для приготовления гриппозного диагностикума

Штамм а (ленинград) 299/80 вируса гриппа,используемый для приготовления гриппозного диагностикума

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Штамм А (Ленинград) 299/80 вируса гриппа, ГКВ 1802 (государственная коллекция вирусов Института вирусологии им. Д.И. Ивановского), ис:пользуемый для приготовления гриппозного диагностикума.

СОКИ СОВЕТСНИХ

СОЦИ4/ИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИК .

: (1Ю Of) ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

flO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОЛИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ j3, к АВтОРсКОмУ свиДВтйльсЗ ВУ (21) 3377140/28-13 (22) 06.01.82 (46) 30.10.86. Бюл. В 40 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт гриппа, Государственный научно-исследовательский институт стандартизации и контроля медицинскйх биологических препаратов им. Л.А. Тарасевича и Ленинградский научно-ис-: следовательский институт вакцин и сывороток (72) А.А..Соминина, Н.Л. Корчанова, Ю.М. Поляков, Г.П. Таранова, Л.Б. Смирнова и В.К. Константинов (53) h 616-0?(088.8) (56) Слепушкин А.H. и др. Иммуноструктура населения Москвы к циркулирующим в 1977 r штаммам вирусов грип- па А (H3N23, A(HfN1) и В, Вопросы ви русологии, 2, 1979; с. 175.

Recommended composition of influ- .

enra vaccins for use in the 1980-1981

season, Weekly Epidemical Record, «10

:73, 1980. (59 4 С 12 И 7 00 А 61 К 39/145 (54) ШТАММ А(ЛЕНИНГРАД) 299/80 ВИРУСА ГРИППА, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГРИППОЗНОГО ДИАГНОСТИКУМА (57) Штамм А (Ленинград) 299/80 вируса гриппа, .ГКВ ff 1802 (государственная коллекция вирусов Института вирусологии им. Д.И. Ивановского), используемый для приготовления гриппозного диагностикума.

10407

Изобретение относится к вирусоло-1 гии, а именно к штамму вируса гриппа, используемому для получения гриппозного диагностикума.

Известны штаммы вируса гриппа типа А (HÇN2) для приготовления гриппозных диагностикумов.

Однако известные штаммы антигенно неактуальны в настоящее время.

Известен антигенно актуальный 10 штамм вируса гриппа А .(Бангкок) (1)79(HÇN2), используемый для приготовления гриппозного диагностикума.

Но данный штамм ингибиторочувствителен, что снижает чувствительность диагностикума.

Целью изобретения является создание антигенно актуального штамма вируса гриппа типа А(НЗН2), обладающего ингибиторорезистентностью и обес- 20 печивающего получение. чувствительных гриппозных диагностикумов.

Предлагаемый штамм А (Ленинград)

299/80 вируса гриппа выделен от больного гриппом в лаборатории этиологии 25 гриппа ВНИИгриппа. Штамм прошел клонирование 5 пассажами предельными разведениями в присутствии смеси ингиби1 торосодержащих сывороток лошади, морс-кой свинки, кролика, человека и телят и 3 пассажами в присутствии смеси ингибиторосодержащих сывороток людей.

Штамм вируса гриппа А (Ленинград)

299/80 депонирован в государственной

l коллекции вирусов. Института вирусологии им. Д.И. Ивановского за номером

ГКВ Р 1802.

Полученный методом клонирования ингибиторорезистентный штамм А (Ле40 нинград) 299/80 отличается от остальных вирусов гриппа типа А (НЗК2)

1979-1980 rr. выделения по признаку резистентности к неспецифическим ин-.

45 гибиторам и характеризуется следующими признаками.

11орфологические признаки. Полиморфиая структура, типичная для вирусов гриппа.

Физические свойства. Коэффициент седиментации 750, плавучая плотность

1,21 г/см .

Репродукционная способность. Инфекционный титр вируса 8,0-9,25

1Р ЭИД > ц „„, гемагглютинирующий.титр 1:256-1: 1024 в 0,2 мл с 1Х-ными куриными эритроцитами.

88 2

Пример. Маточный материал вируса А (Ленинград) 299/80, прошедший контроль на стерильность, специфичность, биологическую активность (гемагглютинирующую, инфекционную), резистентность к неспецифическим ингибиторам, разводят в 100000 раз (10 ) фосфоратно-буферным раствором (рН 7,2) содержащим антибиотики (пенициллин

250 ЕД/мл, стрептомицин 100 мкг/мл) .

Объем разведенного вируса 50 мл. Куриные эмбрионы 11-дневного возраста заражают в аллантоисную полость раз веденным вирусом из расчета 0,2 мп на эмбрион, доза заражения 10 ЭИД „ .

Зараженные эмбрионы инкубируют в термостате с увлажненным воздухом в тео чение 48 ч при 34 С, охлаждают 18 ч при 4 С. Эмбрионы стерильно вскрывао ют, всю аллантоисную жидкость собирают в бутыпи емкостью 0,5 л. Бутыли (порядковый номер 7-9) выдерживают о

18 ч при 4 С. Затеи проверяют полученный материал в реакции гемагглютинации (РГА) с 1%-ными куриными эритроцитами; в пробах из бутылей 7-9 гемагглютинирующий титр равен 1:512, 1:256,.1:1024. Вирусный материал контролируют в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) с прогретыми в течение 30 мин при 56 С нормальными сыворотками крыс, лошадей,,человека на чувствительность к неспецифическим ингибиторам. Пробы резистентны к ингибиторам и нейтрализуются специфической антисывороткой до титра

1:2560. Антисыворотки к штаммам вирусов гриппа типа В и А (H1N1, H2N2, Н «Я?) не ингибируют гемагглютини рующую активность проб. Для инактивации вируса в каждую бутыпь вносят по 0,2 мл 37Х-ного раствора формали. на и 0,5 мл 1Х-ного раствора мертио- лата и выдерживают 1 сут при комнатной температуре.

Полуфабрикат контролируют на стерильность и присутствие инфекционного вируса путем заражения куриных эмбрионов цельным неразведенным материалом. Во всех пробах (7-9) вирус полностью инактивируется. Подготовленные и проконтролированные антигены подвергают лиофилизации.

Для этого в каждую бутыль, содержащую по 400 мл вирусного антигена, добавляют 40 мл подогретого на водяной бане 3,5Х-ного раствора желатины в 50Х-ном растворе сахарозы. Пробы

Техред, Л.Сердюкова

Корректор Г. Реветник

Редактор Т. Шаргонова г

3аказ 5842/3 Тираж 490 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений.и открытий

113035, Москва, -35, Раушекая наб., д. 4/5

ЮЮМОВЬ

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгерод,ул. Проектная, 4 з 1040788 4

7-9 обозначают как серии диагности- резистентность к ингибиторам, специкума 1-3. После тщательного перемеши. фичность в РТГА, активность s РГА, вания каждую серию разливают по фла+ стерильность, полноту инактивации конам емкостью .10 мл по 3 мл анти- инфекционного вируса. Титр гемагглюгена (по 145 флаконов каждой серии). j тининов в готовых сериях диагностику-, Сраэу по окончании лиофилиэации мов составляет 1:256, 1:512. (продолжительность 36 ч, температу- Использование штамма А (Ленинград) ра нагрева 35 С) флакон закрывают .299/80 вируса гриппа позволит сущестрезиновой пробкой. Готовый антиген . венно повысить эффективность диагнос(серии 1"3) повторно контролируют на 10 тики гриппа.