Способ культивирования вируса скрепи

Способ культивирования вируса скрепи

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСА СКРЕПИ путем инфицирования вирусом чувствительных клеток, предварительно обработанных веществом. Влияющим на процессы тканевого обмена/ отличающийся тем, Что, с целью ускорения способа, в качестве чувствительных клеток используют клон клеток L 23, а обработку клеток осуществляют раствором лидазы с активностью 10-16 Ед/мл раствора.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

Г

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ () ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3481563/28-13 (22) 25. 03. 82 (46) 23,10.83. Бюл. Р 39 (72) Ю.Н.Чередниченко, Н.В.логинова и В.М.Жданов (71) Институт вирусологии им. Д.И.Ивановского (53) 576.8.093.35(088.8) (56) 1 ° Clarke М.C., М1 ЕЕ воп G.Ñ.

Infection of an ce80 (ine of mouse

1 йihrobtasts with scrapic agent.—

"Natur 1976, v.261, N 5556, Р*144-145.

„„SU„„1049543 А

3(5!) С 12 N 7/00//С 12 N 7/00 //

С 12 R 1/91 (54) (57) СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ

ВИРУСА СКРЕПИ путем инфицирования вирусом чувствительных клеток, предварительно обработанных веществом, влияющим на процессы тканевого обмена, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, в качестве чувствительных клеток используют клон клеток L 23, а обработку клеток осуществляют раствором лидазы с активностью 10-16 Ед/мл раствора.

1049543

Составитель A.Ìàíûêèí

Редактор Г..Беэвершенко ТехрЕд Т.Фанта Корректор Л. Патай

Заказ 8361 /28 Тираж 523 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к вирусологии и может быть применено при культивировании вируса скрепи в куль туре перевиваемых клеток.

Известен способ культивирования вируса скрепи путем инфицирования вирусом чувствительных клеток, предварительно обработанных лизолецитином — веществом, влияющим на процессы тканевого обмена, приводящие к изменению проницаемости оболочек клеток их слиянию (1 j.

Однако в известном способе имеет место повреждающий эффект лиэолецитина на жизнеспособность клеток, что приводит к значительной гибели опытных клеток и, вследствие этого, удлинению времени культивирования вируса скрепи.

Цель изобретения — ускорение способа.

Эта цель достигается тем, что согласно способу культивирования вируса скрепи путем инфицирования вирусом чувствительных клеток, предварительно обработанных веществом, влияющим на процессы тканевого обмена, в качестве чувствительных клеток используют клон клеток )„ 23; а обработку клеток осуществляют раствором лидазы с активностью

10-16 Ед/мл раствора. Способ осуществляется следующим образом.

Клетки, чувствительные к вирусу скрепи, обрабатывают лидазой, растворенной в физиологическом растворе (рН 7,2). Огтимальная концентрация лидазы 16 Ед/мл в объеме 1:100 (к объему посуды, используемой для культивирования клеток реципиентов), После контакта клеток и лидазы в течение 10 мин вносят мозговую суспензию вируса скрепи в разведении 1:10 и культивируют при 37 С в течение 1О сут. Размножение вируса тестировали на основании специфической картины болезни лабораторных животных, а также на основании ти— пичных изменений в моэге больных или погибших животных °

Пример 1. Клетки клона L, 23, выделенного из перевиваемой линии клеток(, 929, обрабатывают препаратом лидазой, растворенной в физиологическом растворе (рН 7,2). Оп1О тимальные условия опыта — введение

16 Ед/мл препарата лидаэы в объеме

1:100 (к объему посуды, используемой для культивирования клеток-реципиентов). После контакта клеток

15 и лидазы в течение 10 мин вносят мозговую суспензию штамма Комптон вируса скрепи в разведении 1:10 °

Пример 2. На монослой клеток L, 23, предварительно выделенных из широко применяемой в вирусологической практике клеточной линии

L929, вносили по 10 Ед/мл препарата лидазы, разведенного в физиологическом растворе (рН 7,2). После

10-минутного контакта с лидазой клетки заражали 10%-ной суспензией мозга мышей больных скрепи (штамм

С-506).

Размножение вируса тестировали по специфической клинической картине болезни у лабораторных животных, а также на основании морфологических изменений в мозге больных или погибших животных, Культивирование проводят в течение

35 5-6 дн=.é. B процессе культивирования не наблюдалось гибели обрабатываемых клеток, тогда как при использовании лизолецитина (известный способ) длительность культивирования — более двух недель.

Использование изобретения позволяет ускорить способ культивирования, удешевить способ и улучшить условия культивирования клеток,