Состав для выявления сенсибилизации эритроцитов
Патент 1050710
Авторы
Классы МПК
Состав для выявления сенсибилизации эритроцитов
Иллюстрации
Реферат
СОСТАВ ДЛЯ ВЫдаЛБНИЯ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ ЭРИТРОЦИТОВ с использованием высококоллоидной среды , о т л и ч а ю вд и и с я тем, что, с целью повышения точности способа, в качестве коллоидной среды используют конглютини1ующую смесь, содержащую фикопл, NaCf, дистиллированную воду, борную кислоту, и сыворотку крови человека АВ (л5 ) группы при следующем соота япении ингредиентов, г: 14,5-15,0 Фиколл 2,10-2,25 3010,1 Борная кислота Дистиллврстванная 245-250 мл вода Сыворотка крови Осталыное до 1 л АЁ (W) группы (Л
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК
3 @ A 61 K 39/00
ОПИСАНИЕ И30БРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
РР;Ъyr p-,, :! ", i ;, ",,f у g i 43
ЫЮДД ;- .;(g
Фиколл
КеИ
Бойкая кислота
Дистиллированная вода
Сыворотка крови
АВ (Е) группы
14,5-15,0
2,10-2,25
30 0, 1
245-250 мл
Остальное до 1 л
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OYHPblTHA (21) 3349106/2813 (22) 06,07.81 (46.) 30.10.83. Вюл. М 40 (72) В. И. Левин, Г. В. Толочко и В. А. Молочко (71 ) Научно-производственное обьединение Белорусского научно-исследовательского института перелйвания крови (53) 615.375 (088.8) (56) 1. Руководство по иммунологий.
Под ред. проф, О. Е. Вязом и Ш, Х. Xogжаева. М., . Медицина, 1973, с. 203 206..
2 . Доссе Ж. Иммуногематология М., Медгиз, 1959,, с. 349-360. (54)(57) СОСТАВ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ
СЕНСИБИЛИЗАЦИИ ЭРИТРОЦИТОВ о
„„SU„„1050710 A йспользованием высококоллоидной среды, о т л и ч а ю-шийся тем, что, с целью повышения точности способа, в качестве коллоидной среды используют конглютинируюшую. смесь, . содеркашую фиколл, Naif дистиллированную воду, борную кислоту и сыворотку крови человека AB (IV ) группы при следукмдем соотношении ингредиентов, г:
Изобретение относится к меди ине, а именно к иммуногематологии.
Известны составы для выявления сенсибилиэации эритроцитов с использованием высококоллоидных сред, включаюших .растворы желатина, полиглюкина, альбуми- на, поливинилпирролидона C l и t.2 ).
Однако известные составы не обеспечивают высокую точность выявления сенсибилизации эритроцитов. .! 0
Цель .изобретения - повышение точно сти выявления сенсибилизании эритроци тов.
Указанная цель достигается тем, что в составе для выявления сенсибилизации эритроцитов с использованием высоксжоллоидной среды в качестве коллоидной среды используют конглютинируюшую смесь, содержашую фиколл, hfaLt, борную кислоту, дистиллированную воду и сыво- 20 ротку крови. человека AB (IV ) группы при следуюшем,соотношении ингредиентов, г:
Фиколл . 14,5 15,0
Яс CC . 2 10-2,25 25
Борная кислота ЗОБО,1 дистиллированная вода, 245 250 мл
Сыворотка крови
АВ (ф) группы Остальное до 1 л
Сыворотку крови человека группы . AB (Е) получают из крови 8-10 доноров. Конечная концентрация фиколла в конглютннируюшей смеси должна быть не более 15 и не менее 14,5 г/%. Выбор указ анных концентраций обусловлен тем, 35
» что при болев высоком соцеркании фиколла в конглютинируюшей сМеси (15,516 г/%) отмечается появление неспецифической агглютинации эритроцитов, а при концентрации фяколла ниже 14,5 г/% снижается чувствительность метода. Время, необходимое для приготовления конглютинируюшей смеси, включая подготовку исхоцных растввровв» не превышает l ч.
Порядок приготовления конглютинирук -. щей смеси: готовится 250 мл 60%-ного раствора фнколла на 0,85%-ном,растворе хлористого натрия; s него вносится 30 г борной кислоты и после ее растворения добавляется до 1 л обшег о объема сыворотки крови AB (9) группы.
Применение указанной конглютинируюmea смеси основывается на способности сенсибилизированных эрнтроцитов образовывать агглютинаты в высокомолекулярных каплоидных средах. В качестве коллоида .раствора используют фиколл, высокопопимер ое вашество, получаемое
710 сополимериэацией сахарозы и эпихлорPHg pHH8.
Для выявления сенсибилмзации эритро- цитов с использованием предлагаемой конглютинируюшей смеси на плоскость наносят одну каплю этой смеси и в нее добавляют одну каплю исследуемых эрит роцитов..Для анализа может быть исполь зована свежая кровь, взятая иэ пальца или. из вены, или эритроциты 3 фракции крови .иэ пробирки; Смесь тшательно пе-. ремешивают и, периодически покачивая плоскость, выцерживают в течение 3 мин, после чего туца же вйосят четыре-пять капель физиологического раствора хлориотого натрия. Затем пластину вновь интенсивно покачивают .еше 2 мян, .после чего учитывают реакцию. Образование в капле агглютинатов эритроцитов„(положительная проба) свнцетельствует о сенсибилизации последних.
Пример . Исследуют пробирку с кровью больного с циагнозом гемолитическая анемия неясной этиологии.
На плоскость наносят одну каплю конглютинируюшей смеси и в нее вводят. одну саплю;нсслецуемых эритроцитов» взятых из 3 фракции кровя после образования кровяного сгустка, тшательно
О перемешивают и выдерживают при 18 С в течение 3 мин. По истечении этого времени добавляют четыре капли физиологического раствора хпористого натрия, вновь церэмешивают круговыми покачиваниями пластины и через 2 мин учитывают результат, Проба оказалась по» ложительной - в капле отчетливо вицны агглютинаты эритроцитов, что свицетельствует об их сенсибилйэации. Аналогич ные результаты получены при исслецованин этого образца крови в прямой пробе Кумбса.
Наличие сенсибилизации эритроцитов 90 образцов крови определено с по мошью предлагаемой смеси и одновременно пробы Кумбса. Во всех случаях получено coallagesae результатов: в 52 спучаях -, положительных, в 32 - от.ридательных»
30 образцов эритроиитов, выделенных из крови больных с анемиями раэйого генеза, новорожденных с желтухой (подозрение на гемолитическую болезнь новорожценных), и эритроцитов, сенсибилизированных антисывороткамн разной cgeцифичности, были проанализированы. иа наличие сенсибилизации параллельно с
3 .. 1050710 использованием известных конглютнни- ., рующей сМеси и в пробе KyM6cs. Полурующих cpeg, предлагаемой конглютини- ченные данные представлены в таблице.
Проба Кумбса
19..
Нет
Предлагаемый способ
19 11 . Нет
+Проба с желатиной
Нет
Проба с полиглю- . кином
17
Проба с поливинилпирролндоном 11
Нет
Проба с албуми.. ном
17 11 обеспечивает нопучение результатов, по своей чувствительности и снецифичности полностью идентичных пробе Кумбса.
Составитель Г. Крюкова
Редактор Т. Мермелштейн Техрэц Ж.Кастелэвич Корректор 1М. Шароши.
Заказ . 8523/7 . Тираж 713 Подписное
ВНИИПИ Государственного комйтета СССР по целам изобретений и открытий
113035,- Москва, Ж-35, Раушская цаб., n. 4/5
Филиал ППП Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4
Наличие сенсибилизации эритроци- тов в результате присутствия белка на их поверхности оценивалось ло данным пробы Кумбса, положительная реакция в которой свидетельствовала о сенсиби лиэации эритроцитов.
Как видно из приведенных данных, методы выявления сенсибилизации эритроцитов с помощью коллоицных. раст.«
-воров желатина, полиглюкина, цоливинил пирролидона, альбумииа менее чувствии» тельны и специфичны, чем проба Кумбса.
Предлагаемая конглютинируюшая смесь
Таким образом,. использование предлагаемой конглютинируюшей смеси для
: выявления сенсибилизации эритроцитов . увеличивает точность (чувствительность
35 и специфичность) определения сенсибилизации эритроцитов с применением коллоидных сред почти в цва раза, целая .их тождественными получаемым в пробе
Кумбса.