Способ консервации органов и тканей

Способ консервации органов и тканей

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СПОСОБ КОНСЕРВАЦИИ ОРГА НОВ и ТКАНЕЙ, включающий их обработку раствором пиметилсульфоксиаа, о т п имеющий с.я тем, что, с целью повышения жизнеспособности трансплантате преаварительно донору за 1-24 ч до уца- : ления органа или ткани вводят аиметилсульфоксиц в дозе 0,5 г/кг.

978 А

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) 01) З1Я) . А 01 М 1/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ „

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТБУ (21) 3441 115/28-13 (22) 14.05.82 (46) 30.11.83. Бюп. М 44 (72) В.- И. Кирпатовский, Е. В. Фролова, Н. А. Онищенко, А. Г. Иванов, Б. Я. Шпи» ченецкий и М. E. Унксов (71) Научно-исследовательский институт трансплантологии и искусственных органов и Всесоюзный заочный машиностроитель ный институт (53) 612.014.462.5 (088.8) (56) 1. Пушкарь Н. С., Белоус A. М.

Актуальные проблемы криобиологии .

Киев, "Наукова цумка", 1981„: с. 608.

I (54)(57) СПОСОБ КОНСЕРВАЦИИ ОРГА

НОВ И ТКАЙЕИ, включающий их обработку раствором циметилсульфоксица, о тл и ч а ю ш и и с я тем, что, с целью повышения жизнеспособности трансплантатв прецваритедьно понору за 1-24 ч цо уца-: ления органа или ткани ввоцят циметии сульфоксиц в цозе 0,5 г/кг.

Ф 1056

Изобретение относится к клинической и экспериментальной мецицине, а именно грансплантологии.

Известен способ консервации органов .и тканей, включаюший их обработку расч4 вором диметилсульфоксида (1 .

Недостатком известного способа является деструкция клеточных элементов ткани, лабилизация лиэосомального аппарата клетки, что ухуцшает сохранность щ отру ктур трансплантата.

Бель изобретения повышение жизнеспособности трансплантата.

Поставленная цель цостигается тем, 35 что согласно способу консервации органов и тканей, включаюшему ввецение в них циметилсульфоксица, предварительно Go нору за 1-24 ч цо уцаления органа или ткани ввоцят циметилсульфоксиц в до- 20 эе 0,5 r/êã, Пример 1. 5крысамза24ч до опыта внутрибрюшинно ввоцят в цоТабл ица 1

35+2

48+3

63,8+1,2

0,96 0, 18

0,34Ю,06

Почка

Почка

Серале

Серале

0,26 0,07

69,8+1,8

0,74+0,05

0,59+0,04

0,38+0,04

0,08+0,02

31+2

57,6+2,0

77,0+1,9

42+2 и промывают 20%-ным раствором UNCO, как в примере 1. Ilocae промывки органы помешают в тот же раствор и хранят при 4® в течение 4 ч. По истечении

45 укаэанного срока определяют соцержание молочной кислоты в ткани и в окружаюшем растворе, активность ЛДГ в ткани и в окружакщем растворе и активность ДНКаэьв-П в ткани. Реэульгаты преаставлены

50 в табл. 2.

Из результатов видно достоверное1 уменьшение степени повреждения почек и сердца после замораживания при использовании предлагаемого способа, 1

Пример 2. 5крысамза2ч цо эксперимента внутрибрюшинно ввоаят

QMCO в аозе 0,5 r/êã в вице 40Ъ-ного водного раствора. 5 других крыс служили контролем. Сераца и почки удаляют.

978 2 эе 0,5 г/кг аиметилсульфоксиц в вице

40%-ного воцного раствора. 5 других крыс, служили контролем. У всех животных поц гексеналовым наркозом удаляют серцце и почку и промывают 10%-дым раствором аиметилсульфоксица (ДМСО) на основе раствора цля консервации сердца, при 10 С в течение 10 мин и помешают в тот же раствор еше на 20 мин. После этого почки и сердце помешают в аппарат для программного замораживания и охлаждают со скоростью 1 С/мин в интервале о температур от +10 ао - 10 С и со скоростью 10оС/мин цо -100 С. .Замороженные органы извлекают и помешают в водяную баню при +37оС. После полного отогрева опрецеляют следующие параметрьп активность ЛДГ в гомогенате ткани, активность ДНК-азы-П в гомогенате и окружаюшем растворе и цлительность изменения окислнтел ьно-восстановительного потенциала (ОВП) ткани. Полученные результаты представлены в табл. 1.

1056978

Таблица 2. 1,631(0,08

0,42 0,1 1

0,97Ю,19

82,4+4,1

58,7+3,2

0,23Ф0,04

0,09 О,01

0,2110,02

7 4,2+2, 1

Почка

Ф

44,3+4,2

80,7+68 2

Серцде

Сердце

68,2+3,8

0,12ЦЭ 02

36,7+2,0

0,31Ю,09

54,0+,2, Т а б л и и а 4

0,370+0,042 0,209+0,020

ДМСО животному с последуюшей обработкой

10%-ным раствором .g СО (предлагаемый способ) Табл ица 3

Обработка 10%-ным раствором ДМСО (известный способ) 0,258+0,259 0,169+0,018

11,8+2,0 целостность клеточных мембран опре целяют по времени стабилизации скорости ультразвука в почке, номешенной

s раствор крио ротектора, так квк при поврежцении клеточных мембран ускоряется проникновение криопротектора в клет

«и. Чем выражениее повреждение, тем скорее проис«саит выравнивание вне и внут риклеточнык концентраций, а, следовательно, и быстрее наступает стабилиэация скорости ультразвука в органе (табл. S).

2,2+О,S

Из результатов вицно цостоверное уменьшение токсичности действия крио- 2р протектора.на клетки органов.

Прецлагаемый способ позволяет умекьшить степень повреждений органов и тканей при замораживании и ослабить токсическое действие криопротектора. 25

Проверка эффективности предлагаемого способа осушествлялась путем его сравнения с известным способом при замора- живания органов (на почках) и прн замораживании тканей (на крови }. Для крови 30 в качестве сопоставляемого показателя берут процент гемолиза после оттаивания пробы (табл. 3).

Э.

Контроль (без зашиты) 49,3+3,1

Введение ДИСО животному с последуюшей обработкой 10%-ным раствором ДНО (предлагаемый способ) Для почек в качестве сопоставляемых показателей после оттаивания берут активность ДНК-азы (табл. 4), гистологк ческую cxpyx pI a uenocmocw «лето 55

: ных Фаембраи.

Контроль (без зашиты)

Обработка 10%-ным раствором

MCO(aa» естный способ)

Введение

1,200+0,105 0,260»0,014 у, i086978 б

Т а б л и ц а 5., при этом уменьшается степень вне и внугриклеточного отека.

Контроль (без зашиты) Обработка, 10%-ным раствором 0МСО (извес ный способ) 21+3

Введение ПМСО живоч ному с последующей об работкой 10Ф-ным раствором QMCO (предлагаемый способ) 30+3 г

Составитель В. Брусиловская

Редактор П. Макаревич Техрец В.Палекорей Корректор В, Гирняк

Заказ 9404/3 Тираж 721 Поцписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по цепам изобретений н открытий

11303S, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

По данным гистологического исследования предлагаемый способ приводит к меньшей декструкции клеточных элементов ткани, к менее выраженной лабилиэации лизосомального аппарата клетки;

Таким образом, при применении прецпа» гаемого способа отмечается сушественное уменьшение степени повреждений при замораживании органов и тканей по сравнению с известным способом. Степень повреждений зависит от времени введения цонору циметипсульфоксица и от его дозы. Минимальйое поврежцение соответствует введению донору за 1-2 4 ч цо уцаления органа циметилсульфоксица в дозе 0,5 r/êã.

Заблаговременное вввецение криопротектора в организм стимулирует метаболическую и. структурную перестройку в органах и тканях, делая их более устойчи. выми к действию поврежцаюших факторов замораживания.

Использование прецлагаемого способа будет способствовать повышению жизне способности трансплантата, повышению результативности операций при пересадке криоконсервированных тканей.