Способ получения @ -3-/2-фурил/-акрилоильных производных аминокислот или пептидов

Способ получения @ -3-/2-фурил/-акрилоильных производных аминокислот или пептидов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ N-3-

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

ИИ Л

РЕСПУБЛИК

ЗСЮС07 С1 5

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ЮСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЬПИЙ (21 ). 3466526/23-04 (22) 31.05.82 (46) 15.01.84. Вюл. В 2 (72) В.Ф.Позднев (71) Институт биологической.и медицинской химии И4Н СССР (53) 547.964,4(088 ° 8) (56 ) 1. McClure ×åÎ °, .Neurath Н.

The .Reaction of Carboxypeptidase А

with Chromophoric Substrates.

Biochemistry", 1966,, I425 .2. Holmquist В,, Banning P.

Riordan J.F. А Continuous Spectrophotometric Assay for Angiotensin Converting Ehzyme. - "Anal. Biochemist . ry" 1979 95, 540.

3. Feder 3, Schuck J;M., 2 Studies

on the Bacillus Subtilis NeutralProtease and Bacillus Thermoproteolyticus Thermolysin-Catalyzed Hydrolysis of Dipeptide Substrates. — "BioсЬеа1в1гу ", I970, „ ), 2784.

4 ° Ikeda М, Chemical and Chemothe

rapeutica1 Studies ой Furan Derivatives ° XVI, Synthesis of 5-Nitro-2-furanacrykic Acid Derivatives.

"J.Pharm. Soc. Jap.", T955, 75, 60.

SU А (54 ) (57 ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ Н-3- (2,-ФУРИЛ)АКРИЛОИЛЬНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ АМИНОКИСЛОТ ИЛИ ПЕПТИДОВ путем ацилирования соответствующей аминокислоты или пептида активированным производным 3-(2-фурил)акриловой кислоты в присутствии третичного. амина в среде органического растворителя, о т л ич а ю шийся тем,.что, с целью упрощения процесса и повьиаения вы- хода целевого. продукта, в качестве активированного производного 3-(2"фурил)акриловой кислоты используют ангидрид 3-(2-фурил)акриловой кислоты и процесс проводят при комнат ной температуре.

1066984

Изобретение относится к усовершенствованному способу получения

N-3-(2-фурил)акрилоильных лроизводных аминокислот и пептидов, которые применяются в биохимии и медицине в качестве хромофорных субстратов 5 протеолитических ферментов и диагностических препаратов, а также в качестве полупродуктов при получении последних.

Известен способ получения N-3-(2- фурил)акрилоильных производных

10 аминокислот и пептидов путем взаимодействия производного аминокислоты или пептида с 3-(2-фурил)акриловой кислотой в присутствии дициклогексилкарбодиимида в качестве конденсирующего агента $13.

Недостатками этого способа являются низкий выход целевых продуктов и необходимость использования в процессе синтеза дициклогексилкарбодиимида, который обладает высокой.токсичностью и является сильным аллергеном.

Известен способ получения Я-3-(2-фурил)акрилоильнчх производных аминокислот и пептидов путем ацилирования соответствующей аминокислоты или пептида N-оксисукцинимидным эфиром 3-(2-фурил)акриловой кислоты.

Однако способ позволяет получать целевые соединения с хорсвщм выходом (23.

Однако для реализации способа необходим N-оксисукцинимидный эфир

3-(2-фурил) акриловой кислоты, кото- 35 рый является труднодоступным соединением. Этот реагент получают конденсацией 3-(2-фурил)акриловой кислоты с М-оксисукцинимидом в присутствии дициклогексилкарбсщиимида.

Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату является способ получения 3-(2-фурил)акрилоильных 45 производных аминокислот и пептидов, основанный на ацилировании соответствующей аминокислоты или пептида хлорангидридом 3-(2-фурил)акриловой . кислоты в присутствии третичного ами-- на в среде органического растворителя. Выход целевых продуктов по известному способу около 80% (3).

Недостатками этого способа являются химическая нестабильность хлорангидрида 3-(2-фурил)акриловой, кислоты при хранении. Этот реагент хранится не более 6 мес. при - 20 С.

Кроме того, в процессе синтеза необходим дополнительный нагрев реакционной смеси для более полного про- 60 текания реакции, что усложняет процесс s технологическом аспекте и требует дополнительных энергозатрат.

Цель изобретения — упрощение процесса и повышение выхода N-3-(2- 65

-фурил)акрилоильных производных аминокислот и пептидов.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения )-3-(2-фурил)акрилоильных производных аминокислот и пептидов путем ацилирования соответствующей аминокислоты или пептида активированным производным 3;(2-фурил)акриловой кислоты в присутствии третичного амина в среде органического растворите» ля в качестве активированного производного 3-(2-фурил)акриловой кисло ты используют ангидрид 3- (2-"фypилJакриловой кислоты и процесс проводят .при комнатной температуре.

Осуществление предлагаемого способа позволяет упростить процесс получения целевых соединений за счет использования в качестве ацилирующего агента ангидрида 3-(2-фурил)акриловой кислоты, стабильного при

-хранении в течение года нри 0 С, и снижения температуры реа.акции до комнатной. Кроме того, предлагаемый способ позволяет повысить выход целевых, соединений до 86-953.

Исходный ангидрид 3-(2-фурил}акри- лоной кислоты получают путем нагревания 3-(2-фурия)акриловой кислоты с уксусным ангидридом (43, Гомогенность полученных соединений контролируют с помощью тонкослойной хроматографии на пластинках

"Силуфол" (ЧССР) в следующих системах A — бензол : метилэтилкетон 4:1;

Б - бенэол : метилэтилкетон : уксусная кислота 100:50:1; В - хлороформ: метанол 9:1.

Пятна на хроматограммах детектируют визуально с помощью УФ-лампы и с помощью о-толуидинового реактива после предварительной обработки хроматограмм газообразным хлором.

Пример 1. Этиловый эфир

N-3-(2-фурил)акрилоилглицина.

Раствор 0,7 r ((5 ммоль) хлоргидрата этилового эфира глицина, 1,3 г ангидрида 3-(2-фурил)акриловой кисло. ты и 1,5 мп триэтилавяна в 20 мп хлороформа перемешивают 40 мин, промывают водой, раствором На>СО, водой, соляной кислотой, водой, высу- шивают над безводным сульфатом натрия и упаривают в вакууме при 40 OC.

Остаток кристаллизуют из смеси эфирпетролейный эфир.

Получают 1,0 r (90%) целевого продукта с т.пл..1 27-128 С. R

= 0,41 (Л)р 0,58 (В)р 0,66 (В).

Йайдено, Ъ! С 59,31; Н 6,11;

N 6,00. .,„Н .@ 04

Рассчитано В: С 59,18; H 5,89;

N 6,30.

Пример 2. Иетиловый эфир

N-3-(2-фурйл)акрилоил-Ь-фенилаланина.

1066984

Э

Раствор 0,7 r (3,25 ммоль} хлор-гидрата метилового эфира L-фенил-аланина, 0,78 г (3,0 ммоль) ангидрида .3-(2-.фурил)акриловой кислоты и 0,7 мп N-метилморфолина в 15 мл хлороформа перемешивают 30 мин при 5

20 С и обрабатывают аналогично примеру 1.

Получают 0,85 r (95%) целевого продукта с т.пл. 102-103 С, в

0g58 (P) Ок70 (Б)е О 90 (Б) e fg) = >Q . -72,5 .(С = 1; МеОЙ) °

Найдено, Ъ: С 69,23; Н 6,31;

Я 4,20.

С. Н. ИО

Рассчитано, Ъг С 68,99; Н 6,11;

N 4, 40.

Пример 3 Этиловый эфир

N-3-(2-Фурил)акрилоил-ь-фенил-аланил- глицил-глици на.

К раствору 0,68, г (2 ммоль) хлоргидрата этилового эфира L-Фенилала- 20 нил-глицил-глицина и 0,55 г (2,1ммоль) ангидрида 3- (2-фурил } акриловой кислоты в 5 мп хлористого метилена добавляют 0,6 мп триэтиламина и перемешивают 30 мин. Реакционную смесь разбавляют хлористым метиленом, оса, док отфильтровывают, промывают хлористым метнленом,. метанолом, эфиром и сушат в вакууме.

Получают 0,75 r (87%} целевого продукта с т.пл. 170-173 С, (оЦр =

= †.33 3 ь (С = 1 диоксай) Й

О, 09 (Б)у 0,50 (В)е

Йайдено, Ss С 64,60; Н 6,51;

И 8,90. . 35

2У Ь ь

Рассчитано, Ъг С 61,81; Н 5,89

И 9,80.

Пример 4. N-3-(2-фуриЛ}ак-; рилоил-L-Фенилаланнл-L-аланил-Ь- . 4П

-пралина.

К раствору 0,90 г (2,3 юаоль} бромгидрата метилОвого эфира L-фенилаланил-L-аленин-L-пролина- и

0,35 мл триэтилаькна в 5 мп диметнл- 45 формаьида добавляют 0,65 г (2,5 ммоль) ангидрида 3-(2-фурил}ак.риловой кислоты и 0,35 мп .триэтиламина и реакционную смесь перемешива.ют 40 он. Затем добавляют 1 мл воды, перемешивают 30 ьжн, разбавляют зтилацетатом до объема 50 мп; промывают водой, 1 И раствором К СОЗ, (два раза по 20 м водой 1И раствором

HCI, водой., насышенным раствором

NsC3, сушат наб безводным сульфатом натрия и упарнвают в вакууме. Кристаллический осадок растирают с эфиром, осадок отфильтровывают, промывают эфиром и сушат.

Получают 0,86 r (86%) метилового эфира N-3-(2-фурил ) акрилонл-L-фенилаланил-Т-аланил:,-L-пролина в виде ° твердого вешества с т.пл. 102-103 С, d

fg) ==120,6 (С = 1; МеОН); R)

О 66 (Б) ) О 56 ((Б)1 °

Йайдено, Ъ: С-64,60; Н 6у51р

N 8,90.

<>9 Н зНз0,, Рассчитано, Ъз С 64,23у Н 6, 24

N 8,90.

К раствору 0,65 r метилового эфира N- 3-. (Z-фурил ) акрилоил- L-Фенилаланил-L-аланил-L-пролина в 15 мп Мета нола добавляют 5 мл 1 И раствора

К СО4 и сьизсь перемешивают 16 ч при 20 С, разбавляют водой до объема 70 мл, экстрагируют этилацемЪ татом. Экстракт проьывают 1 И раствором КьСО . Объединенные водные растворы подкисляют до рН = 2,0, экстрагируют этилацетатом (3 раза по

15 мп), экстракт промывают водой, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают в вакууме.. Кристаллический осадок растирают с эфиром, осадок отфильтровывают и сушат в вакууме.

Попучают 0,54 г (86%) целевого продукта с,т.пл. 140-149 С (с разложением),(Ы)ф = 109,5 (С = 1;

МеОН) R = 0,16. (Б).

Найдено, %s С 63,58; Н 6,48;

N 8,90.

Су4 Няня ъоь

Рассчитано, Ъг С 63,55у Н 6,00)

И 9, 26.

Таким образом, предлагаеьый способ получения М =3- (2-фурил )акрилоильных.производных аьинокислот и пепти-. дов представляет собой простой в технологическом отношении процесс,, позволяюший получать целевые соединения с выходом 86-95%.

Составитель О.Галкин

Редактор Н.Киштулинец Техред И.Метелева Корректор,.С.ttleicMaP

Заказ 11145/26, Тираж 414 Подписное

ВНИИПК Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4