Штамм @ @ тэпв-1,используемый для идентификации и диагностики энтеропатогенных наг-вибрионов 1-го фаготипа

Штамм @ @ тэпв-1,используемый для идентификации и диагностики энтеропатогенных наг-вибрионов 1-го фаготипа

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Штамм Phagum cholericum ТЭПВ-1 Ф-109 (коллекция бактериофагов Тби .лисского научно-исследовательского института вакцин и сывороток V HKстерства здравоохранения СССР), используемый для идентификации и диагностики энтеропатогенных- НАГ- -вибрионов 1-го фаготипа.

((% (1П

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ЗЩ!С 12 В 7/00//(С 12 N 7/00

С i2 % 1/91) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTMA (21) 3539609/28-13 (22) 09.11.82 (46) 07.02.84. Бюл. 9 5 (72) Н.Ф. Быстрый, А;В. Элькина, Н.C. Солодовников и А.К. Адамов (71) Всесоюзный ордена Трудового

Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт ."Микроб"

l(53) 576.858.9(088.8) (56 ) 1i Авторское свидетельство СССР

9.586200, кл. С 12 N 7/00, 1977 (прототип). (54) ШТАММ PHAGUM CHOLERI GUM ТЭПВ-1 «

ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДПЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ И

ДИАГНОСТИКИ ЭНТЕРОПАТОГЕННЫХ HAI -ВИБРИОНОВ 1-ГО ФАГОТИПА. (57) Штамм Phagum cholericum ТЭПВ-1

Ф-109 (коллекция бактериофагов Тби,.лисского научно-исследовательского института вакцин и сывороток 1« инистерства здравоохранения CCCP), ис- пользуемый для идентификации и диагностики энтеропатогенных НАГ-"

-вибрионов 1-ro фаготипа.

1071635

Pseudomonas (31,) Staphylococcus (5)

Shigella (427) Salmonella (354)

Citrobacter (43) Proteus (30) к фагу ТЭПВ-1 не чувствительны.

Использование штамма Phagum chole

ricum T3HB-1.

Пример 1. Для размножения фага культуру штамма-продуцента отсевают на пластинку агара Мартена, рН 7,2-7,6 и 3-4 ч бульонной куль10 туры. Через 18-20 ч инкубации при

37 С готовят 1-2 млрд взвесь агаровой культуры в бульоне и 0,5-1,0 ьш ее вносят во флакон со 100-150 мл того же подогретого в термостате 5 при 37" С бульона. Посев подращивают

2-3 ч при 37 С до концентрации

5<108 ??. ??.>

7,4-7,6. Все содержимое бутыли ос25 торожно перемешивают и инкубируют в термостате при 37 С.

За посевом ведут наблюдение. Нарастание мутности бульона свидетельствует о продолжающемся росте и размножении культуры микробного штамма. Через 4-5 ч наступает просветление бульона с посевом на 3+ или 4+, это указывает на необходимость прекращения инкубации. Содержимое фильтруют через стерильные Фарфоровые

З5 свечи Л или Лэ или через асбестоВНе fiJ1BCTHHhI "СФ". фильтровальный препарат проверяют на стерильность, активность и специфичность диапазона литического действия по известным методикам и разливают в ампулы .по 2 мл. Препарат жидкий, хранят при 4-10 С, Пример 2. Штамм Phagum cholericum ТЭПВ-1 используется для инди45 кации и диагностики энтеропатогенных,.

НАГ-вибрионов 1-го фаготипа. Расплав,ленный и остуженный до 50 С 1,5-2%

Э агар на любой основе, рН 7,4-7,6, разливают в стерильные чашки Петри по 20-25 мл и после застывания подсушивают 30 мин при 37 С. В пробирки с 3 мл 0,7% агара, рН 7,2-7,6,, расплавленного на водяной бане и остуженного до 46 С, добавляют 0,20,3 мл 3-4-часовой бульонной культуры испытуемого штамма НАГ-вибрио- на, тщательно смешивают и быстро выливают на агаровую пластинку в чашку Петри. После его застывания на газон культуры платиновой пет60

) 65

Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается создания диагностического штамма Phagum chole

ricum ТЭПВ-1, используемого для идентификации энтеропатогенных НАГ-вибрионов 1-го фаготипа.

Известен штамм Phagum cholericum77 vs серотипа, используемый для идентификаций HAI -вибрионов 0-56 серотипа С11.

Однако данный штамм не позволяет идентифицировать HAI -вибрионы

1-го фаготипа.

Целью изобретения является получение нового штамма диагностического холерного фага ТЭПВ-1, используемого для идентификации и диагностики НАГ-вибрионов 1-ro Фаготипа.

Штамм фага Phagum cholericum

ТЭПВ-1 выделен путем селекции из популяции холерного фага III-ro серотипа, хранится в коллекции бактериофагов Тбилисского научно-исследовательского. института вакцин и сывороток N3 СССР под номером. -109.

Штамм фага Phagum cholericum

ТЭПВ-1 характеризуется следующими культурально-морфологическими признаками, Частица фага состоит иэ головки гексагональной формы размером

590>)45 A и короткого отростка

115 A. Латентный период фага ТЭПВ-1

50-55 мин при 100-200 мгВ аминного азота в 1 мл среды, на которой он размножается. При уменьшении до

50 мг% в 1 мл латентный период соответственно удлиняется до 65 мин.

Оптимальная множественность инфекции 1:l - -1:2 при концентрации, 10 микробных клеток в 1 мл среды. На индикаторной культуре фаг в arape

Мартена (pH 7,4-7,6) через 18-24 ч при 3 С образует прозрачные разной величины — 0,5-2 мм стерильные пятна правильной округлой формы с четко контурируемыми краями.

Штамм Phagum cholericum ТЭПВ«1 характеризуется следующими физическими свойствами. Высокоустойчив в хранении при 4-10 C до трех леь (срок наблюдения, при 22-26 С— до года, что делает его удобным для транспортировки.

Для получения штамма Phagum chole

ricum ТЭПВ-1 применяют специально подобранные tavareea Vibro Nag 600 или V.Nag 205, высокочувствительные только к фагу ТЭПВ-1 .

Штамм Phagum cholericum ТЭПВ-1 специфически активен в отношении энтеропатогенных НАГ-вибрионов

1-го фаготипа, и абсолютйо неактивеи в отношении штаммов других ви дов вибрионов. Так, штаммы микроорганизмов V,Parahaemolyiicus (58) .V, Algino1yticus (50) Aегоmonas (50 лей 2 мм или репликатором наносят указанный фаг иэ всех разведений.

После подсыхания капель чашку закрывают крышкой, переворачивают вверх дном и инкубируют при 37 С. в В случае необходимости получения

1071635

Составитель М. Бондарева

Редактор М. Товтин Техред Л.Микеш, Корректор A. Ильин

Заказ 45/20 Тираж 522 Подписное

ВНИИПИ Государственнога комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 ускоренного ответа, результат учитывают через 3-4 ч, =а при плановом обследовании допускается и позже, в пределах 18-20 ч. Оценку литического действия фага ведут по 4-балльной системег 4+ - сливной полный ливис, 3+ - множественные негативные колонии фага или полный лизис со следами вторичного роста культуры вибриона, 2+ — изолированные не-„ гативные колонии фага (не менее 10) или пятно лизиса со значительным рос.ТоМ вторичной культуры вибриона.

Положительным считывают ливис культуры от капли фага из любого разведения не ниже 2Ф .

5 Использование штамма Phaguin eh@le

ricum ТЗПВ-1 позволяет проводить ускоренную диагностику энтеропатогенных HAX -вибрионов 1-ro фаготипа и установить эпидсвязи в микрощ очагах между больными и внешней средой.