Способ определения триамтерена и его метаболитов в крови

Способ определения триамтерена и его метаболитов в крови

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

..СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРИАМТЕFEHA И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ В КРОВИ путем флюориметрии, отличающий с я тем, что, с целью повышения чувствительности способа, в крови осаждают белки и из полученной надосадочной жидкости экстрагируют целевой продукт ацетоном, охлажденным до (-10),- (-12) °С, (О Од 00 QO оо

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU„„ 6833 А

3(59 01 м 33 48 ач

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ."

К ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3401992/28-13 (22) 26.02.82 (46) 28.02.84. Бюл. 9 8 (72) A.A.Ëåáåäeâ, Г.П.Куэнецов и П.A.Ëåáåäåâ (71) Куйбышевский медицинский институт им. Д.И.Ульянова (53) 615-512(088.8) (56) 1. Brodie R.B. Chasseand L.F.

TayIor Т., Хо1вв9еу J.U. — Determination of the diuretic triamtereh in

p fesma and urine of human by highperformance Fignid chromatography.

"Chromatogr. Biomed. App8", 1979, чо2. 164, М 4, р.. 527-553.

2, Dayton Р,J,, Pruit A,W,, Мс Nay J,L, dr, Steinhorst J.

Studies with triamtereA à Substitu

ted. pteridine unusiab brain to

Р а ша га11.о in тампа 1в.

"Neuro, pharmaco и ., 197 2, vo В. 11, 3, р, 435-446, 3. Lassen J.Â, Я.ебвоп О.Е, Investigati cn into the d i u r et i c

effect and elimination of trianterw.

ne. — 4Acta pharmacot, et toxico2", 1963, чо3. 20, р. 399-316 (прототип) . (54) (57);СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ TPHAMTE

PEHA H E1Q META5OJIHTOB В КРОВИ путем флюориметрии, о т л и ч а ю щ н и -. с я тем, что, с целью повышения чувствительности способа, в крови осаждают белки и иэ полученной надосадочной жидкости экстрагируют целевой продукт ацетоном, охлажденным до (-10) - (-12) С °

1076833

Изобретение относится к фармакокинетике лекарственных веществ и касается способов определения лекарственных веществ в крови с целью увеличения эффективности применяемых средств и уменьшения их побочного действия.

Известен способ раздельного определения триамтерена и его метаболитов в крови методом жидкостной хроматографии высокого разрешения jI3.

Известна флюориметрическая методика определения триамтерена в биологическом материале (2 1.

Известен также способ, предусматривающий определение триамтерена 15 в биологических жидкостях с помощью флюоресцентного метода ГЗ .

Недостатксм известного способа является его малая чувствительность, не позволякщая определять триамтерен в крови человека в динамике после приема терапевтических доз.

Цель изобретения - повышение чувствительности способа, обеспечение многократного определения тр юамтерена в крови человека в динамике после приема терапевтических доз препарата.

Указанная цель достигается тем, что согласно способу определения триамтерена и его метаболнтов в крови путем флюориметрии, в крови осаждают белки и из полученной надосадочной жидкости экстрагируют целевой продукт ацетоном, охлажденным до — 35 (-10) — (-12) С.

Способ осуществляют следующим образом.

Из пальца больного берут микропипеткой 0,1 мл крови. Пипетку промы- 4() вают только дистиллированной водой, так как растворы гепарина или цитрата влияют на результаты анализа.

Кровь переносят в пробирку диаметром 7 мм и длиной 50-60 мм, в которую предварительно отмерено 0,7 мкл охлажденного в морозильной камере холодильника до (-10) — (-12) С ацетона (ч .) . Содержимое пробирки перемещают 5 мин, при этом происходит осаждение белков плазмы и форменных элементов крови, которые не дают возможности провести анализ триамтерена в крови. Одновременно происходит экстракция триамтерена иэ жидкой части крови и ее форменных элементов в ацетон, так как растворимость триамтерена в ацетоне весьма высокая . Наилучшая экстракция (более 90%) получена в ацетоне, другие жидкости (Н-бутанол, гептан, этилацетат, 60 хлороформ, эфир, трихлоруксусная кислота) дают более низкие величины экстракции триамтерена. Для обеспечения наименьшего исходного фона флюоресценции экстракцию триамтерена иэ проб крови производят в охлажденном ацетоне. Для лучшего осаждения белков смесь ставят в морозильную камеру холодильника, в которую заранее помещают ванну, наполненную спиртом и создающую охлаждение до (-10) †.(-1 2) С. Охлаждение пробирок с пробами крови производят 30 мин.

На всех этапах пробирки, содержащие ацетон, закрывают полиэтиленовыми пробками для предотвращения испарения ацетона. После 30-минутного охлаждения пробирки центрифугируют при 3000 об/мин 5 мин, надосадочную жидкость сливают в другие пробирки и флюориметрируют.

Флюориметрирование производят на флюориметре или спектрофлюориметре, приспособленными к работе с объемом жидкости 0 5 мл. Для этого используют кюветы, изготовленные из кварцевых трубок с внутренним диаметром

3 мм или другие кюветы подходящего объема. При наличии высокочувствительного флюориметра типа Хитачи возможно измерение флюорисценции в кюветах несколько большего объема с соответствующим увеличением объема ацетона, взятого для экстрагирования. Длина волны возбуждения флюоресценции 360 нм, длина волны регистрируемой флюоресценции 458 нм.

При работе с флюориметром возбуждение производится светом ртутной лампы при первичном светофильтре

УФС-6, при вторичном — ЖС-3 и синем светофильтре.

Пример. Больной Ф., 52 года, диагноз: гипертоническая болезнь

П стадии с преимущественным поражением сосудов головного мозга. Для лечения заболевания был назначен триампур в дозе: 2 таблетки 3 раза в день. Каждая таблетка триамнур содержала 25 мг триамтерена и 13,5 г гипотиазида.

Б первый час после приема триампура концентрация в крови триамтерена нарастала, в 1 0-00 концентрация триамтерена в крови оказывается максимальной — 13,0 10 г/мл, в течение последующих 4 ч концентрация в крови прогрессивно падает.

Параллельно изменению концентрации триамтерена изменяется и выделение. трнамтерена с мочой. Таким образом, наиболее существенный подъем концентрации триамтерена в моче и крови наблюдался 5 ч.

Больному Ф. в последующие дни триампур давался 3 раза в день по

2 таблетки. Больной получал по

50 мг триамтерена и 25 мг гипотиаэида в 8,00, 13.00 и 18.00 .ч. Концентрация триамтерена в крови в первые два дня не определялась, в течение третьего, четвертого, пятого дней

10768 33

Составитель И.Емельяненко

Редактор Н.Стащншина Техред М,Надь Корректор Г.Решетник

У Ч еч к

Заказ 7 39/42 Тираж 823 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета CCCP по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г.ужгород, ул.Проектная, 4 была равна 0,032-10 - г/мл, в течение пятого и шестого дня она была равна нулю. Эти данные согласуются с результатами определения препара.. та в крови после однократного прие ж. Трехкратный прием триампура в течение дня не может создать высокую постоянную концентрацию в крови в течение. суток, так как препарат обладает большой скоростью выделения. При этом достаточно высокая концентрация в крови не создается и диурез не возникает.

Предлагаемый способ достаточно прост, не требует дорогостоящей аппаратуры, удобен, так как позволяет проводить многократные анализы крови у одного и того же больного в течение суток.

Способ может быть применен в условиях клиники и испольЗован в поликлинических условиях для контроля эффективности.лечения триамтереном и

,препаратами, содержащими трнамтерен.