Способ получения тетрапептидов или их кислотно-аддитивных солей

Способ получения тетрапептидов или их кислотно-аддитивных солей

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Способ получения, тетрапептидов общей формулы tBOC-N-Tur-DAlaI R где R, R и имеют указанные значения , R-Tyr-DAla- Uly-T R-CH-COISIHg СН2 где R - водород, алкил С,|-( ; алкил . , циклопропилметил; X - бром, хлор, йод и метил, или их кислотно-ад1яитивных солей, отличающий с я тем, что защищенный тетрапептид общей формулы S О) (MtJ-N-CH-CONHj подвергают деблокированию при обработке трифторуксусной кислотой.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТМЧ ЕСЛИ Х

РЕСПУБЛИН (19) Ol l

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

И flATEHTV

il 6 " % у Ф Л Г

В.)

t БОС вЂ” N-ТЧ вЂ” ВЛ1e— - Q-1Ч вЂ” N- СН вЂ” СОМНг

1 1

В. СН (21) 3345906/23-04 (22) 19.10.81 (31) 198900 (32) 20.10,80 (33) США (46) 23,03;84. Бюл. Р 11 (72) Пол Дэвид Джеселлчен и Роберт Теодор Шуман (США) (71) Э1ти Лилли энд Компани (CUIA) (53) 547,964.4 ° 07(088.8) (56) 1. Шредер Э., Любке К. Пептиды.

М., "Мир", 1967, ч. 1, с, 114. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТЕТРАПЕИТИДОВ

ИЛИ ИХ КИСЛОТНО-АДДИТИВНЫХ СОЛЕЙ. (57) Способ получения. тетрапептидов общей формулы где Й, Й„и имеют указанные значения, 3(51) С 07 С 103/52; A 61 К 37/02

R ТУà — ЗА1а — б1Ч ИВ. — СН-СОЮН2

1 2 где R — водород, алкил С,1-С,;

Я вЂ” алкил С -С циклопропил1 1 метил;

X — - бром., хлор, йод и метил, или йх кислотно †аддитивн солей, отличающийся тем, что защищенный тетрапептид общей формулы подвергают деблокированию при обработке трифторуксусной кислотой.

1082319

Изобретение относится к способу получения новых биологически активных соединений — тетрапептидов или их кислотно"аддитивных солей, которые могут найти применение в медицине, Известен способ получения пептидов путем отщепления 7р Е 7 -бутилоксикарбонильной группы от соответствующего блокированного пептида путем об- 1О работки последнего трифторуксусной кислотой в присутствии аниэола при

0 С t1)

Цель изобретения — получение новых соединений, обладающих интересными фармакологическими свойствами.

Поставленная цель достигается способом получения тетрапептидов общей формулы — 20

25 где — водород, алкил С „-С

К вЂ” алкил С 1-С>, циклопропилметил; 30

rUrop йоД и метил . пи их кислотно-аддитивных солей, заключающимся в том, что защищенный тетрагептид общей формулы

I ВОС-И-тУ1- ВМа-ШУ-М вЂ” СМ-IOm

f 1

R 4 (I I )

40 где"Я, Я и Х имеют указанные значения 9 подвергают деблокированию при обрабо гке трифторуксусной кислотой. 45

Тетрапептиды формулы(1)выделяют в виде кислотно-аддитивных приемлемых с фармацевтической точки зрения нетоксичных солей, которые включают соли органических и неорганических кис-50 лот, например таких, как соляная, серная, сульфо-, винная9 фумаровая, бромистоводородная, гликолевая, лимонная малеиновая9 фосфорная, янтарная9 уксусная, «зотная, бензойная, 55 аскорбиновая, -толуолсульфо-, бензолсульфо-, нафталинсульфо-, пропионовая и других.

B описании использованы следующие сокращения: Abu-о(-аминомасляная i кислота, Ala — алании, Cys — цистеин, Cys(Ме) — (S-метил)-цистеин, Cys(Ме) (О) — (S-метил)-цистеин сульфоксид, Gly — глицин, Gly(A1) — аллилглицин, Сla(Cp) — циклопропилметилглицин, Hse — гомосерин, Ile — И3о-лейцин, Leu — лейцин, Met — метионин, Iet(0)— сульфоксид метионина, Nle — норлейцин, Nva — норвалин, Phe — фенилаланин, Ser — серин, Thr — треонин, Tyr — тирозин, Val — валин, Ас — ацетил, АсОГ1е — ацетоксиметил, А1 аллил, Ср — циклопропилметил, Ме— метил, Et — этил, Iр -иза -пропил, Pr — Н -пропил, ÎMe — метокси, Etm— этилтиометил, Fle — 2-фторэтил, Ppg — пропаргил, Bu — н,-бутил, i-Bu — изо -бутил, t-Bu -трет -бутил, s-Bu -Втор -бутил, Вос †тр -бутилоксикарбонил, Bzl — бензил, Csz бензолоксикарбонил, DCC — N N -дициклогексилкарбодимиид, HBT — 1-оксибензотриазол, DMF — N9N -диметилформамид, TFA — трифторуксусная кислота, THl — тетрагидрофуран, пЕА1. =— диэтиламиноэтил, NMM — N-метйлморфолин9

IBCF — иЗо -бутилхлорформи-.ò9 18-крон-6-1,4,7,10,13,16 — гексаоксациклооктадекан.

Каждое иэ соединений формулы имеет заместитель в мета-позиции феналаланина и, кроме того, любое из них или все они могут находиться в форме приемлемой с фармацевтической точки зрения нетоксичной присоединенной соли кислоты.

Пример 1. Получение соли ацетата L-(Ч-метил)тирозил-D-аланил-глицил-L-(N-циклопропилметил)-мета-бромфенилаланин амида.

А.. гиповый сложный эфир Г1-ацетил- 9-циано-Р-L-метабромфенилаланина.

К суспензии 16,8 г (0,35 моль) гидрида натрия (50K-ный раствор в минеральном масле) в 260 мл сухого

ТГФ при перемешивании при комнатной температуре добавляют небольшими порциями 59956 г (0,35 моль) этилацет амидоцианоацетата. B реакционную смесь по каплям добавляют раствор

37948 г (0,35 моль) метабромбензилбромида в 50 мл (сухого) ТГФ, Смесь сначала несколько охлаждают, а затем перемешивание продолжают при комнатной температуре в течение 72 ч9 после чего дефпегмируют в течение

4 ч. Смесь затем охлаждают до комнатной температуры и добавляют 80 этилового спирта. Перемешивание про должают еще в течение 30 мин, а затем вливают реакционную массу в IN раствор НСI. Водную смесь экстрагируют этилацетатом, слой этилацетата отделяют и промывают последовательн водой, IN раствором бикарбоната нат рия и водой. Этилацетат сушат над сульфатом магния и концентрируют в вакууме до масла (107 r).

ЯМР с ":2 0 (ацетил), 3,4-3 5 (метилен) и 7,1"7,5 (мета-бромфенил).

Б. D L-Мета-бромфенилаланин.

Продукт, полученный на стадии А (107 r, 0,32 моль) суспендируют в растворе 58,8 r (1,47 моль ) таблето гидрата окиси натрия и 220 мл воды.

Полученную в результате смесь дефле мируют в течение 24 ч. Далее смесь охлаждают до комнатной температуры и ее рН доводят до 6,5 при помощи

7N раствора НСI ° Полученный и выпав ший в осадок продукт собирают, суша получают 41,01 г (533) соединения.

В, N-трифторацетил-D,L-мета-бром д. фенилаланин.

К 200 мл трифторуксусной кислоты добавляют 46,53 r (0,19 моль) D,L-м та-бромфенилаланина. Смесь охлаждают до 0 С и в течение 5 мин добаво ляют 29,3 мл (0,21 моль ) трифторуксусного ангидрида, Полученный раствор перемешивают при 0 С в течение о

l 5 ч и 3 ч при комнатной температу ре, после чего реакционную массу ко центрируют в вакууме. Остаток раз" бавляют 400 мл воды и выпавший в ос док продукт собирают и сушат. Твер дое вещество кристаллизуют из смеси

6, простой эфир-петролейный эфир, полу

1082319

4 гулируемой водяной ванны и РН 7,2 мл при помощи радиометра величины РН..

Раствор энергично перемешивают в течение 5 дн, затем РН доводят до 5,0 добавляют углерод и смесь фильтруют.

РН фильтрата доводят до 3,0 при помощи IN HC1 и затем фильтрат экстра" о гируют трижды зтилацетатом, после чего РН водного раствора доводят до

1О 7,0 при помощи 2N раствора NaOH u раствор.. концентрируют в вакууме до начала кристаллизации L-иэомера. Смесь охлаждают до комнатной температуры, выпавший в осадок продукт собирают, сушат, получают 10,9 r (1093 ) соеди" нения.

Д . - трет"Бутилоксикарбонил-L-мек та-бромфенилаланин.

В смесь 25 мл трет -бутилового г- 2л спирта и 20 мл воды добавляют 9,9 г (0,041 моль) продукта со стадии Г, затем 20,5 мл (0,041 моль) 2N раствора NaOH и 8,9 г (0,041 моль) ди-трет -бутил карбоната. Смесь перет,.2S мешивают при комнатной температуре в течение 5 ч, после чего добавляют

150 мл воды и продукт зкстрагируют эфиром. Водный слой отделяют, подкисляют до РН 2,5 при помощи холодного е"3ð IN раствора НСI и экстрагируют эфиром.

Эфирный слой промывают водой, сушат над сульфатом магния и упаривают в вакууме, Маслянистый остаток растворяют в петролейном эфире и Раствор о выдерживают при 4 С в течение ночи.

Выпавшие в осадок кристаллы отфильтн- ровыэают, сушат, получают 11,3 r (80K) соединения, точка плавления 124а- 125 С, (d.) +16,7о (с=l 0, EtOH).

40 Элементный анализ.

Найдено, Ж: С 49,25; Н 5,59;

Н 4,04. чают 28,4 г (44/ ) соединения. С.)1 Н ВМО„, Br (344)

Элементный анализ. Вычислено, 7.: С 48,85; Н 5,271

Найдено, /: С 39,09;.Н 2,46; 45 Е. утрет -Бутилоксикарбонил-1-ме"

C N0 BrF (340 1) та-бромфенилаланин амид.

"11 9 3 3

° у К смеси 50 мл ДИФ 11,5 r (0,033 моль)

Вычислено, 7: С 38,35; Н 2,67; Ф оет-бутилоксикарбонил-Ь-мета-бром-, N 4,12. . фенилаланина, охлажденной до 15оС.добав.

Г. L-мета-бромфенилаланин.

Смесь 28 г (0,082 моль) продукта ° 4 33 мл (О 33 моль ) и о -бутил оо е мл у полученного в стадии В, добавляют х формиата. Смесь перемешивают при — 15 C

500 мл воды, перемешивают, а затем к в течение 5 мин, после чего через ней добавляют 2N раствор НаСР до по" реакционную массу в течение I ч барлучения прозрачного раствора (pH 7э2) 55 ботируют безводный газообразный амДобавляют карбоксипептидазу А (25 мг) миак (газ ). Реакционную массу переи поддерживают температуру раствора мешивают еще в течение 4 ч при — 15 С о

{37 С)при помощи термостатически Ре и вливают в смесь измельченного льда

1 082319 и )N раствора бикарбоната натрия.

Полученный нодный раствор экстрагируют этилацетатом. Органический слой отделяют и промывают последовательно водой, 1 5N раствором лимонной кислоты и водой. Органическую фазу сушат нац сульфатом магния и концентрируют н вакууме до твердого состояния.

Твердое вещество растирают с эфиром и полученный осадок отфильтровывают и сушат, получают 11,3 г (100X 7 соединения; т. пл. 146-147 С.

« (<41)+ 9,8(с=0,5 NeOH), Элементный анализ.

Найдено, %: С 48,85; Н 5,33;

N«7,91.

С„, Н И,О3 Вг (343, 2)

Вычислено, %:С 48,99; Н 5,58;

N 8,16.

Ж, Хлоргидратная соль L-мета-бромфенилаланин амида.

В 60 мл свежеприготовленного 1N оаствора НС1 (газ) в ледяной уксусной кислоте, содержащей 5 мл анизола, >5 добавляют 11,1 г (0,032 моль) продукта со стадии Е,. Смесь перемешивают при комнатной температуре в те:«ение 30 мин, затем вливают в эфир

«4 полученный осадок собирают и сушат, получают 8,75 г (98% ) соединения °

« А) +13,46,(с=0,5 MeOH). лементный анализ.

Найдено, %: С 38,55; Н 4,41;

l0.

С9Н N ОС1Вг (279,6)

Вычислено, %:С 38,67; Н 4,33; !

1 i0 02.

3. N-Циклопропилметил-Ь-мета-бромфенилаланин амид.

В 50 мл безводного этанола добавляют 4,2 г (0,015 моль ) продукта со .:тапии Ж, а затем 5,04 г (0,06 моль) .евердого безводного бикарбоната нат45 рия и 2,04 г (0,015 моль ) циклопропилметилбромида. Смесь дефлегмируют, в течение 7 ч и упаринают в вакууме до масла, Масло растворяют в 20 мл хлсроформа и чистят колоночной хро50 матографией на колонке типа Грейса и Дэфисона 62 на силикагеле в хлороформе. Продукт элюируют при помощи послестадийного градиента до 10% метанола. Продукт выделяют в соот55 нетствии с профилем, определенным хрсматографией в тонком слое собранньгх фракций, получают 2,2 г (49%) .соедичения, ЯМР р; 1, б (-NH-) и 7,0-7,4 (мета-бромфенил) °

И . N — трет -Бутилоксикарбонил-D.O

-аланил-глицил-Ь- (Ь-циклопропилметил)-мета-бромфенилаланин амид.

В смесь из 40 мл ДМФ и 2,1 r (7,1 моль) продукта со с адни 3, охлажденную до 0 С, добавляют 1,87 r (791 мОль) Ь-т ет-бутилоксикарбонилф, -D-аланил-глицила, а затем 0,96 r (7,1 ммоль ) ОБТ и 1,46 r (7,1 ммоль )

ДЦК. Смесь перемешивают при 0 С в тео чение 4 ч, а затем при комнатной температуре н течение 72 ч. Смесь затем о охлаждают до О С, полученный н результате осадок удаляют фильтрацией, фильтрат упаривают н вакууме. Остаток растворяют в этилацетате и раствор экстрагируют последовательно 1N раствором бикарбоната натрия, водой, i 5N раствором лимонной кислоты и водой. Органическую фазу сушат над сульфатом магния и упаринают в вакууме до масла, получают 1,5 г (40X) соецинения.

К. Ф трет-Бутилоксикарбонил-lv †метил-Ь-тирозил-D-аланил-глицил-L.ю« — (ь-циклопропилметил }-мета-бромфенилалачин амид.

Смесь 50 мл трифторуксусной кислоты, содержащей 5 мп анизола и 1,5 г (2,9 ммоль) продукта со стадии И, перемешивают при 0 С н течение 30 мин и упаривают в вакууме без нагревания.

Полученное в результате масло разбавляют простым эфиром. Образующийся сверху в результате отстаивания продукт декантируют, а оставшееся масло сушат в вакууме, В 15 мл ДИФ добавляют 0,856 г (2,9 моль) рет -бутилоксикарбонил-М"-метил-Ь-тирозина. Смесь охлаждают до — 15 С и в перемешинаемый

О раствор быстро добавляют 0,32 мл (2,9 ммоль) NMN и 0,38 мл (2,9 ммоль)

««so -бутилхлорформиата, Перемешивание при -15 С продолжают в течение следующего процесса, Полученную соль ТФК трипептида растворяют в 10 мл ДМФ, Раствор охлаждают до 0 С и добавляют о одну порцию 0,32 мл (2,9 ммоль) NNN.

Раствор перемешивают до окончания процесса и добавляют в ранее полученный раствор смешанный ангидрид.

Полученную в результате смесь перес мешивают при — 15 С н течение 4 ч, затем медленно нагревают до комнатной температуры и перемешивание продол1082319

-жают в течение ночи. Смесь затем вливают в IN раствор бикарбоната натрия, водный раствор экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу отделяют и

20 экстрагируют последовательно водой, 1,5N раствором лимонной кислоты и водой. Затем этилацетат сушат над сульфатом магния и концентрируют в вакууме. Маслянистый остаток (1,6 r) растворяют в ацетоне и наносят на две препаративные пластины с тонким слоем. Проявление ведут в смеси хлороформа и метанола при соотношении

9:1, Основная компонента отделяется с пластин ТСХ и элюируется с силикагеля, получают 0,8 r (397.) целевого соединения.

Jl. Ацетатная соль 11" -метил-L-тирозил-D-аланил-глицил-L-(N -циклопропилметил 1-мета-бромфенилаланин амида, В 15 мл ТФК, содержащей 3 мл анизола, добавляют 0,8 г (1,2 ммоль ) продукта, полученного в стадии К.

Смесь перемешивают при 0 С в течео ние 30 мин, после чего сушат замораживанием. Полученное твердое вещество растворяют в 9,0 мл 0,1 М раствора ацетата аммония, содержащего 3IX ацетонитрила. Полученный раствор ЗО хроматографируют на колонке с силикагелем (4х72 см). Колонку обрабатывают давлением 4,2 кг/см и элюат анализируют при 280 нм. Соответствующие фракции собирают и лиофилизуют, Полученное твердое вещество растворяют в 0,2 М растворе уксусной кислоты (10 мл) и раствор пропускают через колонку с сефадексом (5zl00 cM) предварительно уравновешенную тем 40 же растворителем. Злюат анализируют в области 280 нм и соответствующие фракции собирают, лиофилизуют, в результате получают 773 мг (977)соеди" кения. (с )р +бф64 (с=0,5, IN HCl).45

Злементчый анализ.

Найдено, %: С 54,30; Н 5,99;

М 10,28.

СЗО Н+О 1 О Вг (662,2)

Вычислено, : С 54 38; Н 6 09;

N 10,57.

Аминокислотный анализ, 7.: Аlа 0,97

Gly 1,03; NH 0,99.

Пример 2. Ацетатная соль

L-(N-метил)тирозил-D-аланил-глицил-L-(N-этил)-мета-бромфенилаланин амида. (k) > + 7 I о (c=O 5 IN НС1) Элементный анализ.

Найдено, X: С 53,09; Н 6,13;

Ы 11,13.

С28 H>>N+0 >Br (636,5)

Вычислено, X: С 52,83; Н 6,02;

N 11,00.

Аминокислотный анализ, .:Аlа 0,99;

Gly 1,01; ЯН 1,04.

Пример 3. Ацетатная соль L-тирозил-D-аланил-глицил-L-(N-этил)-мета-бромфенилаланин амида, (If) — 8,8 (с=0,5, IN HCl)

Элементный анализ.

Найдено, 7.: С 52,13; H 6,09;

N 11,39.

C2q HggN 0 pr (623)

Вычислено, 7.: С 52,09; H 5,83;

N ll,25, Аминокислотный анализ,X: Tyr 1,01;

Ala 0,99; Gly 0,99 NH> 1,01, Пример 4. Ацетатная соль

L""(N-метил)тироэил-Э-аланил-глицил-Ь-(N-этил-мета-метнлфенилалаиин амида. (4 + 9,2 (с 0,5, IN HCl).

Элементный анализ.

Найдено, 7.:С 60,68; Н 7,00;

N 12,46.

С2эН4 NyOg (517,7)

Вычислено, X: С 60,93; Н 7,23;

N 12, 25.

Аминокислотный анализ,X: Аlа 0,98;

Иу 1,02 NH> 0 96°.

Пример 5, Ацетатная соль

L-тирозил-D-аланил-глицил-L-(N-этил)-мета-хлорфенилаланин амида. (Ы)Р— 13в7 (с=0,5, IN HC1)

Элементный анализ.

Найдено, 7; С 55,84; Н 6,37;

N 12,35, С2 Н >Р 0qC1 (578, 1)

Вычислено, 7.; С 56,10; Н 6,28;

N 12,12.

Аминокислотный анализ,X: Tyr 1,02;

А1а 0,99; Gly 0,98; NH 0,88.

Пример 6. Ацетатная соль

L-(N-метил)тирозил-D-аланил-глицил"

-L-(N-этил)-мета-хлорфенилаланин амида. (ф1) -9,2 (c=0,5, IN НС1)

Элементный анализ.

Найдено, X: С 57,11; H 6,45;

N I29I5.

С 8 Н38 М50 7С1 (592, 1) Выччслено, X: С 56,80; Н 6,47;

N 11,83.

Аминокислотный анализ, 7:Аlа 0,99;

Gly 1,00; NH> 1,01 °

1082319

Пример 7. Ацетатная соль

L-тирозил-D"àëàèèë-глицил-L"(N"ýòèë)

-мета-йодфенилаланин амида, (+X -14,0 (с0,5 1И НС1).

Элементный BHBJIHs ° 5

Найдено, 7: С 48,40; Н 5,25;

И 10,66.

С -!Н 5И6011 (669,5)

Вычиспеоо, 1: С Z8,44; Н 5,42;

И 10,46. !О

Аминокислотный анализ,%; Tyr 1,01;

А1а 0,99; Gly 0,99; NH 1,05.

П р и м .е р 8, Ацетатная соль

L-тирозил-D-аланил-глицил-L-(N-цикf5 лопропилметил -мета-йодфенилаланин амида. (F1 +1,!8 (c=0,5, 1М СН СООН 1

Элементный анализ, Найдено, 7.: С 50,00; Н 5,22;

И !0,23

С2 Н ц И,О„Л

Вычислено, X С 50 р 08; Н 5, 5

И 10,07.

Аминокислотный анализ,X: Tyr 0,99;

Ala 1 О! Gly 0 99 NHg 0 95

Пример 9, Ацетатная соль

1--(И-метил)тирозил-D-аланил-глицил-L--(N-циклопропилметил 1-мета-йодфенилаланнн амида. (Ы«25 +0 787 (с=0,5, 1м СН C00H). Зо

Элементный анализ, Найдено, X: С 50,50; Н 5,40;

9,88.

С За Н+ОИ5-07-!

Вычислено, 7.: С 50,78; Н 5,68;

6 9,8).

Проведены биологические испытания описываемых тетрапептидов.

Болеутоляющая активность соединений формулы (i установлена при помощи испытания на мышах с использованием горячей пластины, В этом испытании применяют вертикальный акриловый цилиндр, содержащий в качестве основания горячую плоскую по- 5 верхность, темлература которой поддерживается на уровне 52 С. Иьппам о вводят подкожно заранее определенное количество испытуемого соединения,, растворенного или суспендированного 50 в подходящем носителе, через 15 мин после применения испытуемого соединения мышь помещают на горячую плоскук поверхность. Измеряют скрытое состояние в секундах до прыжка мыши 55 с горячей плоской поверхности, Агент, обладающий болеутоляющей активностью вызывает увеличение этого скрытого

Таблица!

ED, . г/кг

Соединение по примеру! 2х!О

0,003

0,0049

0,003

0,0003

0,00!8

0,00!9

Кроме того, соединения формулы (1) обладают низкой склонностью к физической зависимости. Этот факт установлен при помощи испытания, связанного с исследованием двигательной способности мышей. Была установлена высокая корреляция между степенью склонности к физической зависимости соединения и его способностью вызывать двигательную активность у мьппей °

Двигательную активность у мышей измеряют при помощи цилиндрических клеток, изготовленных из проволоки, 5,08 см высотой и 28 см в диаметре.

Шесть клеток помещают в звукоизолиросостояния по сравнению с контрольной мышью, который был введен только носитель. Это может проявляться в -области доз, которые не вызывают потери моторной координации или способности двигаться.

В табл.1 представлены величины

ED

Болеутоляющий эффект определяют как реакцию скрытого состояния в присутствии испытуемого соединения, которая больше или равна контрольной реакции скрытого состояния плюс два стандартных отклонения. Эффект болеутоления в процентах рассматривают каК статистическую величину и ED5 вычис0 ляют методами регрессионного анализа данных доза-эффект. Каждая кривая доза-эффект должна иметь по крайней мере четыре точки и каждая точка определяется с использованием данных, полученных для по крайней мере десяти обработанных мышей и десяти контрольных мышей.

10823

11 ванную снабженную вентиляцией каме. ру с равномерным освещением. Пуч света проходит через центр клетки к фотоячейке, расположенной на противоположной стороне. Две мыши помещают в каждую клетку на 1 ч с целью акклиматизации к окружающим условиям, Затем пяти парам мышей подкожно вводят определенное количество испытуемого соединения, оставшаяся пара 10 обрабатывается соляным носителем, не содержащим испытуемое соединение,,д — д, ),)Я, гу а б л и ц а 2

Доза мг/кг

1 1 1 1 I

8 16 32 64 ) 28

2388

3767 2807

4477 3476

125

613

819

148

304

796

1978

1092 2820

200

512

2523 5153

1888 2)59 !

630 2871

3231 3852

142

235

358

701

140

320

171

276

174

363

852

178

1)76

537

173

255 м-Ме

704

1204

29)6

3528

431

1425

2415

2033

М

Известные соединения.

Иэ табл.2 видно, что по сравнению с известными соединениями соединения

Составитель В,Волкова

Редактор И.Николайчук Техред П.Коцюбняк Корректор A Тяско

Заказ 1578/54 Тираж 4)0 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Н Et

Me Et

Н Et

Me Et

Ме Срм

Н Et

Me Et

Н Et

Me Et м-Cl м-С! м-Br м-Br м-Br

)9 12

Затем мышей возвращают на 3 ч в соответствующие им клетки. Записывается число показаний счетчика эа каждые

15 мин, а также общее число эа трехчасовой период. Каждое прерывание луча света изменяет показание счетчика на единицу.

В табл. 2 приведено среднее значение общих чисел для каждой группы из десяти мышей с использованием конкретного соединения и определенной .дозы. вг формулы (j ) обладают существенно более низкой двигательной активностью.