Штамм @ @ n6,используемый в качестве тест-культуры для определения активности интерферона

Штамм @ @ n6,используемый в качестве тест-культуры для определения активности интерферона

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ШТАММ STAPKYLOCOCCUS EPIDERMIDIS № 6. (коллекция ГИСК им.Л.А.Тарасевича/ , № 33, используемый в качестве тест-культуры для определения активности интерферона.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

828О8 . А (19) (11) ОЛИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ASTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21 ) 3463336/28-13 (22) 05.07.82 (46) 30.03.84. Вюл. 9 12 (72) С.A.Печеркина (71 ) Пермский государственный медицинский институт (53) 576.8.093.1(088.8) (56) 1. Регламент по производству нативного интерферона 134-69.

3(5И С 12 1(15/00//A 61 К 45/02;

С 12 R. 1/45 (54) 11ITAMN STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS Р 6, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ В КАЧЕСТВЕ

ТЕСТ-КУЛЬТУРЫ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ИНТЕРФЕРОНА. (57) ШТАММ STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS 9 6.(Коллекция ЁИСК им.Л.А.Тарасевича), )) 33, используемый в качестве тест-культуры для определения активности интерферона.

1082808

Изобретение относится к микробио.-. логии и может быть использовано при производстве интерферона.

Известно использование вируса а качестве тест-культуры для определе. ния: активности интерферона (".1 3. 5

Однако использование вируса s,качестве тест-культуры усложняет опре.деление активности интерферона, так каК требует подготовки культур кле ток, что является длительной и слож- 10 ной процедурой.

Цель изобретения — упрощение определения активности интерферона.

Доставленная цель достигается тем, что используют штамм Staphylococcus еРЫегш161а Р б.

Штамм. Staphylococcus epidermidis

9 6 выделен из окружающей среды.

Хранится в коллекции РИСК им. Л.A.Тарасевича под номероМ 33 и хараКтеризуется следующими признака ми.

Морфологические признаки.

Клетки имеют форму шаров диаметрам 0 5-0,8 мкм, группируются а скопления, напоминающие гроздья внногра25 да, окрашиваются грамположительно, неподвижны и не образуют спор и капсулe

Культуральные признаки.

Мясопептонный агар, молочно солевой агар. Колонии белого цвета, раву мерноаыпуклые с ровным краем, ладкой матовой поверхностью, диаметром 1,0-1,5 мм. Колонии легко снимаются с агара бактериальной петлей. 35

Мясопептонный бульон, сахарный бульон. Помутнение бульона и небольшой осадок..

Физиологические признаки.

Отношение к .кислороду: факульта- 4р тканый азроб. Оптимальная температура для размножения 37ОС, Глюкоза, лактоза,мальтоза,галактоза,сахароза, глицерин-сбраживание до кислоты без выделения газа. 45

Результаты использова для выявления уровня интерфе

Антибактериальный титр интерферона

Антивирусный титр интерферона по задержке ЦПД в культуре клеток

Объект исследования

1:128

1: 128

1:64.

1:2048

1:4096

1:512

1:64

1:2

294

1:2

1:4

Цельная

Натианый препарат человеческого лейкоцитарного интерферона выпуска ПНИИВС, серия

340

285

Сыворотка крови донора

МЬлоко свертывает. Желатин раэжи жает.

Нитраты аосставнавливает а нитрн ты.

Образует аммиак и сероводород.

Культура не однородна по синтезу

g -гемотоксина.

Плазмокоагулазу не имеет.

Лецитовителлазу не имеет.

ДНК-аэу не имеет.

Новобиоцион - чувствителен.Резис тентен к лизоцину сыворотки крови.

КомплементУ резистентен. Препарат интерферона — чувствителен. Погибает или перестает размножаться в зависимости от активности препарата интерферона при прямом контакте в течение 18 ч (t 37oC !.

Н р и м е р 1. Готовят последовательные разведения препарата интерферона мясопептонным бульономв объеме 1,0 млв пробирках. Эатем пбмещают в пробирки пО 100000 Клеток стафилококка, предварительно выращенного на косом агаре в течение 18 ч.

Пробирки выдерживают s термостате при 37 С в течение 18 ч. Учет результата опыта проводится визуально. 3а антибактериальный титр испытуемого интерферона принимают то его наибольшее разведение, при котором культура стафилококка не растет (содержимое соответствующей пробирки остается прозрачным ).Результаты выявления уровней интерферона в нативном препарате человеческого интерферона выпуска Пермского НИИВС и в донорских сыворотках крови приведены в таблице. Выявление интерферона а образцах проводили одновременно по задержке цитопатогенного действия (ЦДД ) в культуре человеческих фибробластов (регламент 134-39 1 и бактериологическим методом серийных разведений. ния штамма В 6 стафилококка рона в сравнении с прототипом.

: 1082808

Составитель Г.Смирнова .

Редактор Л.Пчелинская Техред И.Иетелева Корректор Г.Решетник

° Ф «В «««««

Заказ 1677/2

4 Тираж .522 Подписное

BHHHHH Росударствеййого комитета СССР-" по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35> Раушская наб., д. 4/5

«Ь юю

Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проеютная, 4

Как видно иэ таблицы, антибакте- риальная активность препаратов интерферона в отношении штамма 9 б выше антивирусного эффекта, находится в прямой зависимости от послед него и дает представление об антиви- 5 русной активности исследуемых объектов. . Пример 2. С помощью штамма

Ю б кожного стафилококка бактериалогическим методом серийных раэведе- 1ф ний проведено исследование 100 серий нативиого препарата человеЧеского лейкоцитарного интерферона, выпускаемого Пермским НИНВС, 20 сывороток крови доноров, 47 сывороток крови онкологических больных и 25 сывороток лабораторных животных (морские свинки и кролики ).

Получены следующие результаты.

При титрацйи нативного препарата человеческого лейкоцитарного интерфероиа выпуска ПНИИВС в 96Ъ сериях ант«ибактерйальный титр« превышал аитиВируснцй, s..òîì чйсле в 30% на

4,в 38% на 3., в 22% на 2 и в 6В

; на.1 разведение,в 4% случаев.актибактерйальный титр совпал с антивирусным..

В 20 донорских сыворотках интерферон выявлен в 100% по антибактериальному действию, а в 50% — по антивирусному.

Из 47 сывороток онкологических больных интерферон выявлен в 2 сыворотках только по антибактериальному действию.

В 25 сыворотках лабораторных животных интерферон выявлен в 22 случаях по антибактериальнаму действию.

1 (ак видно из примеров, штамм

Stsphylococcus epidermidis М б обла дает чувствительностью к препаратам интерферона разной видовой специфич,ности, что. позволяет использовать его в качестве тест-культуры для выявления уровня интерферона как в условиях производства препарата, так и в экспериментальных исследованиях.

Использование Штамма Stsphylococcus epidermidis 9 б по сравнению с прототипом упрощает и удешевляет методику выявления уровней интерферона;",отменяет необходимость проводить солоные вирусологические исследования и значительно экономит время.