Питательная среда для выращивания возбудителя туляремин
Иллюстрации
Показать всеРеферат
ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ .ШРАЩИВАНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУЛЯРЕМИИ, содержащая питательную основу, цистеин , глюкозу, стимулятор роста, сЪль соляной кислоты, агар-агар и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения выхода биомассы, она дополнительно содержит серно-кислый магний, серно-кислое железо, лимонно-кислый натрий и фосфорно-кислый калий двузамещенный , в качестве питательной основы она содержит сердечно-мозговой настой, панкреатический гидролизат казеина, кислотнь1й гидролизат казеина, в качестве стимулятора роста - дрожжевой экстракт, а в качестве соли соляной кислоты - хлористый калий при следующем количественном соотношении компонентов, г/л: Сердечно-мозговой 8,0-12,0 настой Панкреатический гидролизат казеина 8,0-12,0 Кислотный гидрализат 8,0-12,0 казеина О 8,0-12,0 Дрожжевой экстракт 9 0,045-0,055 Серно-кислый магний (Л 0,08-0,12 Серно-кислое железо 0,4-0,8 Цистеин X . Лимонно-кислый нат1 ,0-1,4 рий 1,8-2,1 Хлористый калий Фосфорно-кислый ка3 ,8-4,1 лий двузамещенный 14,0-16,0 Глюкоза 12,0-15,0 Агар-агар 00 Дистиллированная водаДо 1 л го 00 сг
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛ ИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН (Ю (И) ОГ1ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
3,8-4,1
14,0"16,0
12,0-15,0
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕВАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3360154/28" 13 (22 ) 16. 12. 81 (46) 30.03.84. Бюл; 9 12 (72) Б.Н.Мишанькин и Н.В.Павлович (71) Ростовский-на-Дону государственный научно-исследовательский противочумный институт (53.) 576.8.093.1 (088.8) (56) 1.Анциферов М.И. Желточноагаровая среда для выращивания . туляремийного микроба. -"Известия
Иркутского противочумного института
С збири и Дальнего Востока". т. Хи, 1954, с ° 77-83.
2.Емельянова О.С. Микробиология тупяремии. - В кн. "Туляремия". М., "Медицина", 1969, с. 51-95 (прото-тип 2. (54) (57) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ,ВЫРАЩИВАНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУЛЯРЕМИИ, содержащая питательную основу, цистеин, глюкозу, стимулятор роста, соль соляной кислоты, агар-агар и дистиллированную воду, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью повышЕния выхода биомассы, она дополнительно содержит серно-кислый магний, серно-кислое железо, лимонно-кислый
3(59 С 12 9 1/04// С 2 М 1 20 натрий и фосфорно-кислый калий двузамещенный, в качестве питательной основы она содержит сердечно-мозговой настой, панкреатический гидролизат казеина, кислотный гидролизат казеина, в качестве стимулятора роста — дрожжевой зкстракт, а в качестве соли соляной кислоты - хлористый калий при следующем количественном соотношении компонентов, г/л:
Сердечно-мозговой настой 8,0-12,0
Панкреатический гидролизат казеина 8,0-12,0
Кислотный гидрализат казеина 8,0" 12,0
Дрожжевой экстракт 8, 0-12, 0
Серно-кислый магний 0,045-0,055
Серно-кислое железо 0,08-0,12
Цистеин 0,4-0,8 . Лимонно-кислый натрий 1,0-1,4
Хлористый калий 1,8-2,1
Фосфорно-кислый калий двузамещенный
Глюкоз а
Агар-агар
Дистиллированная вода До 1 л
1082816
0,045-0,055
0,08-0,12
0,4-0,8
3,8-4,1
14,0-16,0
12,0-15 0
Изобретение относится к медицинс кой микробиологии и касается производства питательных сред для культивйрования возбудителя туляремии..
Известна питательная среда для выращивания возбудителя туляремии, содержащая мясной настой Хоттингера, иас1,агар"и желток в физиологическом растворе (1 3
Известна также питательная среда для выращивания возбудителя туляре мии, содержащая питательную основу, цистеин, глюкозу, стимулятор роста, соль соляной кислоты, агар-агар и дистиллированную воду t:2 3
Однако известные среды не обеспечивают высокого выхода биомассы.
Цель изобретения — повышение выхода биомассы.
Поставленная цель достигается тем, что питательная среда для выращивания возбудителя туляремии, со. держащая питательную основу, цистеин, глюкозу, стимулятор роста, соль соляной кислоты, агар-агар, и дистиллированную воду, дополнительно содержит серно-кислый магний, сернокислое железо, лимонно-кислый натрий и фосфорно-кислый калий двузамещенный, в качестве питательной ос. новы — сердечно-мозговой настой, панкреатический гидролиэат казеина, кислотный гидролизат казеина, в каестве стимулятора роста — дрожжевой экстракт, а в качестве соли соляной кислоты — хлористый калий при следующем количественном соотношении компонентов, г/л:
Сердечно-мозговой настой 8;0-12,0
Панкреатический гидролизат казеина 8, 0-12, О
Кислотный гидролизат казеина 8,0-12,0
Дрожжевой экстракт 8,0-12,0
Серно-кислый магний
Серно-кислое железо
Цистеин
Лимонно-кислый натрий 1,0-1,4
Хлористый калий 1,8"2,1
Фосфорно-кислый ка.— лий двуэамещенный
Глюкоза
Агар-агар
Дистиллированная вода До 1 Л
Пример 1. Питательную среду готовят следующим образом.
Для приготовления среды берут, r: корсаковский агар-агар 12; сердечномоз говой настой 8; дрожжевой экстракт 8; панкреатический гидроли55
Использование предлагаемой питательной среды повышает выход биомас сы туляремийного микроба. Кроме того, прозрачность среды позволяет проводить поколонийный анализ популяции. Отсутствие в составе среды крови дает возможность испольэовать ее для исследования биохимических свойств возбудителя туляремии. зат казеина 8; кислотный гидролизач ! каэеина 8 и растворяют в 900 мл дйстиллированной воды. Стерилизуя среду в автоклаве при 110 С 20 мин.
В остуженную до 45-500С среду добав- ляют стерильнорастворимые в 100 мл дистиллированной воды соли, г: NgS 04
0,045; FeSO< 0,08; цистеин 0,4; а3С,Н5О 1,Ю; КС 1,8; К2ИрО4 3,8 и глюкозу 14,0. Предварительно раствор солей стерилизуют на водяной бане при 100аС 1,5 мин ° Устанавлива1 ют реакцию 7,1-7,25.
Пример 2. В 900 мл дистилли. рованной воды растворяют агар-агар, 15 г: 14 0; сердечно-мозговой настой
10,0; дрожжевой экстракт 10,0, панкреатический гидрализат каэеина 10,0; клслотный гидролиэат казеина 10,0;
Добавляют 100 мл приготовленных ана7П логично примеру 1 солей, г
М g.S04 0,05; FeSO 0,1; цистеин 0,6;
Яа С6И„,О, 1,2; КС 2,0; К2ИГО 4,0, глюкоза 15, 0. Устанавливают реак.цию 7 1-7,25 .
25 Пример 3. Среду готовят аналогично примеру 1, в следующих соотношениях, г: агар-агар 15,0; сердечно-мозговой настой 12,0; дрожжевой экстракт 12,0; панкреатический ги .ролизат казеина 12,0 и кислотный гидролизат каэеина 12,0. Соли берут в следующих количественных соотношениях, г: >ISO О, 055; FeSO+ О, 12; цистеин
К НРО 4, f и глюкоза 16, О.
Пример 4. При посеве одного и того же материала на предлагаемую и известную питательные среды выход биомассы с 1 мл предлагаемой среды
40 в 1,5-8 раз превышает выход биомассы с известной (табл. 1).
При посеве туляремийного микроба на предлагаемую среду и известную среду Анциферова Г1) выход биомассы
45 с 1 мл новой среды превосходит выход с известной примерно в 8-10 раэ (табл ° 2).
После посева туляремийных клеток образуются колонии диаметром 1,52,0 мм, что свидетельствует о высокой скорости деления микробных клеток.
1082816 Таблица1
Выход биомассы туляремийного микроба с 1 мл среды, млрд
Предлагаемая среда
4 сут 3 сут 4 сут
10,0
10/15
10,0
60,0
10,0
1048
10,0
60,0
1898
56,0
8,4
8,4
60,0
Таблиц а 2
Предлагаемая среда
Среда Анциферова (1 ) 3 сут
6 сут
3 сут 6 сут
75,0
6,3
7,5
35,9
7,5
8,7
39,0
74,0
6,3
7,5
27,0
63,9
Составитель Г.Смирнова
Редактор Л.Пчелинская Техред Т.фанта Корректор Г. Решетник
Заказ 1677/24
Среда Емельяновой (2 3
3 сут
Выход биомассы туляремийного микроба с 1 мл среды, млрд
Тираж 522 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5
Филиал ППП "Патент", r.Óæãoðoä, ул. Проектная,4
81,0 76,0