Способ получения кристаллического террамицина солянокислого

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

№ 108305:

Класс 3017, 6

СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Г. В. Самсонов, С. Е. Бреслер, Г. Э. Елькин, А. М. Кан и Э. И. Элькина

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КРИСТАЛЛИЧЕСКОГО

ТЕРРАМИЦИНА СОЛЯНОКИСЛОГО

Заявлено 23 ноября 1956.г. за Ке 56!7!4 в Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров СCCP

Предметом изобретения является

CII0C0O Г10ЛУ 1СПИЯ TPPP«AIHÖHH« СОГ!5!НОКИСЛОГО, ОСНОВ«ННЫЙ Н« ТОЫ, ЧI O;1„1Я СОРОЦИИ ЯНТИОИОТИКЯ ИЗ культуряльной жидкости и последуннцей его очистки используются

Il0II» Î(70ÌÅiIHÛÅ СМОЛЫ.

11роцссс Выделения и очистки (.лага()ся из предварительной обРяооткн К) )II> I УP<1. IHIIOH ЖИДКОСТИ, (прони)1 1(ррямпци я на смоле (.Б(.;-3, Вытесllclllllt егO 1-нормяльным р«створом соляной кислоты в метаноле 11 получении кристалл II еского (ол111(ок)!Слого террамиЦ(1111) . (.п(и 0() 0(óiícc гвляется следую!

ПИ .1 !)OP«3031.

l. Предварительная обработка культуральной жидкости

По OK()III« III(II ферме)ггяционного проц(сся кх льтх рял ьнуlî жидкость з «г р уж 3 !От в сосуд, с наб?кенный мешалкой, 11 подкисляют 25 /о расгвором )цявслсвой кислоты до рН

",0 ",5. 1!0(ле довсдсtiия рН до

2,0 — 2,5 жидкость перемешивают в I с|ic!IIIO 30 х)и(1 II 3«Tcxl отфи.)7ьтро-! Ывянн от мицслия. Приготовлен))ый T«кпм (брязом нятивный pacTl3()p тср17ямиц!)н?! (()ктивностъю

110 ниже 1000 (д .11.1 (1 единица акт!! В!10(7 11 т(. 1) 17 3 м)1цп113 с Оответствз)ет l I)cc . Импчески (п(7010 терp3AI1IuHii«- -основания), поступает

II «слсдунпцую стадию очистки--сорбцию ня смоле СБС-З.

I l. Сорбция террамицина на смоле СБС-3 и вытеснение антибиотика

1-нормальным раствором соляной кислоты в метаноле

Через коз!Они :, з((гр?копн ю смолой Cb(:-3 В Н форме пропуска)от

II«TI1I3IIÛÉ РЗСТВОР TCPP«AI II!(IIII« СО скорость)0 1ОО»ил. езг ча(. Выходяпп(й ряствор собирают фр«кциями, o l l P (, 7(, 1 Я 11 В к Я ж до Й ф Р 1! к 1, и 11 K o I l цснтряцию террямицпна. Сорбцию продолж«107 до TOõ 11ор, пока актив))осзь выхопягцих фр()нций Ilå окажется равной 00 — 95l «KTIII)130стп исходпог0 I I ITIIBHOI Р«ствоРЯ.

По оконч«иии сорбцип определяют срсдшою концентрацию террямицина в проплцеинОAt через колошсу растворе и количество сорбировяпHoi 0 С110;,IOÉ «IITIIOttOTIIK«. С017бциОпняя (. IAIITocTb смолы зависит ÎT качеств« культуральпой жидкости.

При активности культуральной жидкости 500 едlт(.г — ДОЕ (дин«мпческая обменная емкость смолы) =

==250 О ед/г, при активности 1000—

1400 ед, 1(.г — ДОЕ =- 500 10 — — 600 10 ед/»ил н при яктшгности № 108305

Предмет изобретения

Стандартгнз. Подп. к печ. 30/Х-1957г. Объем 0,125 п. л. Тираж 200. 11ена 25 коп. г п hë ò ои типогиайии № 2 Мииистеиства кчльтчоы Ччвагнской АССР. Зак.5443

1800 — 2000 ед/мл — ДОЕ=700 10 — — 800 ° 10 ед/г.

Выходящий из первой колонки обедненный раствор поступает на следующие колонки, где террамицин сорбируется полностью. Элюция террамицина производится только с насыщением колонок террамицином.

По окончании процесса сорбции террамицина смолу промывают водой и обезвоживают метиловым спиртом.

Для вытеснения террамицина колонку с промытой и обезвоженной смолой промывают 1-нормальным раствором HCI В ыетиловом спирте.

Последний пропускают через смолу со скоростью 15 мл/см - час. Элюат собирают фракциями. Вытеснение ведут до тех пор, пока концентрация антибиотика в элюате нс снизится до 1000 †20 ед/мл. Фракции с активностью не ниже 2000 сдlмл объединяют, н и объединенном элюате определяют концентрацию террамицина. Концентрация террамицина в общем элюате достигает

10000 — 12000 ед/мл. Выход на этой стадии составляет 90 — 95% от количества террамицина, сорбированного на смоле.

По окончании процесса вытеснения смолу регенерируют и вновь используют для сорбции террамицина из культуральной жидкости.

Ш. Получение кристаллического солянокислого террамицина

Кислый мета нольный элюат, полученный на предыдущей стадии процесса, нейтрализуют с помощью анионообменной смолы

ЭДЭ-10. Нейтрализация проводится в статических условиях. Для этого в сосуд с элюатом добавляют рассчитанное количество смолы ЭДЭ-10 в ОН-форме. Элюат встряхивают с анионитом в течение 2 — 3 «ac., периодически проверяя рН по индикатору.

Нейтрализацию заканчивают, когда кислотность раствора достигнет

0,001 (pH=3).

По достижении нужного рН смолу отделяют и промывают метилоОт в. реда к тор Л. Г. Гол анде к и и вым спиртом на фильтре. Спирт от промывки присоединяют к нейтрализованному элюату. В объединенном растворе определяют концентраци|о тсррамицина. Лниоиит после нейтрализации регенерируют и вновь используют для нейтрализации элюата.

Нейтрализованный элюат упаривают под вакуумом при t=-20 — 25 и остаточном давлении 20 — -30мм Hg.

Элюат кснцентрируют до /а— /; первоначального объема. В полу«епном концентрате определяют аки нность террамицина; обычно она лежи1 в пределах 80 — 100 10 ед/мл.

Для получения кристаллического солянокислого террамицина к концентрату прибавляют соляную кислоту (d = 1,17) из расчета

l — 1,5 .ил на 1 г террамицина.

Г1ри этом раствор периодически перемешивают. Кристаллизационную массу выдерживают при комнатной температуре 3—

4 часа, после чего террамицин отфильтровывают на стеклянный фильтр № 4, промывают 1-нормальным раствором НС1 в метаноле, чиcThl ..I метанолом и сушат в вакуумсушильном шкафу при 50 — 60 и остаточном давлении 10 — 20 мм Hg, Высушенный террамицин взвешивают, растирают в ступке и отбирают пробы для определения активности, зольности и влажности.

Способ получения кристаллического террамицина солянокислого, отличающийся тем, что, с целью упрощения выделения и очистки, терр амицин сор бируется из культуральной жидкости катионообменной смолой СБС-3, вытесняется с последней раствором соляной кислоты в метиловом спирте и нейтрализуется на анионооб- менной смоле ЭДЭ-10; метанольный элюат упаривается и из концентрата при добавлении избытка соляной кислоты выделяется кристаллический солянокислый террамицин.