Способ определения функционального состояния стенки сосудов

Способ определения функционального состояния стенки сосудов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ СТЕНКИ СОСУДОВ путем исследования крови до и после их пережатия, отличаюцийс я тем, что с целью повышения специфичности способа, в крови, взятой из пальца, определяют АДФ-индукцированную агрегацию тромбоцитов, вычисляют отношение АДФ-индуцированной . агрегации до к после пережатия сосуда конечности и определяют функциональное состояние стенки сосудов по вычисленному соотношению.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ВСГС01ОЗЮ Ч

ЪМЫИ! дТЮа

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPbITHA (21) 3345653/28-13 (22) 30.10.81 (46) 07.04.84, Бюл. Р 13 (72) В.П. Балуда, К.М. Лакин, Т.И.Лукоянова, В.A. Макаров, М.В. Балуда, С.И.Чекалина, В.И.Пронин и Л.З.Вельшер (71} Московский ордена Трудового

Красного Знамени медицинский стоматологический институт .им; Н.A.Ñåìàøêî и Институт медицинской радиологии

ANH СССР (53 I 615.475(088.8 ) (56 ) 1. Serneri et а1, 5 International c o pgr e s s on Ehromho embol i sm, Во1оупе, 1978, 451.

„„Su„„1084010 А (50 А 61 В 10/00; С 01 М 33/48 (54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ СТЕНКИ СОСУДОВ путем исследования крови до и после их пережатия, о т л и ч а ю щ и й— с я тем, что с целью повышения специфичности способа, в крови, вэятой иэ пальца, определяют АДФ-индукцированную агрегацию тромбоцитов, вычисляют отношение АДФ-индуцированной агрегации до и после пережатия сосуда конечности и определяют функциональное состояние стенки сосудов по .вычисленному соотношению.

1084010

Изобретение относится к клинической и экспериментальной медицине и может быть использовано для оценки функционального сосудистого эндотелия У больных, а также в эксперименте у лабораторных животных.

Известен способ определения функ— ционального состояния сосудистой стенки беэ биопсии путем исследования крови до и после пережатия сосудов (13.

Однако исследование функционального состояния сосудистой стенки путем определения концентрации простациклина или его метаболитов недостаточно специфично, так как его источ- 15 ником могут быть не только клетки сосудистого эндотелия, но и клетки легких, желудка и др. Кроме того, используемые с этой целью антисыворотки недостаточно специфичны и дают 20 перекрестные реакции с другими простагландинами в силу близости их химического строения.

Цель изобретения — повышение специфичности способа. 25

Цель достигается тем, что согласно способу определения функционального состояния стенки сосудов путем ,исследования крови до и после их пережатия, в крови, взятой иэ пальца, 30 определяют АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов, вычисляют отношения АДФ-индукцированной агрегации до и после пережатия сосудов конечности и определяют функциональное 35 состояние стенки сосудов по вычисленному соотношению.

Способ осуществляют следующим об" разом. в. 40

Две пробирки устанавливают в штатив. В пробирки вводят по 100 мл (мкл 3,14%-ного раствора лимоннокислого натрия . Мякоть пальца руки большого протирают спиртом. После вы-45 сыхания спирта обычным способом де3 лают прокол кожы глубиной 3-4 мм.

Первую. каплю крови осторожно удаляют.

В силиконированную микропипетку, содержащую 20 мкл 3,8%-ного раствора лимоннокислого натрия, набирают

180 мкл свободно вытекающей крови.

Стабилизированную кровь выдувают в первую пробирку. Кровь в пробирку осторожно перемешивают в течение Зб40 с. Для определения исходного количества тромбоцитов иэ первой пробирки в смеситель для красной крови до отме ки 0,5 набирают кровь и до отметки 101 — разводящую жидкость для подсчета тромбоцитов. Кровь в 60 смесителе перемешивают с разводящей жидкостью и до подсчета тромбоцитов смесителя хранят при комнатной температуре 40-60 мин (время, необходимое для лизиса эритроцитов . 65

На руку накладывают манжету манометра для измерения кровяного давления, определяют систолическое давление, повышают давление в манжетке на 10 мм рт.ст. Через 3 мин делают прокол кожи и набирают кровь в микропипетку (20 мкл). Кровь переносят во вторую пробирку и забирают пробу в смеситель для подсчета тромбоцитов.

Первую и вторую пробирки устанавливают в штата к, расположенный в центре магнитной мешалки, опускают по металлическому стержню, вводят по 30 мкл раствора АДФ (конечная концентрация в крови 0,01 мг/мл ) и включают магнитную мешалку. Через 5 мин мешалку выключают, берут кровь для подсчета тромбоцитов.

Во всех пробах подсчитывают количество тромбоцитов.

О степени индуцированной агрегации судят по разнице в содержании тромбоцитов в крови до введения АДФ (исходное количество и через 5 мин после введения АДФ. Индуцированную агрегацию рассчитывают % по формуле

A-8 м 100=агрегация, где A — исходное количество тромбоцитов;

 — количество тромбоцитов в крови через 5 мин после добавления АДФ.

У здоровых людей до венозного застоя индуцированная агрегация тромбоцитов равна 60-70%.

В крови, взятой после венозного застоя, при нормальной антиагрегационной активности стенки сосудов агрегация тромбоцитов ниже, чем в крови до застоя, что обусловлено поступлением в кровь простациклина,, стимулированным венозным застоем.

При снижении антиагрегационных свойств стенки сосудов агрегация тромбоцитов в крови после венозного застоя по своей величине приближается к агрегации тромбоцитов в крови до застоя.

По отношению степени агрегации тромбоцитов до и после венозного застоя судят об антиагрегационных свойствах стенки сосудов.

При атеросклерозе, диабете, бжоге, постмастактомическом отеке и других . заболеваниях и состояниях организма функциональная активность стенки сосудов снижена, поэтому разница в степени агрегации тромбоцитов до и после веноэного застоя меньше, чем у здоровых.

Пример 1. Здоровый мужчина, 28 лет. В микропипетку, содержащую

20 мкл 3,8%-ного лимоннокислого натрия,набирали 180 мкл свободно вытекающей крови. С помощью сфигмомано1084010 метра определили артериальное давление — 110 мм. Подняли давление в манжетке до 120 мм. Через 3 мин, не снимая манжетки, из прокола пальца взяли 180 мкл крови в микропипетку, содержащую 20 мкл 3,143-ного лимонно- 5 кислого натрия. Пробы крови поместили в силконированные пробирки. Перемешивают магнитной мешалкой, подсчитали число тромбоцитов в каждой пробирке, после чего в пробирки добав- 1О ляли АДФ в конечной концентрации 0,01 мг/мл. Включили-магнитную мешалку. Через 5 мин подсчитали число тромбоцитов. После этого высчитали

АДФ-индуцированную агрегацию, а так- 5 же антиагрегационную активность сосудистой стенки. Получены следующие результаты:

До пережа- После пе 20 тия сосу- режатия да сосуда

АДФ-индуцированная агрегация,Ъ

25 25

Антиагрегационная активность стенки сосудов, индекс

2,3

Следовательно предложенный способ выявил у здорового человека нормальную антиагрегационную активность сосудисной стенки. до пережа- После пе- 60 тия сосуда режатия сосуда,АДФ-индуцированная агрегация тромбоцитов,Ъ

30 65

Пример 2. Здоровая женщина, 34 года. Систолическое давление .105 мм рт.ст. В микропипетку, содержащую 20 мкл 3,14%-ного лимоннокислого натрия, набирали 180 мкл свободно вытекающей крови. С помощью сфигмоманометра определяли артериальное давление, затем подняли давление в манжетке на 10 мм. Через 3 мин, не снимая манжетки, взяли из прокола фаланги пальца 180 мкл крови в микро-45 пипетку, содержащую 20 мкл 3,14%-но,го лимоннокислого натрия. Пробы поместили в силиконированные пробирки, перемешали. Подсчитали число тромбоцитов в каждой пробирке. После этого 50 в пробирки добавили АДФ в конечной концентрации 0,01 мг/мл. Включили ,магнитную мешалку. Через 5 мин подсчитали число тромбоцитов. После этого вычислили АДФ-индуцированную агре-55 гацию, а также антиагрегационную активность сосудистой стенки. Получены следующие результаты:

Антиагрегационная активность сосудистой стенки, индекс

2,4

До пережатия сосуда

После пережатия сосуда

АДФ-индуцированная агрегация,Ъ

Антиагрегационная активность стенки сосудов, индекс

50

1,6

Таким образом, предложенный способ выявил снижение антиагрегационной активности стенки сосудов больного.

Пример 4. Больной, 58 лет, мужчина. Диагноз: атеросклероз, ишемическая болезнь сердца. В микропипетку, содержащую 20 мкл 3,14%-ного раствора лимоннокислого натрия, набирали 180 мкл свободно вытекающей крови. С помощью сфигмоманометра определили артериальное давление

140 мм рт.ст. Подняли давление в манжетке на 10 мм.Через 4 мин, не. снимая манжетки, иэ прокола пальца взяли 280 мл крови в микропипетку, также содержащую 20 мкл 3,148-ного лимоннокислого натрия. Пробы крови поместили в силиконированные пробирки. Перемешали магнитной мешалкой.

Подсчитали число тромбоцитов в каждой пробирке. После чего в пробирку добавляют АДФ в конечной концентрации 0,01 мг/мл. Включили магнитную мешалку. Через 5 мин подсчитали число тромбоцитов. После этого насчитали АДФ-индуцированную агрегацию, а

Пример 3. Больной атеросклерозом, 52 года. В микропипетку, содержащую 20 мкл 3,14%-ного раствора лимоннакислого натрия, набирали

180 мкл свободно вытекающей крови.

С помощью сфигмоманометра определили артериальное давление — 140 мм рт.ст. подняли давление в манжетке на 10 мм.

Через 3 мин, не снимая манжетки, из прокола пальца взяли 180 мкл крови в микропипетку, также содержащую

20 мкл, 3,14%-ного лимоннокислого натрия. Пробы крови поместили в силиконированные пробирки. Перемешали магнитной мешалкой. Подсчитали количестно тромбоцитов в каждой пробирке. После чего в пробирки- добавляли

АДФ в конечной концентрации

0,01 мк/мл . Включили магнитную мешалку. Через 5 мин подсчитали число тромбоцитов. После этого высчитали

АДФ-индуцированную агрегацию, а также антиагрегационную активность сосудистой стенки. Получены следующие результаты:

1084010

До не- После петия сосуда режатия сосуда

Здоровая конечность

60

До пережа- После петия сосуда режатия сосуда

ЛДФ-индуцированная агрегация, В

Антиагрегационная активность стенки сосуца, индекс

80

Составитель З.Вальковская

Редактор В.Ковтун Техред Т.Дубинчак КоРРектоР A.Òÿñêo

Заказ 1853/5 Тираж 688 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная, 4 также антиагрегационную активность сосудистой стенки. Получены следующие результаты:

До пережа- После перетия сосуда жатия сосуда

АДФ-индуцированная агрегация тромбоцитов, В 84

Антиагрегаци- о онная активность стенки сосудов, индекс 1,4

Таким образом, обнаружено сниже- 15 ние антиагрегационной активности сосудистой стенки у больного с ишемической болезнью сердца.

Пример 5. Больная, 51 год.

Диагноз: отек левой верхней конечнос-ъО ти 1у-ой степени, состояние после комбинированного лечения рака молочной железы. Операция была произведена в 1977 r. В микропипетку, содержащую 20 мкл 3,14%-ного раствора лимон- 5 нокислого натрия из здоровой и отечной конечности набирали по 180 мкл свободно вытекающей крови. С помощью сфигмоманометра определяли артериальное давление на здоровой руке

160 мм рт.ст. и на отечной конечности — 130 мм рт.ст. В обеих конечностях подняли давление на 10 мм. Через

3 мин, не снимая манжетки, из прокола пальца взяли 180 мкл крови в микропипетку, содержащую 20 мкл 3,14Ъного раствора цитрата натрия. Пробы крови поместили в силиконированные пробирки. Подсчитали число тромбоцитов в каждой пробирке. После этого в пробирки добавили АДФ в конечной 40 концентрации 0,01 мг/мл. Включили магнитную мешалку. Через 5 мин подсчитали число тромбоцитов. Через

20 мин подсчет повторили. Вычислили спонтанную и индуцированную агрега- 45 цию, а также антиагрегационную активность сосудистой стенки. Получены следующие результаты:

АДФ-индуцированная агрегация, В 73

Антиагрегационная активность стенки сосуда, индекс 2,4

Конечность с постмастэктомическим отеком

Таким образом, предложенный способ позволил установить и количественно характеризовать степень нарушения функционального состояния сосудистой стенки конечности с постастэктомическим отеком. Предложенный способ, следовательно, может явиться индикатором степени реабилитации микроциркуляторных процессов в отечной конечности после операции.

Приведенные. примеры свидетельствуют о том, что предложенный способ может количественно оценить .функциональное состояние стенки сосудов у различного контингента больных на малом объеме крови — 0,36 мл, вместо

4,0 мл традиционным методом. Подобное уменьшение расхода крови на одно определение открывает воэможность для многократного использования способа в процессе лечения и внедрения способа в терапевтическую, хирургическую, онкологическую и педиатрическую практику.