Способ получения монокультуры водорослей (его варианты)

Способ получения монокультуры водорослей (его варианты)

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

1. Способ получения монокультуры водорослей, предусматривающий отделение в смешанной культуре медленнорастущего вида от быстрорастущего путем выращивания в условиях, благоприятных для выживания ползЛаемых водорослей, отличающий - J с я тем, что, с целью ускорения и упрощения процесса, при отделении медленнорастущего вида в качестве последнего используют культуру Porphyridium cruentum, а в качестве быстрорастущего вида - культуру Chlamydomonas sp. или Phacodactylum tricornutum, при этом при отделении культуры Porphyridium cruentum от культуры Chlamydoraonas sp. выращивание осуществляют в темноте при 20-24 0 в течение 60 сут, а при отделении культуры Porphyridium cruentum от культуры Phacodactulum tricornutum выращивание ведут в о 5S тех же условиях или при 5-7 С в течение 30 сут. (Л 2. Способ получения монокультуры водорослей, предусматривающий отделение в.смешанной культуре медленнорастущего вида от быстрорас тущего путем выращивания в условиях, благоприятных для выживания получаемых водорослей, отличаюCD 00 4;; .. щ-и и с я тем, что, с целью уско- „рения процесса, при отделении медленнорастущего вида от быстрорастущего ND В качестве медленнорастущего вида исI;D пользуют культуру Pfatymonas viridis, Од а в качестве быстрорастущего вида культуру Phacodactytum tricornutum, при этом выращивание ведут в темноте при 20-24°С в течение 60 сут или при -5-7 °С в течение 30 .

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН (19) (11) 1

3(51) С 12 N 1/12; С 12 R 1/89

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ;;;

К ABTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ / 1

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3431218/28-13 (22) 23.03.82 .(46) 07.04.84. Бюл. ¹ 13 (72) В.А.Силкин и Н.А.Айздайчер (71) Тихоокеанский. научно-исследовательский институт рыбного хозяйства и океанологии (53) 663.18(088.8) (56) 1. Ланская Л.А., Экологическая физиология морских планктонных водорослей. К., "Наукова думка", 1971;

2. Цеглин Л.Н., Семененко Б.Е., Поляков А.К. Теоретическое обоснование принципа автоматического конкурентного отбора продуктивных форм одноклеточных водорослей на, основе математического моделирования динамики роста многокомпонентной популяции и в проточном режиме.

-"Биофизика", 1967, т.)(И, ¹ 4, с ° 704-714. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОНОКУЛЬТУРЫ

ВОДОРОСЛЕЙ (ЕГО ВАРИАНТЫ). (57) 1. Способ получения монокуль" туры водорослей, предусматривающий отделение в смешанной культуре медленнорастущего вида от быстрорастущего путем выращивания в условиях, благоприятных для выживания пол)%аемых водорослей, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью ускорения и упрощения процесса, при отделении медленнорастущего вида в качестве последнего используют культуру

Porphyridium cruentum, а в качестве быстрорастущего вида — культуру

Ch1amydomonas sp. или Phacodactylum

tricornutum, при этом при отделении культуры Porphyridium cruentum от культуры Chfamydomonas sp. выращивание осуществляют в темноте при

20-24 С в течение 60 сут, а при

0 отделении культуры Porphyridium

cruentum от культуры PhacodactuIum

tricornutum выращивание ведут в тех же условиях или при 5-7 C в о течение 30 сут.

2. Способ получения монокультуры водорослей, предусматривающий отделение в смешанной культуре медленнорастущего вида от быстрорас, тущего путем выращивания в условиях, благоприятных для выживания получаемых водорослей, о т л и ч а ю.. щ- и и с я тем, что, с целью уско- .

:рения процесса, при отделении медленнораступ(его вида. от быстрорастущего в качестве медленнорастущего вида ис-: пользуют культуру Pfatymonas viridis, а в качестве быстрорастущего вида— культуру Phacodacty1um tricornutum, .при этом выращивание ведут в темноте при 20-24 С в течение 60 сут или при

-5-7 С в течение 30 сут.

1084296

Цель изобретения — ускорение и упрощение процесса.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения монокультуры, предусматривающему отделение в, смешанной культуре медленнорастущего вида от быстрорастуИзобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к способам выращивания водорослей.

Известен способ получения монокультуры водорослей, заключающийся в том, что из смешанной культуры водорослей с помощью микропипетки отбирают клетки выделяемой в монокультуру водоросли,. а затем высевают 10 на питательную среду н выращивают длительное время до плотной культуры (11 .

Недостатком этого способа является длительность процесса, большие 15 трудовые затраты требование высокой квалификации исполнителя. Кроме того, способ не гарантирует чистоты получаемой культуры, особенно при работе с мелкими формами. 20

Наиболее близким к предлагаемому является способ получения монокультуры водорослей, предусматривающий отделение из смешанной культуры медленнорастущего вида от быстрорасту- 25 щего путем выращивания в условиях, благоприятных для выживания олучаемых водорослей. Сущность способа заключается в следующем: с целью выделения наиболее активиорастущего З0 вида получают интенсивную непрерывную смешанную культуру. При турбидостатном непрерывном выращивании смешанной культуры водорослей и культиваторе остается наиболее активнорас- 35 тущий вид, менее активные вымываются (2) .

Недостатком известного способа является то, что невозможно получить чистую культуру менее активно- 40 растущего вида, способ требует орга,низации интенсивной турбидостатной культуры, на что необходимо длительное время 6-12 мес и высокая квалификация исполнителя. Кроме того, 45 способ не гарантирует чистоты культуры вследствие возможного прикрепления сопутствующего вида к стенкам культиватора„ а также в случае определенных симбиологических взаимо-50 отношений видов в культуре. щего путем выращивания в условиях, благоприятных для выживания получаемых водорослей, при отделении медленнорастущего вида от быстрорастущего в качестве медленнорастущего вида используют культуру Porphyridium

cruentum, а в качестве быстрорастущего вида — культуру Chlamydomonas

sp. или Phacodactylum tricornutum, при этом при отделении культуры

Porphyridium cruentum от культуры

Chfamydomonas sp. выращивание осуществляют в темноте при 20-24 С в течение 60 сут, а при отделении культуры Porphyridium cruentum от культуры Phacodactylum tricornutum выращивание ведут в тех же условиях или при -5-7 С в течение ЗО сут. о

Согласно второму варианту при отделении медленнорастущего вида от быстрорастущего используют в качестве медленнорастущего вида культуру Pfatymonas vi;ridis, а в качестве быстрорастущего вида культуру

Phacodactyfum tricornutum, при этом выращивание ведут в темноте при температуре 20-24 С в течение 60 сут или при -S-7 С в течение 30 сут.

Сущность способа заключается в следующем.

При культивировании водорослей в промышленных нестерильных условиях появляются сопутствующие виды, как правило, наиболее активнорастущие и вытесняющие культивируемый вид.

При культивировании морской одноклеточной водоросли порфиридиум появляются сопутствующие зеленые или диатомовые водоросли, которые вытесняют порфиридиум. Возникает необходимость очистки полученной культуры от сопутствующего вида.

Смешанную культуру водорослей помещают в термостат и инкубируют при определенной температуре. В процессе инкубирования отбирают пробы для контроля за жизнеспособностью водорослей. Пробы высевают на питательную среду и выращивают в периодической культуре. Контроль за чистотой культуры ведут под микроскопом. Инкубирование ведут до тех пор, пока выращенная культура водорослей будет представлена одним видом.

Пример 1. Смешанную культуру одноклеточной красной водоросли

Porphyridium cruentum и зеленой

1084296 4 микроскопом. Через 60 дней получена чистая культура водоросли Platymonas

viridis

Пример 5. Смешанную культуру одноклеточной зеленой водоросли Pfatymonas viridis и диатомовой водоросли Phacodactylum гicornutum инкубировали в темноте при — 5ОС. Каждые две недели отбирали пробы и высевали на свежую питательную среду. Контроль осуществ ляли под микроскопом. Через 30 дней получена чистая культура водоросли

Pfatymonas viridis.

15 Пример 6. Смешанную культуру одноклеточной красной водоросли

Porphyridium cruentum и зеленой водоросли Cklamydomonas sp. инкубировали в темноте при +10 С. Каждые

20 две недели отбйрали пробы и высевали на свежую питательную среду. Контроль культуры осуществляли под микроскопом. Через 150 сут инкубирования разделения водорослей не

25 произошло.

Пример 7. Смешанную культуру одноклеточной красной водоросли

Porphyridium cruentum и диатомовой водоросли Pkaeodactylum tricornutum инкубировали в темноте при + 10 С.

Каждые две недели отбирали пробы и высевали на свежую питательную

Я среду. Контроль культуры осуществляли под микроскопом. Через 60 сут инкубирования разделения не произошло.

Пример 8. Смешанную культуру одноклеточной зеленой водоросли

PEatymonas viridis и диатомовой водоросли Phacodactylum tricornutum

412 монкубировали в темноте при + 10 С.

Каждые две недели отбирали пробы и высевали на свежую питетельную среду.

Контроль. осуществляли под микроскопом.

Через 60 сут-инкубирования разделения не произошло.,водоросли Cklamydomonas sp. инкубировали в темноте при 22-24ОС. Каждые две недели отбирались пробы и высеФ вались на свежую питательную среду.

Емкость со смешанной культурой порфиридиума закрывали чехлом из плотной бумаги и хранили при — 5,8

0 и 22 С. Контроль проводили путем взятия проб из емкостей и высева на свежую питательную среду и культивирования при 24-26ОС на люминостате в течение 7-10 дней, т.е. при тех же условиях, при которых сопутствующий вид доминировал и вытеснял культуру порфиридиума.. Растущая культура ежедневно просматривалась под микроскопом при 300-кратном увеличении.

Культура считалась чистой, если после трехкратных пересевов в ней оставались только клетки порфиридиума.

Через 609 сут получена монокультура водоросли Porphyridium cruentum.

Контроль культуры осуществлялся под микроскопом.

Пример 2. Смешанную культуру одноклеточной красной водоросли

Porphyridium cruentum и диатомовой водоросли Phacodactygum tricornutum инкубировали в темноте при 22 2 С.

Каждые две недели отбирали пробы и высевали на свежую питательную среду.

Контроль культуры осуществляли под микроскопом. Через 60 сут инкубирования получена чистая культура

Porphyridium cruentum.

Пример 3 ° Смешанную культуру одноклеточной красной водоросли

Porphyridium cruentum и диатомовой

Phacodactyium tricornutum инкубировали в темноте при -5ОС. Каждые две недели отбирали пробы и высевали на свежую питательную среду. Контроль культуры осуществляли под микроскопом. Через 30 сут получена чистая культура Porphyridium cruentum.

П р .и м е р 4. Смешанную культуру одноклеточной зеленой водоросли

Platymonas viridis и диатомовой водоросли Phacodañtóluø tricornutum инкубировали в темноте при 22ОС.

Каждые две недели отбирали пробы и высевали на свежую питательную . среду. Контроль осуществляли под

Таким образом, предлагаемый способ позволяет ускорить процесс получения монокультуры водорослей до

1-2 мес по сравнению с 6- 2 мес по известному способу, а также упростить способ за счет исключения использования интенсивной турбидостатной культуры.

ППППШ1 Заказ 1926/19 Тиуаж 922 ПоПлиоиоа

Филиал ППП "Патаит ° г.ужгород, ул.Проактиаа, 4