Способ получения биомассы базидиомицетов

Патент 1090261

Авторы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

- 1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ БАЗВДИОМИЦЕТОВ путем культивирования мицелия в питательной среде,в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевогопродукта, мицелий базидиомицетов, принадлежащих к виду Coridlus, предварительно гомогенизируют до получения однородного шпамма и полученный гомогенат вносят в питательную среду в количестве 0,01-0,2 г/л питательной среды, содержащей в качестве источника углерода декстрозу. , . 2.Способ по П.1, отличающийся тем, что мицелии гомогенизируют до образования комков размером 50-1000 мкм. 3.Способ по п.2, отличают щ и и с я тем, что, гомогенат вносят, (Л в питательную среду в количестве с 0,05-0,15 г/л среды.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

PECFlYSJlHH (19) (10 I i I J1JLI I I2

С 12 R 1/645

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Pp_#_l. л .

И ПАТЕНТ У

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИ1 ЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОЧНРЫТИЙ (21) 25,1 3900/28-13 (22) 24.08.77 (31) 51-100157 (32) 24.08.76 (33) Япония (46) 30.04.84. Бюл. В 16 (72) Тикао Есикуми, Тосихико Вада, Хиромицу Макита и Кинзабуро Сузуки (Япония) .. (71).Куреха Кагаку Когио Кабусики

Кайся (Япония) (53) Бг76.8.093.33(088.8) (56) 1. Заявка Японски В 50-29034, кл. 36(2) В 221, опублик. 1975 (прототип) . (54) (57) 1. CrrOCOS nOnnZHm Б 10 1АССЫ БАЗицИОМИЦЕТОВ путем культивирования мицелия в питательной среде.в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях, о т л и . ч а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, мицелий базидиомицетов, принадлежащих к виду Сог о1из, предварительно гомогенизируют до получения однородного шпамма и полученный гомогенат вносят в питательную среду в количестве

0,01-0,2 г/л питательной среды, содержащей в качестве источника угле Р рода декстрозу.

2. Способ по п.1, о т л и ч а юЭ шийся тем, что мицелйи гомогенизируют до образования комков размером 50-1000 мкм.

3. Способ по п.2, о т л и ч а ю вЂ”, шийся тем, что, гомогенат вносят . в питательную среду в количестве

0,05-0, 15 г/л среды.

1090261

Табл

1 0

0,011

О, 011

2 2

Изобретение относится к микробиологической промышпенности и касается культивирования бавидиомицетов, которые могут быть использованы в качестве основного материала для медицин- 5 ских препаратов.

Известен способ получения биомассы базидиомицетов, в частности Schizophyffum или Zenntinus путем культи10 вирования мицелия в питательной среде в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях f1).

Однако известный способ не обеспечивает высокого выхоДа целевого.про15 дукта.

Цель изобретения вЂ” повышение выхода целевого продукта.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения биомассы базидиомицетов путем культивирования мицелия в питательной среде в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях, мицелий базидиомицетов, принадлежащих., 25 к виду CorxoFus предварительно гомо- генизируют до получения однородного шпамма и полученный гомогенат вносят в питательную среду в количестве 0,01-0,2 г/л питательной среды, содержащей в качестве источника углерода декстрозу.

Кроме того, мицелий гомогенизируют до образования комков размером 50вЂ”

1000 мкм.

Гомогенат вносят в питательную 35 среду.в количестве 0,05-0, 15 г/л.

Способ осуществляют следующим образом.

Посевная культура состоит из нитевидного мицелия (зернистый или 40 в форме комков {гранул}, образуя негомогенную смесь).

Для гомогенизации посевной куль-: туры гранулы разделяют. Получают шпам, в котором мицелий диспергирован равномерно. Иицелий гомогенизируют до тех пор, пока размер комков находится в пределах 50 вЂ” 1000 мк.

Гомогенизацию посевной культуры проводят с помощью известных средств, например гомогенизатора, гомосмесителя, дисперсионного смесителя, соковыжималки или винтового смесителя.

Время, необходимое для образования шпамма посевной культуры с помощью гомогенизирующнх средств, составляет от 30 с до 10 мин. Если для измельчения комков мицелия до 2-3 ,:или 10-50 мк приложены черезмерные

;усилия, сказывается неблагоприятный эффект на развитие грибков при последующей культивации.

Количество мицелия, применяемого для эаряжения среды, для культивирования обычно составляет 0,01-0,2 г/л предпочтительно О, 05-0, 15 г/л среды.

Среда, применяемая для культивирования базидиомицетов, является водной средой и к ней не предъявляют никаких специальных требований, условия культивации в отношении температуры, скорость аэрации и скорость перемешивания обычные.

Пример 1. 120 л среды (pH

6,5) следующего состава, г/л воды:, Декстроза 50

Дрожжевой экстракт 7,5 загружают в бродильный чан емкостью

200 л и подвергают стерилизацию под давлением при 120 С по обычному методу.

Затем мицелий CorioXus ver sicofor (Fr) Quei,культивированный в сосуде емкостью 30 л, гомогенизируют в гомосмесителе до тех пор, пока гранулы станут неразличимыми невоору" женным глазом. Гомогенизированным мицелием заражают.среду в бродильном чане емкостью 200 л и затем культивируют в течение 150 и при 25 С, скорос. ти аэрирования 0,5 об ./об . в мин, и скорости перемешивания 250 об/мин.

Иицелий отделяют, промывают водой, этиловым спиртом и высушивают при

80 С.

Полученные результаты показаны .в табл. 1.

Комки мицелия присут- 5,5 ствовали

Комки мицелия присут - - 10,9 ствовали незначительно

1090261

Продолжение табл. 1

-3 7

Комки ми исчезли

11,6

О, 100

Комки мицелия +.

4 О

Выход мицелия, г/л среды

КоличестОпыт Время гомо.генизации посевной во мицелия, г/л среды культуры, мин

О, 005

0,015

5,9

11,9

0,05

12,8

0,10

13,5

О, 15

13,3

0,20

13,2

0,30

12,0, 0,50 11,9

Таким образом, при одинаковом выходе мицелия. для осуществления предлагаемого способа необходимо всего

1/10 ч. посевной культуры, используемой по известному способу. Культивацию осуществляют с применением посев. ной культуры, гомогенизированной согласно предлагаемому способу и с

20 негомогенизированной культурой. Сравнивают время, требуемое для получения выхода мицелия 11 г/л.

Посевную культуру, аналогичную примеру 1, гомогенизируют по примеру

1. Зараженную среду подвергают культивации. Для сравнения посевную культуру не гомогенизируют. Результаты показали, что в случае применения гомогенизированной посевной культуры время, требуемое для достижения вы30 хода мицелия 11 г/л значительно короче при меньшем количестве посевной куль туры.

Пример 3. В ферментер емкостью 200 л помещают 120 л культу-. З5 ральной среды (рН 6, 5) > имеющей сле-. дующий состав, г/л воды:

Декстроза 50

Дрожжевой экстракт 7,5

Среду стерилизуют обычным образом 40 о под давлением при 120 С. Затем мице.лий Coriolus versicolor {Fr) Яие1, предварительно выращенный в банкообразных ферментерах емкостью 30 л, гомогенизируют гомогенизатором-смеси-45 телем до тех пор, пока гранулы мицелия станут неразличимыми для невооруженного глаза. Такой гомогенизи- рованный мицелий просеивают в ферментер емкостью 200 л при соответствующих количествах инокулята выращиЭ вают в течение 150 ч при 25 С,скорости аэрации 60 л/мин и скорости перемешивания 250 об/мин. Разросшийся мицелий отделяют от полученной культу- 55 ры, промывают водой, этанолом и ацетоном в указанном порядке, а затем сушат при 80 С.

Результаты приведены в табл. 2.

Таблица 2

Сравнительные данные по выходу мицелия в зависимости от концентрации посевного материала

П р и м е ч а н и е. Комки мицелия исчезали во всех опытах.

П р и и е р 4. Мицелий базидиомицетов гомогенизируют в течение 7 мин до тех пор, пока размер комков мицелия не достигнет 100-1000 мкм, и инокулируют в питательную среду.

Культивируют при 25 С, скорости . о аэрации 0,5 об./об. питательной среды в мин и скорости перемешивания

250 об/мин в течение 150 ч ° Выросший мицелий выделяют из среды, промывают водой, этиловым спиртом и ацетоном и затем сушат при 80 С ° о

Результаты представлены в табл. 3.

109026 1

Таблица 3

Сравнительные данные по выходу биомассы при использовании гомогенизированного и негомогенизированного мицелия Разновидность грибков

Депонирование

Выход мицелия.через

150 ч культивации, г/л культурной среды

Предлагае- Сравнительмый способ ный пример

Corio2us versicolor(FrgQueI.

РЕКИ-Р

5,4

12,8

24 12

0,031

О, 030

5 6

2413

12,7

То же

5,3

12,8

О, 031

2414

5,3

2415

12,5

12,6

5,5

2416

5,2

12,8

241 7

5,5

12,4

2418

2419

12,8

5,3

5,0

2420

5,6

12,6

2421

Coriokus чегз1со1ог(Рг)Яие2.

FERN-Р

5,4

2422

0,031

12,7

То же

5,6

5,5

5,4

12,8

2423

0, 031

О, 031

О, 030

12,7

2424

12,6

2425

Corio2us versicolor(Fr) Que J., РЕКИ-P

О, 031

5,2

12,8

2426

Car ioйиз bi f ormi s (KXotz) Pat.

NiId strain

not-deposited 0,030

5,3

4,7

Согхойиз conchif ed (Schv.) Pat

То же

0,030

О, 031

Coriofus versicolor(Fr)Quef.

Corio2us pubescens(Fr)@ ей.

4 5

4,6

Coriolus hirsutus(Fr)Цоем.

PERM-P No

12,8. 2711 0,031

5,2

988 0,030

11, 9

4,7

„2712 О 030 12 4 5 О

Таким образом, использование биомассы базидиомицетов вида Corioius, гомогенизированного мицелия в .Каче- что, в свою очередь, повышает выход стве посевного материала и декстрозы биологически активных препара-. в качестве источника углерода позво- 5> тов на основе данных кульяет значительно увеличить вьщод . тур.

3HHHQH Заказ 2962/56 Типаж 522 Доущсиое

Филиал. ПОП Патеат, г.Ужгород, ул.Проектйая, 4

Coriofus consors(Berk)Imaz.

FERN-Р No

Coriofus pargamenus(Fr)Pat.

РЕВИ-Р No.

Норма инокулирования, r/ë. 0,031

О, 031

О, 030

О, 031

О, 030

12,6 ,11, 7

11 4 I0,8