Способ получения биомассы базидиомицетов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

- 1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ БАЗВДИОМИЦЕТОВ путем культивирования мицелия в питательной среде,в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевогопродукта, мицелий базидиомицетов, принадлежащих к виду Coridlus, предварительно гомогенизируют до получения однородного шпамма и полученный гомогенат вносят в питательную среду в количестве 0,01-0,2 г/л питательной среды, содержащей в качестве источника углерода декстрозу. , . 2.Способ по П.1, отличающийся тем, что мицелии гомогенизируют до образования комков размером 50-1000 мкм. 3.Способ по п.2, отличают щ и и с я тем, что, гомогенат вносят, (Л в питательную среду в количестве с 0,05-0,15 г/л среды.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

PECFlYSJlHH (19) (10 I i I J1JLI I I2

С 12 R 1/645

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Pp_#_l. л .

И ПАТЕНТ У

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИ1 ЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОЧНРЫТИЙ (21) 25,1 3900/28-13 (22) 24.08.77 (31) 51-100157 (32) 24.08.76 (33) Япония (46) 30.04.84. Бюл. В 16 (72) Тикао Есикуми, Тосихико Вада, Хиромицу Макита и Кинзабуро Сузуки (Япония) .. (71).Куреха Кагаку Когио Кабусики

Кайся (Япония) (53) Бг76.8.093.33(088.8) (56) 1. Заявка Японски В 50-29034, кл. 36(2) В 221, опублик. 1975 (прототип) . (54) (57) 1. CrrOCOS nOnnZHm Б 10 1АССЫ БАЗицИОМИЦЕТОВ путем культивирования мицелия в питательной среде.в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях, о т л и . ч а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, мицелий базидиомицетов, принадлежащих к виду Сог о1из, предварительно гомогенизируют до получения однородного шпамма и полученный гомогенат вносят в питательную среду в количестве

0,01-0,2 г/л питательной среды, содержащей в качестве источника угле Р рода декстрозу.

2. Способ по п.1, о т л и ч а юЭ шийся тем, что мицелйи гомогенизируют до образования комков размером 50-1000 мкм.

3. Способ по п.2, о т л и ч а ю —, шийся тем, что, гомогенат вносят . в питательную среду в количестве

0,05-0, 15 г/л среды.

1090261

Табл

В

1 0

0,011

О, 011

2 2

Изобретение относится к микробиологической промышпенности и касается культивирования бавидиомицетов, которые могут быть использованы в качестве основного материала для медицин- 5 ских препаратов.

Известен способ получения биомассы базидиомицетов, в частности Schizophyffum или Zenntinus путем культи10 вирования мицелия в питательной среде в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях f1).

Однако известный способ не обеспечивает высокого выхоДа целевого.про15 дукта.

Цель изобретения — повышение выхода целевого продукта.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения биомассы базидиомицетов путем культивирования мицелия в питательной среде в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях, мицелий базидиомицетов, принадлежащих., 25 к виду CorxoFus предварительно гомо- генизируют до получения однородного шпамма и полученный гомогенат вносят в питательную среду в количестве 0,01-0,2 г/л питательной среды, содержащей в качестве источника углерода декстрозу.

Кроме того, мицелий гомогенизируют до образования комков размером 50—

1000 мкм.

Гомогенат вносят в питательную 35 среду.в количестве 0,05-0, 15 г/л.

Способ осуществляют следующим образом.

Посевная культура состоит из нитевидного мицелия (зернистый или 40 в форме комков {гранул}, образуя негомогенную смесь).

Для гомогенизации посевной куль-: туры гранулы разделяют. Получают шпам, в котором мицелий диспергирован равномерно. Иицелий гомогенизируют до тех пор, пока размер комков находится в пределах 50 — 1000 мк.

Гомогенизацию посевной культуры проводят с помощью известных средств, например гомогенизатора, гомосмесителя, дисперсионного смесителя, соковыжималки или винтового смесителя.

Время, необходимое для образования шпамма посевной культуры с помощью гомогенизирующнх средств, составляет от 30 с до 10 мин. Если для измельчения комков мицелия до 2-3 ,:или 10-50 мк приложены черезмерные

;усилия, сказывается неблагоприятный эффект на развитие грибков при последующей культивации.

Количество мицелия, применяемого для эаряжения среды, для культивирования обычно составляет 0,01-0,2 г/л предпочтительно О, 05-0, 15 г/л среды.

Среда, применяемая для культивирования базидиомицетов, является водной средой и к ней не предъявляют никаких специальных требований, условия культивации в отношении температуры, скорость аэрации и скорость перемешивания обычные.

Пример 1. 120 л среды (pH

6,5) следующего состава, г/л воды:, Декстроза 50

Дрожжевой экстракт 7,5 загружают в бродильный чан емкостью

200 л и подвергают стерилизацию под давлением при 120 С по обычному методу.

Затем мицелий CorioXus ver sicofor (Fr) Quei,культивированный в сосуде емкостью 30 л, гомогенизируют в гомосмесителе до тех пор, пока гранулы станут неразличимыми невоору" женным глазом. Гомогенизированным мицелием заражают.среду в бродильном чане емкостью 200 л и затем культивируют в течение 150 и при 25 С, скорос. ти аэрирования 0,5 об ./об . в мин, и скорости перемешивания 250 об/мин.

Иицелий отделяют, промывают водой, этиловым спиртом и высушивают при

80 С.

Полученные результаты показаны .в табл. 1.

Комки мицелия присут- 5,5 ствовали

Комки мицелия присут - - 10,9 ствовали незначительно

1090261

Продолжение табл. 1

-3 7

Комки ми исчезли

11,6

О, 100

Комки мицелия +.

4 О

Выход мицелия, г/л среды

КоличестОпыт Время гомо.генизации посевной во мицелия, г/л среды культуры, мин

О, 005

0,015

5,9

11,9

1

0,05

12,8

0,10

13,5

О, 15

13,3

0,20

13,2

0,30

12,0, 0,50 11,9

Таким образом, при одинаковом выходе мицелия. для осуществления предлагаемого способа необходимо всего

1/10 ч. посевной культуры, используемой по известному способу. Культивацию осуществляют с применением посев. ной культуры, гомогенизированной согласно предлагаемому способу и с

20 негомогенизированной культурой. Сравнивают время, требуемое для получения выхода мицелия 11 г/л.

Посевную культуру, аналогичную примеру 1, гомогенизируют по примеру

1. Зараженную среду подвергают культивации. Для сравнения посевную культуру не гомогенизируют. Результаты показали, что в случае применения гомогенизированной посевной культуры время, требуемое для достижения вы30 хода мицелия 11 г/л значительно короче при меньшем количестве посевной куль туры.

Пример 3. В ферментер емкостью 200 л помещают 120 л культу-. З5 ральной среды (рН 6, 5) > имеющей сле-. дующий состав, г/л воды:

Декстроза 50

Дрожжевой экстракт 7,5

Среду стерилизуют обычным образом 40 о под давлением при 120 С. Затем мице.лий Coriolus versicolor {Fr) Яие1, предварительно выращенный в банкообразных ферментерах емкостью 30 л, гомогенизируют гомогенизатором-смеси-45 телем до тех пор, пока гранулы мицелия станут неразличимыми для невооруженного глаза. Такой гомогенизи- рованный мицелий просеивают в ферментер емкостью 200 л при соответствующих количествах инокулята выращиЭ вают в течение 150 ч при 25 С,скорости аэрации 60 л/мин и скорости перемешивания 250 об/мин. Разросшийся мицелий отделяют от полученной культу- 55 ры, промывают водой, этанолом и ацетоном в указанном порядке, а затем сушат при 80 С.

Результаты приведены в табл. 2.

Таблица 2

Сравнительные данные по выходу мицелия в зависимости от концентрации посевного материала

П р и м е ч а н и е. Комки мицелия исчезали во всех опытах.

П р и и е р 4. Мицелий базидиомицетов гомогенизируют в течение 7 мин до тех пор, пока размер комков мицелия не достигнет 100-1000 мкм, и инокулируют в питательную среду.

Культивируют при 25 С, скорости . о аэрации 0,5 об./об. питательной среды в мин и скорости перемешивания

250 об/мин в течение 150 ч ° Выросший мицелий выделяют из среды, промывают водой, этиловым спиртом и ацетоном и затем сушат при 80 С ° о

Результаты представлены в табл. 3.

109026 1

Таблица 3

Сравнительные данные по выходу биомассы при использовании гомогенизированного и негомогенизированного мицелия Разновидность грибков

Депонирование

Выход мицелия.через

150 ч культивации, г/л культурной среды

Предлагае- Сравнительмый способ ный пример

Corio2us versicolor(FrgQueI.

РЕКИ-Р

Ф

5,4

12,8

24 12

0,031

О, 030

5 6

2413

12,7

То же

5,3

12,8

О, 031

О, 031

2414

5,3

2415

12,5

12,6

5,5

2416

5,2

12,8

241 7

5,5

12,4

2418

2419

12,8

5,3

5,0

2420

5,6

12,6

2421

Coriokus чегз1со1ог(Рг)Яие2.

FERN-Р

5,4

2422

0,031

12,7

То же

5,6

5,5

5,4

12,8

2423

0, 031

О, 031

О, 030

12,7

2424

12,6

2425

Corio2us versicolor(Fr) Que J., РЕКИ-P

О, 031

5,2

12,8

2426

Car ioйиз bi f ormi s (KXotz) Pat.

NiId strain

not-deposited 0,030

5,3

4,7

Согхойиз conchif ed (Schv.) Pat

То же

0,030

0,030

О, 031

Coriofus versicolor(Fr)Quef.

Corio2us pubescens(Fr)@ ей.

4 5

4,6

Coriolus hirsutus(Fr)Цоем.

PERM-P No

12,8. 2711 0,031

5,2

988 0,030

11, 9

4,7

„2712 О 030 12 4 5 О

Таким образом, использование биомассы базидиомицетов вида Corioius, гомогенизированного мицелия в .Каче- что, в свою очередь, повышает выход стве посевного материала и декстрозы биологически активных препара-. в качестве источника углерода позво- 5> тов на основе данных кульяет значительно увеличить вьщод . тур.

Ю

3HHHQH Заказ 2962/56 Типаж 522 Доущсиое

Филиал. ПОП Патеат, г.Ужгород, ул.Проектйая, 4

Coriofus consors(Berk)Imaz.

FERN-Р No

Coriofus pargamenus(Fr)Pat.

РЕВИ-Р No.

Норма инокулирования, r/ë. 0,031

О, 031

О, 030

О, 031

О, 030

О, 030

12,6 ,11, 7

11 4 I0,8