Способ стимуляции митотической пролифирации гепатоцитов

Способ стимуляции митотической пролифирации гепатоцитов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

Ф.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н AS ГОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTHA (21) 3463253/28-13 (22) 02. 07. 82 (46) 07,05.84. Бюл, В 17 . (72) Б.П.Солопаев, В.В.Садовникова, Н.В.Елисеева и И.Н.Балияина (71) Горьковский государственный медицинский институт им.С.M.Êèðîâà (53) 576.353(088.8) (56) 1. Авторское свидетельство СССР по заявке к- 3339544/28-13, 28.06.82 (прототип).

„„SU„„1091214 А

Зю9 G 09 В 23/28; А 61 N 1/42 (54) (57) CIIÎCÎB СТИИуП ЦИИ MHTOTIAFCКОИ ПРОЛИФЕРАЦИИ ГЕПАТОЦИТОВ, включающий резекцию доли печени с последующим воздействием на животное маг нитным полем, отличающийся тем, что,с целью увеличения количества митозов, через 10-12 ч после резекции на животное воздействуют . постоянным магнитным полем с напряженностью 500 — 1000 Э длительностью 30 — 60 мин.

Изобретение относится к экспери ментальной биологии и может быть использовано для изучения цитологичес ких механизмов митотического деления клеток.

Известен способ стимуляции митотической пролиферации гепатоцитов, включающий резекцию доли печени с последующим воздействием на животное магнитным полем 13.

Однако при данном способе образуется небольшое количество митозов, что ограничивает его испсльзование.

Цель изобретения е- увеличение количества митозов.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу стимуляции митотической пролиферацик гепатоцитов, включающему резекпию доли печени с последующим воздействием на животное магнитным нолем, .ерез 10-12 ч после резекции на животное воздействуют постоянным после с напряженностью

500-1000 3 длительностью 30-60 мин.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.

Животное фиксируют, дьпот эфирный наркоз ° На брюшной стороне по белой линии живота делают разрез -3 см„

30 производят вскрытие брюшной полости, Затем перевязывают лигатурой левую боковую и центральные доли печени и отсекают их. Затем через разные временные интервалы с момента операции животных подвергают воздей- ствию постоянного магнитного паля в течение 30-60 мин. С з.ой целью экспериментальную группу животных (одновременно 5 крыс) помещают в электромагнитное доле. ."1ффект проявляется после первой пропедуры, Дальнейшее воздействие постоянного магнитного полн повышения митотического индекса не дает.

Пример . Крысу весом 200 г привязывают эа четыре конечности к деревянной доске брюшной стороной кверху. Дают эфирный наркоз масочным способом в течение 1-2 мпн, готовят операционное поле размером 60rr30 мм, Выше мечевидного отростка на 1 см и вниз на 5 см вьпщипывают шерсть, Смазывают кожу йодом, покрывают жи вотное стерильной салфеткой и зажимами фиксируют ее к коже в области операционного поля. Дают эфирный наркоз в течение 2-3 мин, На брюшной стороне по белой линии живота делают

214 2 разрез величиной 2-3 см, Послойно разрезают кожу, апоневроз мьппцы, Рану расширяют и выводят центральную долю печени. Ее перевязывают стерильным лигатурным шелком и отсекают. В брюшную полость вводят раствор пенициллина в коли:.естве 1 мл — 1000 ед, Ткани послойно зашивают непрерывным швом. В качестве шовного материала используют стерильный шелк Р 2 или

Р 3. Кожу в области шва смазывают

Йодом. Животное отвязывают и помещают в клетку. Через 6 ч после операции животное помещают в электромагнитное поле на 60 мин. Электромагнит СП-15 с плоскими параллельными полюсными наконечниками размерами 00к300 мм., расстояние между ними составляет 100 мм. Индуцированное магнитное поле практически однородно в центральной области межполюсного пространства размером 300х200 мм

В качестве источника питания используется собранный по двухполупериод— ной схеме выпрямитель, в который для уменьшения пульсации включается емкостная батарея величиной около

20 000 мкф.Животных помещают в зазор магнита в плексиглазовых клетках. Через cóòêè животное забивают.

Кусочки печени фиксируют в жидкости карнуа и в формалине, заливают в парафин. Срезы толщиной 5 мкм окрашивают гематоксилин-эозином, Средняя величина митотнческого индекса

106%, т,е. оздана модель митотической пролиферации с большим количеством митозов,что дает возможность наблюдать клетки, находящиеся на любой стадии деления. Модель используется для изучения цитологических механизмов развития и регенерации кйеток., тканей, органов и организма.

Предлагаемым cnoсобом в течение

8 мес проведсно исследование митотической пролиферации гепатоцитов на 100 белых беспородных крысах весом 120-200 г, Контрольная группа животных после гепатзктомии воздействию постоянного магнитного поля не подвергалась.:.

Об интенсивности пролиферации в печени судили по величине митотического индекса (количество митозов на 1000 клеток)„

Операцию и забои животных производили с 8 до 9 ч утра, Животных забиСоставитель И.Мелемука

- В

Редактор А.Мотыль Техред Л.Мартяшова Корректор О.Билак

Заказ 3086/48 Тираж 447 Подписное

ВНИИПИ 1 осударственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП "Патент", г, Ужгород, ул. Проектная, 4

3 1091 вали ежедневно в течение шести дней, начиная с первых суток после резекции печени.

У экспериментальных животных, подвергавшихся воздействию магнитного поля, наибольший пик митотической активности гепатоцитов отмечался уже через 24 ч после резекции (сдвиг влево) по сравнению с контрольной группой, у которой максимум митоти- !О ческой активности наблюдается на вторые сутки после гепатэктомии.

Предлагаемый способ эффективен.

Судя по митотическому индексу, который является объективным критерием 1 оценки клеточного деления, интенсивность митотической пролиферации возрастает в 5 раз по сравнению с стимуляцией только резекцией печени, а

214 4 следовательно, и с прототипом (так как в прототипе митотическая активность та же, что и при действии одной резекции).

Предлагаемый способ непродолжителен во времени. Для достижения эффекта достаточно одной процедуры продолн жительностью 30-60 мин.

Предлагаемый способ надежен. Стимуляция митотичеакой пролиферации гепатоцитов наблюдалось в IOOX случаев. Минимальное значение величины мнтотического индекса после стимуляции предлагаемым способом составляло 94,27., максимальное повышение ми .тотического индекса — до 141,2Х.

Предлагаемый способ прост, не требует для своего осуществления редкой и дорогостояшей аппаратуры.