Способ получения бактериальной закваски для силосования кормов

Способ получения бактериальной закваски для силосования кормов

Реферат

 

Способ получения бактериальной закваски для силосования кормов включающий выращивание бактерий на жидкой питательной среде, концентрирование бакмассы, нейтрализацию щелочью и последующее высушивание путем распыления в защитной среде, отличающийся тем, что, с целью увеличения содержания бактериальных клеток в закваске и повышения ее активности, концентрирование бакмассы осуществляют путем добавления растворов бентонита и хлористого кальция.

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано при получении бактериальной закваски для силосования кормов. Известен способ получения бактериальной закваски для силосования кормов, включающий культивирование бактерий на жидкой питательной среде, содержащей кукурузный экстракт, сахар, аммоний сернокислый, кобальт хлористый, с последующим отделением биомассы от культуральной жидкости центрифугированием, или сепарированием, или без отделения биомассы и высушивания культуральной жидкости или концентрата распылительным способом с сухим обезжиренным молоком в качестве наполнителя. При этом культуральную жидкость перед сушкой нейтрализуют раствором щелочи. Титр получаемого продукта составляет 0,2 2 млрд. клеток в 1 г, срок хранения 6 9 мес. при температуре +4, +10^oC. Однако этот способ имеет недостатки. В случае сушки культуральной жидкости без отделения биомассы происходит не производительный процесс сушки. При отделении биомассы центрифугированием или сепарированием наблюдаются значительные потери жизнеспособных клеток. Выход активных клеток пентозосбраживающих молочнокислых бактерий (ПМБ), на стадии центрифугирования составляет 19% Этим способом отделить биомассу пропионовокислых бактерий (ПКБ) не удается. Целью изобретения является увеличение содержания бактериальных клеток в закваске и повышение ее активности. Поставленная цель достигается тем, что в способе получения бактериальной закваски для силосования кормов, включающем выращивание бактерий на жидкой питательной среде, концентрирование бакмассы, нейтрализация щелочью и последующее высушивание путем распыления в защитной среде, концентрирование бакмассы осуществляют путем добавления растворов бентонита и хлористого кальция. Пример 1. Способ опробован на 3 разных культурах, используемых для заквашивания силоса: Streptococcus lactis diastaticus (АМК), Lactobacterium pentoaceticum (ПМБ), Propionibacterium shermanii (ПКБ). Заготовка полуфабрикатов, необходимых для процесса. Бентонит готовят в виде 10%-ной водной суспензии. Воду прогревают до 80^oC, заливают бентонит, перемешивают и при этой температуре выдерживают 10 12 ч. Фосфатиды растительные, подсолнечные или соевые, готовят в виде 20%-ной эмульсии. Воду подвергают до 50 60^oC, включают быстроходную мешалку или диспергатор, эмульгируют 10 30 мин до получения стойкой эмульсии беловато-кремого цвета. Культуры выращивают на средах, определенных для каждой культуры. Основные биохимические показатели сред перед посевом приведены в табл. 1. АМС выращивают при 37^oC, ПМБ 30-32^oC, ПКБ 28-30^oC без аэрации, при периодическом перемешивании. Количество посевного материала вносят в питательную среду для АМС, ПМБ 5% ПКБ 7-10% Процесс выращивания в ферментерах длится до максимального накопления клеток АМС 16-18 ч, ПМБ 18-16 ч, ПКБ 20-24 ч. Затем культуру охлаждают, добавляют 240 г 10%-ной суспензии бентонита и 20 мл насыщенного раствора хлористого кальция на каждый литр культуральной жидкости. Смесь перемешивают, оставляют в покое на 3 ч. За это время образуется плотный осадок, занимающий 30% объема культуральной жидкости. Его отделяют от надосадочной жидкости, выпуская через нижний сливной вентиль ферментера. Осадок-паста содержит 0,3 8 млр.клеток, пасту нейтрализуют крепкой щелочью до pH 6,5 7,0, смешивают с фосфатидами и тиомочевиной, которых вносят на 1 л соответственно 50 г и 5 г. Для предотвращения расслаивания пасты в сборнике перед сушилкой, ее тщательно перемешивают быстроходной мешалкой для равномерного смешивания с защитной средой и получения мелкодисперсной массы. Сушат такую пасту на распылительной сушилке при температуре сушильного воздуха 130 135^oC на входе и 60 65^oC для ПКБ, 55 60^oС для АМС, ПМБ на выходе из сушилки до конечной влажности продукта не более 8% Пример 2. Процесс ферментации АМС, ПМБ проводился в аппаратах емкостью 100 л на среде следующего состава. Состав питательных сред для выращивания АМС и ПМБ приведен в табл. 2. pH среды до стерилизации 7,2 7,4. Стерилизация сред при 130^oС в течение 40 мин. pH перед посевом доводят стерильным 20%-ным раствором едкого натра до 6,7 для АМС и 6,1 6,3 для ПМБ, АМС выращивали при температуре 36 37^oС, ПМБ 30-32^oС. Перемешивали каждый час по 2 мин. ПКБ выращивали на среде, содержащей (%): кукурузный экстракт (нативный) 3; глюкоза 2; аммоний сернокислый 0,3; кобальт хлористый 1 мг. pH перед посевом 6,5 6,7. Режим выращивания: без аэрации с периодическим перемешиванием 1 раз в 3 ч при температуре 28-30^oC. После максимального накопления клеток (18 16 ч) культуры готовят к сушке, при этом охлаждают, добавляют бентонит (10%-ная суспензия из расчета 2 3 г бентонита и 50 100 мл насыщенного раствора хлористого кальция на 1 л культурной жидкости. Результаты осаждения за 3 2,5 ч: ПКБ объем плотного осадка 30% от всего объема культуральной жидкости. Титр культуральной жидкости 510⁸, титр пасты 510⁹, в надосадочной жидкости клеток по микроскопической оценке мазка нет. ПМБ объем плотного осадка 50% Титр культуральной жидкости 1010⁷, титр пасты - 310⁸, надосадочная жидкость чистая. АМС объем осадка 50% Титр культуральной жидкости 1510⁸, титр пасты - 1310⁹, надосадочная жидкость чистая. Полученные осадки-пасты нейтрализуют, добавляют защитные компоненты-фосфатиды 1% тиомочевина 0,5% Сушат распылительным способом. Сравнительная характеристика препаратов ПМБ, полученных распылительным высушиванием биомассы, отделяемых от культуральной жидкости центрифугированием и предложенным способом, представлена в табл.3. Предлагаемый способ получения силосной закваски по сравнению с известными имеет следующие преимущества: концентрирование клеток осуществляется без применения дорогостоящего и энергоемкого оборудования; при таком способе сгущения практически не происходит снижение жизнеспособности клеток. Титр сухой закваски составляет от 610⁸ до 510⁹.

Формула изобретения

Способ получения бактериальной закваски для силосования кормов, включающий выращивание бактерий на жидкой питательной среде, концентрирование бакмассы, нейтрализацию щелочью и последующее высушивание путем распыления в защитной среде, отличающийся тем, что, с целью увеличения содержания бактериальных клеток в закваске и повышения ее активности, концентрирование бакмассы осуществляют путем добавления растворов бентонита и хлористого кальция.

РИСУНКИ

Рисунок 1

PD4A - Изменение наименования обладателя патента Российской Федерации на изобретение

Номер и год публикации бюллетеня: 13-1998

(73) Новое наименование патентообладателя:Институт микробиологии и вирусологии Министерства науки - Академии наук Республики Казахстан (KZ)

Извещение опубликовано: 10.05.1998        

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Номер и год публикации бюллетеня: 23-2001

Извещение опубликовано: 20.08.2001