Питательная среда для определения синтеза факторов колонизации у энтеробактерий

Питательная среда для определения синтеза факторов колонизации у энтеробактерий

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СИНТЕЗА ФАКТОРОВ КОЛОНИЗАЦИЙ У ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ, содержащая питетельную основу, дрожжевой экстракт, серно-кислый магний, хлористый марганец , arap-arap и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью повьшения частоты-выявления синтеза фактора колонизации, она дополнительно содержит глицерин, в качестве питательной основы она содержит ферментативный,гидролизат казеина и кислотный гидролизат эритроцитов при следующем количественном соотношении компонентов, мас.%: Фрементативный гидролизат казеина 0,15-0,25 Кислотный гидролизат эритроцитов 0,9-1,1 § Дрожжевой экстракт 0,1-0,17 Серно-кислый магний 0,04-0,05 Хлористый марганец 0,0003-0,0005 Глицерин0,15-0,25 Arap-arap1,5-2,0 Дистиллированная водаОстальное СЛ ел

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

44«4

РЕСПУБЛИК

099 (И) зЮ ° С 12 !/04

ГОСУДАРСТВЕННЬЮ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИИ И ОТНРЫТИИ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ, - : v »

Ф%

° °

° 4

Ъ4

4 A4 TOPCNOINV ССИССТТЛЬСТ44 (21) 3573539/28-13 (22) 15.04.83 (46) 30.07. 84. Бюл. Р 28 (72) С.Т.Мнацаканов, М.Е.Коцинян, В. Г,Лиходед, Б.M.Ðàcêèí и Н.А.Тарвердян (71) Армянский ордена Трудового

Красного Знамени научно-исследовательский институт эпидемиологии, вирусологии и медицинской паразитологии им. А.Б.Апексаняна (53) 576.8.093. 1(088.8) (56) 1. Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М., "Медицина", 1978, с.350.

2. Evans D.Ñ. et aL, J.Infection

and Immunology, 1977, 18, р. 330-337 (прототип). (54)(57) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СИНТЕЗА ФАКТОРОВ КОЛОНИЗАЦИИУ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ, содержащая питетельную основу, дрожжевой экстракт, серно-кислый магний, хлористый марганец, агар-агар и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью повьппения частоты.выявления синтеза фактора колонизации, она дополнительно содержит глицерин, в качестве питательной основы она содержит ферментативный,гидролизат казеина и кислотный гидролизат эритроцитов при следующем количественном соотношении компонентов, мас.7.:

Фрементативный гидролизат казенка О, 15-0,25

Кислотный гидролизат эритроцитов 0,9-1,1

Дрожжевой экстракт О, 1-0, 17

Серно-кислый магний 0,04-0,05

Хлористый марганец 0,0003-0,0005

Глицерин О, 15-0,25

Агар-агар 1,5-2,0

Дистиллированная вода Остальное

1105503

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности при изучении острых кишечных заболеваний у людей.

Известна питательная среда для определения синтеза факторов колонизации у бактерий кишечной группы, содержащая мясопептонный агар 111 .

Известна также питательная среда для определения синтеза факторов tO колонизации у. энтеробактерий, содержащая питательную основу — казаминовые кислоты, дрожжевой экстракт, серно-кислый магний, хлористый марганец, агар-агар и дистиллированную во- 15 ду f2).

Однако известные среды не обеспе( чивают высокой частоты выявления син. теза фактора колонизации (5-6 и 1011Ж соответственно). Кроме того, на 20 второй среде не всегда имеет место рост ауксотрофов.

Целью изобретения является повышение частоты выявления синтеза фактора колонизации. 25

Поставленная цель достигается тем, что питательная среда для определения синтеза факторов колонизации у энтеробактерий, содержащая питательную основу, дрожжевой экстракт, сер30 но-кислый магний, хлористый марганец, агар-агар и дистиллированную воду, дополнительно содержит глицерин, в качестве питательной основы она содержит ферментативный гидроли- З5 зат казеина и кислотный гндролизат эрктроцитов:при следующем количественном соотношении компонентов, мас.Х:

Ферментативный гидролиэат казеина О, 15-0,25 40

Кислотый гидролизат эритроцитов 0,9-1, 1

Дрожжевой экстракт О, 1-0, 17

Серно-кислый магний 0,04-0,05

Хлористый марганец 0,0003-0,0005

Глицерин О, 15-0,25

Агар-агар 1,5-2,0

Дистиллированная вода Остальное

Питательную среду готовят следую" 50 щим образом.

В дистиллированной воде растворяют эритроцитарный кислотный гидролиэат, экстракт дрожжей, ферментативный гидролизат казеина, агар-агар .55 (при подогревании). Смесь фильтруют, устанавливают рН 7,2-7,4 и автоклавируют. После автоклавирования готовая смесь может применяться непосредственно или же храниться до 1 мес.

Отдельно стерилизуют химически чистый глицерин, серно-кислый магний и хлористый марганец.

При употреблении основы ее растапливают, добавляют химически чистый глицерин, серно-кислый магний, хлористый марганец и готовую среДу разливают в стерильные чашки Петри.

Пример 1. Для определения способности синтеза антигенов адгезии было приготовлено три состава среды.

Составы среды с соответствующим содержанием компонентов приведены в табл. 1.

При помощи указанных трех сред в реакции гемагглютинации с эритроцитами человека -й группы крови, крупного рогатого скота, цыплят и морской свинки при добавлении 0,5-17 раствора% -маннозы была определена способность к синтезу факторов колонизации у 166 культур Escherichia

coli.

Результаты испытания приведены в табл. 2 (процент указывает на число штаммов, давших положительную маннозорезистентную реакцию гемагглютинации) .

Пример 2. 166 культур Е.coli были проверены в реакции гемагглютинации с вышеуказанными эритроцитами с добавлением Э-маннозы при росте на мясопелтонном агаре (МПА), CFA-arape Эванса и среде СФК (ло изобретению).

Результаты сравнительного определения синтеза факторов колонизации в трех средах представлены в табл. 3. (процент указывает на число штаммов, давших положительную маннозорезистентную реакцию гемагглютинации). (Как видно из приведенных данных в таблице 3, применение среды СФК втрое превышает частоту выявления факторов адгезивности ло сравнению с мясопелтонным агаром и вдвое — по сравнению с результатами, полученными при испытании CFA-агара.

Использование изобретения позволит намного полнее и эффективнее выявлять синтез антигенов адгеэии у кишечных бактерий, ввичу лучшего синтеза антигенов .солонизалии и расширения диапазона исль туемь|х культур.

1105503

Таблица 1

Содержание в составе, Х (т (з

Компоненты

Эритроцитарный кислотый гидролизат

1 ° 1

0,9

0,15

0,17

0,1

Экстракт дрожжей

0,25

0,15

0,2 0,25

0,15

Глицерин

0,05

0,04

0,04

0 ° 0003 0,0004 0,0005

1,5 2,0

1,5

Остальное Остальное Остальное

Вода дистиллированная. °

Таблица 2 одержание в составе, Х

1 ° ) Эритроциты

23,6

24,7

22,8

23,8

24,1.

23,5

23,6

24,7

23,9.17,9

18,1

Морской свинки

17,7

Таблица 3

Содержание в среде, Х

1 1

Эритроциты

ИПА CPA-агар СФК

6,02

Человека

24,7

Крупного рогатого скота 9,64

24,1

4,81

24,7

Цыплят

7,23

18 1

Морской свинки

ВНИИПИ аказ 5544 19 аж 22 По сное

Филиал ППП Патент, г.Ужгород, ул.Проектная, 4 н н

ЩЩ

Ферментативный гндролизат казенка

Мазо

MnCI

Агар-агар

Человека

Крупного рогатого скота

Цыплят

13,25

14,46

11,44

10, 24