Способ количественного определения сульфаниламидных лекарственных препаратов

Способ количественного определения сульфаниламидных лекарственных препаратов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУЛЬФАНИЛАМИДНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ путем Обработки анализируемой пробы растворг1ми соляной кислоты, нитрита натрия с последующим фотометрированием полученного раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и точности, анализируемую пробу дополнительно обрабатывают раствором 3-(oL, /j-дикарбоксиэтил) роданина в присутствии боратного буферного раствора с рН 12.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU„„1105791 А

3(511 G 01 N 21/78

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

FlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ф гдф q с

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ИаЬЯа., g ÿ

К АВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3557433/23-04 (22) 22.02.83 (46) 30 ° 07,84. Бюл. М 28 (72). A.Ô.Ìûíêà, И.И.Копийчук, М.Л.Люта и A ° А.Биляк (71) Львовский государственный медицинский институт (53) 543.42.063 (088.8) (56) 1.Государственная фармакопея.

Х изд., 1968, с. 470-471, 646-648.

2.Коренман И.М. Фотометрический анализ. М., Химия, 1970, с.26-36 (прототнп). (54) (57) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУЛЬФАНИЛАМИДНЫХ ЛЕКАРСТВЕНHhIX I1PEIIAPAT0B TeM O P OT аНализируемой пробы растворами соляной кислоты, нитрита натрия с последующим фотометрированием полученного раствора, отличающийся тем, что, с целью повыаения чувствительности и точности, анализируемую пробу дополнительно обрабатывают раствором 3-(д., ф-дикарбоксиэтил) роданина в присутствии боратного буферного раствора с рН 12.

1105791

Изобретение относится к фармацевтическому анализу, касается количественного определения сульфаниламидных препаратов, например норсульфазола, сульфамонометоксина, стрептоцида в фармакопейных препаратах, лекарственных формах и биологических средахкрови и моче, и может быть использовано в центральных заводских лабораториях, контрольно-аналитических лабораториях аптекоупранлений, науч- 10 но-исследовательских .лабораториях для количественного определения сульфаниламидных препаратов в исследуемых объектах и изучения их метаболизма. 15

Известен способ определения сульфаниламидных лекарственных препаратов путем титрования раствора пробы анализируемого вещества нитритом натрия в присутствии индикатора j lj„

Недостатками данного способа являются его малая чувствительность (для одного анализа требуется 0,25 г вещества) и невысокая точность (A - "+ 3,5-4,5%) .

Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату является способ количественного определения сульфаниламидных лекарственных препаратов путем последовательной обработки 30 анализируемой пробы растворами соляной кислоты, нитрита натрия, мочевины, тимола и щелочи с последующим фотометрированием полученного раствора f2 ) 55

Недостатками известного способа являются относительно невысокая чувствительность Ei малая его точность (А = 10,5%) . !

Цель изобретения — повышение чунст- 4() вительности и точности. способа.

Поставленная. цель достигается тем, что согласно способу количественного определения.сульфаниламидных лекарственных препаратов путем обработки анализируемой пробы растворами соляной кислоты, нитрита натрия с последующим фотометрированием полученного раствора анализируемую пробу дополнительно обрабатывают раствором

3-(oL,н-дикарбоксиэтил) роданина

I 1-в присутствии боратного буферного раствора с рН 12. 3-(oL,p-дикарбоксиэтил) роданин представляет собой светло-желтый кристаллический порошок, легко растворяющийся в ацетоне, диоксане, спирте в воде он малорастворим. Т.пл.

=140 С.

Пример 1. Количественное oiiределение сульфаниламидов н фармако-, мако- 60 пейных препаратах.

Точную нанеску 0,01 r исследуемого вещества (норсульфазола, стрептоцида или сульфамонометоксина) растворяют в 1 .н растворе соляной кислоты в мерной колбе на 25 мл. 0,1 мл полученного раствора помещают в другую мерную колбу на 25 мл, затем прибавляют 0,8 мл 1 н раствора хлоридной кислоты, 1 мл 1%-ного раствора нитрита натрия и 1 мл 0,1%-ного водного раствора реагента. Смесь хорошо взбалтывают и объем в колбе доводят до метки раствором боратного буфера и гидроксида натрия, при этом контролируют рН среды с помощью индикаторной бумаги, устанавливают рН 12. (способ приготовления боратного буфера описан ниже).

Окрашенный в красный цвет раствор колориметрируют на фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром при 1 - 500 нм, используют кювету с толщиной слоя 10,0 мм. Кювету сравнения заполняют раствором, состоящим из всех компонентов кроме исследуемого вещества. Содержание препарата в процентах рассчитывают по следующим формулам:

D — 0 005 100 25 10 п

НорC

1,6165 навеска(мг) D — 0,004

111 ст р

2,036

100 25 10 нанеска(мг) — D — Ор002 100 25 10 ш

С JR6(pOINOH .1,8122 .навеска(мг) где D — оптическая плотность (числа 0,005; 1,6165; 0,004; 2,036;

0,002; 1,8122 получены в результате математической обработки калибровочной кривой).

Для построения калибровочной кривой готонят стандартный раствор путем растворения. точной навески пре-. парата (0,01.г) н 25,0 мл 1 н раст-. вора соляной кислоты. 1 мл стандартного раствора содержит 0,4 мг.препарата. Исходя из стандартного раство-. ра готовят серию растворов с содержанием исследуемого вещества от 0„008 до 0,2 мг. Для этого в четыре колбы емкостью на 25 мл каждая помещают соответственно 0,02; 0,04; 0,06; 0,5 мл стандартного раствора. Для проведения реакции азосочетания к ним последонательно прибавляют

0,8 мл 1 н раствора соляной кислоты, 1,0 мл 1Ъ-ного раствора нитрита натрия и 1,0 мл 0,1Ъ-ного раствора реагента. Содержимое каждой колбочки хорошо взбалтывают и доводят до метки, используя смесь боратного буфера и гидроксида натрия. Для приготовления буферного раствора берут

12,367 r борной кислоты, растворяют ее в 100 мл 1 н раствора гидроксида натрия, доводят объем раствора до

1105791 ром при h = 500 нм, используют кювету с толщиной слоя 10,0 мм. Кювету сравнения заполняют раствором, состоящим из всех компонентов кроме исследуемого вещества.

5 Результаты для построения калибровочного графика приведены в табл.1.

Таблица 1

100,0 мл дистиллированной водой. К полученному раствору прибавляют

200 мл 0,1 н раствора гидроксида натрия °

Окрашенный в красный цвет раствор колориметрируют на фотоэлектроколориметре ФЕК-М с зеленым светофильтОптическая плотность (Р)

1 1

Концентрация, (С) МГ

Стрептоцид Сульфамонометоксин

Норсульфазол

0,015

0,008

0,016

0,03

0,024

0,20

Подчинение светопоглощения закону Бугера-Ламберта Вера сохраняется 35 в пределах концентраций 0,008

0,2 мг/мл для всех исследуемых лекарственных. препаратов.

П р и м. е р 2. Количественное определение сульфаниламидов в таб- 4О летках.

Точную навеску порошка таблеток норсульфазола, стрептоцида или сульфамонометоксина с содержанием препарата около 0,01 r растворяют в 1 н растворе соляной кислоты в мерной колбе на 25 мл. Спустя 30 мин смесь фильтруют через бумажный фильтр, отбрасывают первые 5 мл фильтрата.

Из последующей порции отмеривают

0,1 мл и вносят в колбу на 25.мл. 50

Дальнейший анализ проводят аналогично .примеру 1.

Содержание препарата рассчитывают по формулам

Результаты количественного определения представлены в табл. 2.

Пример 3. Количественное определение сульфаниламидов в крови

Точный объем 0,5 мл сыворотки крови, содержащей 0,1-0,05 мг исследуемого препарата, помещают в пробирку с притертой пробкой и прибавляют

0,8 мл 1 н раствора соляной кислоты, 1 мл 1%-ного раствора нитрита натрия и 1 мл 0,1Ъ-ного раствора реагента.

Смесь хорошо взбалтывают и доводят . ее объем до 25 мл боратно-буферным раствором, при этом контролируют рН с помощью универсальной индикаторной бумаги, устанавливают рН 12. Окрашенный в красный цвет раствор колориметрируют на фотоэлектроколориметре

ФЕК-M аналогично примеру 1.

Содержание препарата в крови рассчитывают по формулам

D — 0,005 25.10 100 55

tn

1, 6165 навеска . препарата (мг) D — 0,005 норе

1,6165 V г/л

D — 0,004 25 10 100

D — 0,004

2,036 V

60 г/л стр

2,036 . навеска препарата(мг) D — 0,002

1,8122. V

D — 0,002 25 10 100 г/л навеска препарата(мг)65 с л аюн

0,040

0,080

0,120

0,140

0,160

0,180

0,045

0,070

0,135

0,20

0,250

0,260

0,300

0,330

0,020

0,035

0,050

0,085

0,170

0,250

0,290

0i330

0,370

0,410

0,020

0 i 030

0,045

0,075

0,145

0,220

0,255

0,295

0,330

0,365

1105791

Для анализа используют точный объем 0,1 .мл .мочи .с содержанием .препарата 0,08-0,04 мг и помещают в.пробирку .с притертой пробкой.

Дальнейший анализ проводят аналогично примеру 1..

Содержание препарата рассчитывают по формулам

D — 0,005

Норс

1,6165"0,1 мг/мл;

D — 0,004

Стр

2,036 0,1 мг/мл;

D — 0,002 мг/мл.

Al сУль Фс мо и

12,8122 0,1

Результаты количественного определения представлены в табл. 2.

Таблица 2.Neтрологические характеристики

Найдено

Препарат

Дано

В фармакопейном препарате мг/мл

0,0402

0,0395

0,0402

0,0804

0,0773

0,0804

0,0397

0,0407

0,0815

0,079

0,0815

0,0402

0,0991 0,0402

0,0789

0,0800 мг/мл п=6, х=100,15

0,04

100,50

98,75

Норсульфазол

0,04

6 =0,95,1-=0,42

100,50

100,50

0,04

0,08

0,08

1 = 1,07, А=+1,08%

0,08 п=5; х=100,70, 0,04

Стрептоцид

6 =1,566, 6- =0,70, 0,04

0,08

0,08

Эр =1,79, А=+1,78%

0 08

n=5, х=99,47

0,04

Сульфамонометоксин

6 =1,24, 6 — =0,55, 0,04

3 =1,42, А=+1,42ф

0,08

0,08 где Ч вЂ” объем сыворотки," мл. !

Результаты количественного определения представлены в табл. 2.

Пример 4. Количественное определение сульфаниламидов в крови животных

B желудок животных (крыс) предварительно вводят 0,5 г стрептоцида или норсульфазола,с помощью зонда.

Кровь от животных берут спустя 1,5 ч после приема. препарата. 30

Точный объем 1,0.мл сыворотки крови смешивают с 9,0 мл дистиллированной воды.

В колбу на 25 мл вносят 0,1 мл сыворотки, полученной при разбавле- 15 нии, и проводят анализ аналогично примеру 3.

Результаты определения представлены в табл, 2.

Пример 5. Количественное 2О . определение сульфаниламидных препаратов в моче, 96,62

100 50

99,25

101,75

101,87

98,75

101,87

100,50

97,75

100,50

98,62

100,00

1105791

Продолжение таблицы 2

4 (2

В лекарственных формах (таблетках) Норсульфазол

0,04

100,50

100,50

97,25

97,25

0,04

0,04

0,04

0,04

99,25

99,25

105,50

105,50

99,25

Стрептоцид тб ° 0,3 п=5, х=101,00

6 =2,73,6„- 1,21

Эр=3,09, A=+3,0%

0,04

0,04

0,04

0,04

Сульфамонометоксин тб. 0,5

100,50

100,50

97,75

100,50

97,75

0,0402

0,0402

0,0391

0,0402

0,0391

0,04

0,04

0,04 г/л г/л

n=5 х=102,30, 100,50

100,50

108,25

105,00

105,00

99,25

105,50

101,75

101,75

99,25

100,50

100,50

100,50

0,08

Норсульфазол

G =2,45,ь =1,09

0,08

0,08

0,08

0,08

n=5, х=101,5, 0,08

Стрептоцид

6=2,54,4 =1,13, )(0,08

0,08

0,08

0,08

n=5, х=99,15, 0,08

Сульфамонометоксин

6=3,02, 4=1,34 х

Oi08

0,08

020402

0,0402

0,0389

0,0888

0,0414

0,0397

0,0397

0,0422

0,0425

0,0397

В крови (in vitro) 0,0804

0,0804

0,0866

0,0840

0,0840

0,0794

0,0844

0 0814

0,0814

0,0794

0,0804

0,0804

0,0804

n=5, х=99,80, 2 63 6х 1,17, а p=2i99i A=+3.00%

n=5, х=99,40, 5 =1,51, б =0,674 а p=l I72, А=12,73% а =2,79, А =+2,73% ар=2,89 A=+2,85% а,=3,43 Л=т3,45%

1105791

Продолжение таблицы 2

0,08

93,75

100,50

0,0750

0,0804

0,08

В моче (in vitro) мг/мл

0,04

0,04

О 04

0,04

0,0414

0 04

103,50

93,25

0,04

Стрептоцид

99,25

99,25

97,00

97,00

0,04

0,04

0,04

0,04

100i50

96 50

100,50

97,75

97,75

0,04

В крови животных (крыс) Оптическая плотность мг/мл

8,04

О, 135

0i140

8,35

8,04

0 135

7,85

0,132

0,132

0,180

0,175

0,180

0,170

0,170

7,85

8,64

Стрептоцид

8,34

8,64

8,49

8,49

Норсульфазол

Сульфамонометоксин

Норсульфазол

0,04

0,04

0,04

0,04 мг/мл

0,0402

0,0402

0,0402

0,0414

0,0373

0,0397

0,0397

0,0388

0,0388

О, 0402

0,0386

0,0402

0 0391

0,0391

100,50

100,50

100,50

103,50 п=5, х =101,7, 6=1,48,G =0,66 х p=1 68, A=+1,65%

n=5, х=97,15, 6 =2,45, С =1,09, к

Зр=2,79, А= 2,73

n=5, х=98,04, /=1 80,5=0,80 х

Зр= 2,40, A=+2 06% х=8,02, п=5, 6 =О, 2046, х=8,02, n=5, 6 =0,2046, х = 0,0913, ) p=0ф 2337

n=5, х=8,53, 6=0,0970, х О 0434

3 =0,1108t

А=11,30%

1105791

Продолжение таблицы 2

В фармакопейном препарате (метод нитрометрии) норсульфазол

0,3

98,00

104,00

97,73

98,66

103,66

n=5, х=100,41, 6 =3,16

6-„= 1,41, 3 =3 60

A=+3,58%

0,3

0,3

0,3

0,3

0,25

Стрептоцид

98,80

100,00

92,08

102,00

96,00

n=5, х=97,77, б =3,85, х 3 =4, 37

A-- 4,46%

0,25

0,25

0,25

0,25

Таблица 3

Реактив

Форма

Название

3-(aL-ð-дикарбоксиэтил)роданил

Тимол

Пред. разбав

Открыв

i минимум

1:2500 1,79 1,78

100 1: 10000 10,5 11,3 40

Фармокопейный препарат

Стрептоцид

Составитель С.Хованская

Редактор Ю.Ковач Техред Ж.Кастелевич Корректор И.Муска

Заказ 5592/33 Тираж 823 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Филиал ППП Патент, г.ужгород, ул.Проектная,4

Применение предлагаемого способа приводит к повышению чувствительности реакции азосочетания в 2,5 раза, значительно повышает точность и специфичность метода, что позволяет проводить определение минимальных

0,2940

0,3120

0,2932

0,2960

0,3092

0,2470

0,2500

0,2302

0,2550

0,2400! количеств сульфаниламидов в лекарственных формах и биологических жидкостях без предварительного разделения смесей на компоненты.

Сравнительная характеристика методов приведена в табл. 3. йр A% Открыв Пред. J p AX мини- разбав мум