Способ определения глауцина

Способ определения глауцина

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛАУЦИНА путем экстракции растительного сырья органическими растворителями при добавлении папаверина, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, папаверин вносят перед экстракцией в исследуемый материал в отношении 1:0,003-1:0,050. (Л

союз советсних

СОЦИАЛИСТИЧЕО.(ИХ

РЕСПУБЛИН

09) (И) ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР по делАм изоБ етений и Отйрытий

ОЛИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABT0PCH0MV СВИДЕТЕЛЬСТВУ I

° ° (лл р ) >-:i-: М ТЕЕЛ (21) 3416673/28-13 (22) 24.03.82 (46) 15.08.84. Бюл. Р 30 (72) М.Я. Ловкова, Г.Н. Буэук, Н.Vi. Климентьева и Н.И. Гринкевич (71) Ордена Ленина институт биохимии им. А.Н. Баха АН СССР, Витебский го= сударственный медицинский институт и 1-й Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени медицинский институт им. И.М. Сеченова (53) 543.544.42 (088.8) (56) 1. Davis P. Hjgh-performance

Iiquid chromatograр11iс determination

of gIaucine and its metaboIite, dehydrogIaucine in mikrobiaI cuIture. — I. Chromatogr. 1980, р. 170174 .

Э(51) С 01 Н 31/08, А 61 К 35/78 (54)(5?) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛАУЦИНА путем экстракции растительного сырья органическими растворителями при добавлении папаверина, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повьппения точности способа, папаверин вносят перед экстракцией в исследуемый материал в отношении

1:0,003-1:0,050.

54 2 ной бане, Оставшийся воднокислый раствор, содержащий сумму алкалоидов, охлаждают до комнатной температуры и отфильтровывают через стеклянный фильтр Р 4. Полученный фильтрат подщелачивают 257-ным аммиаком до рН 9-10 и экстрагируют хлороформом (20 мл ° 3). Объединенные хлороформен" ные экстракты сушат безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют досуха на водяной бане. Остаток в зависимости от его количества растворяют в 0,1-5 мл этанола, 0,050,1 мп полученного раствора подвергают двумерной ТСХ в смеси бензолхлороформ-ацетон-метанол (4:4:1:3)

1-е направление и смеси толуол-ацетон-этанол-аммиак (10:10:1:0,5) — 2-е направление. Полученные хроматограммы проявляют реактивом Драгендорфа и аммиачным раствором тиосульфата натрия °

Проявленные зоны сорбции глауцина и папаверина элюируют смесью хлороформ-этанол-ацетон в соотношении 13:2:5. Растворитель из полученных элюатов отгоняют досуха на водяной бан ь, а остаток растворяют в 10 мл 2Х.-наго раствора НС9 и измеряют оптическую плотность полученных растворов на СФ-4А при

280 нм для глауцина и 283 нм для папаверина.

Исходя из количеств внесенного в качестве внутреннего стандарта папаверина и количества обнаруженных на хроматограмме глауцина и папаверина рассчитывают содержание первого алкалоида в навеске растительного материала.

Предлагаемый способ по сравнению с известным обеспечивает следующие преимущества: добавление внутреннего стандарта к экстрагенту позволяет учесть поправки на потери глауцина как в процессе выделения, так и в процессе количественного определения, что создает возможность его определения в малых навесках (10-200 мг) в образцах растительного материала, увеличивая точность в

10 раз. Кроме того, способ прост и может быть легко воспроизведен в лабораторных условиях, не требует использования сложного, дорогостоящеro оборудования. ж 823 Подписное

S 11083

Изобретение относится к фармацевтической химии и биохимии вторичных соединений, в частности к исследованию и анализу алкалоидов, и может найти применение в биохимии и физиологии растений, лекарственном растениеводстве, а также при контроле качества лекарственных препаратов, изготовляемых на основе алкалоидов.

Известен способ определения глауцика путем экстракции. растительного сырья органическими растворителями при добавлении папаверина 13.

Однако этот способ разработан для определения алкалоидов в культуральной жидкости и не может быть использован для определения соединений данного класса в растениях, поскольку в последнем случае перед разделением алкалоидов каким-либо спо20 собом требуется дополнительная . очистка первичного экстракта. Кроме того, прибавление внутреннего стандарта к уже выделенной сумме алкалоидов в указанном способе не позволяет учитывать ошибку определения,обусловленную колебаниями в полноте выделения суммы алкалоидов из культуральной жидкости.

Цель изобретения — повышение точ30 ности способа.

Поставленная цель достигаешься тем, что согласно способу определения глауцина путем экстракции растительного сырья органическими растворителями при добавлении папаверина, папаверин вносят перед экстракцией в исследуемый материал в отношении

1:0,003-1:0 050.

Способ осуществляют следующим образом.

К точной навеске измельченной травы мачка желтого прибавляют определенное количество папаверина из расчета 1:0,003-1:0,050 растительного материала, заливают определенным объемом смеси хлороформа - этанола — аммиака в соотношении

10: 10:1 (соотношение растительный материал — экстрагент 1: 10) и

50 настаивают в течение 18 ч. Полученный экстракт отфильтровывают и смешивают с равным объемом 57. водного раствора уксусной кислоты. Из образовавшейся двухфазной системы хлороформ и этанол отгоняют в токе воздуха на водя55

ВНИИПИ Заказ 5854/30 Тира àï ППП "IIa eaw" ° r.Ужгород, ул.Проектная, 4