Способ определения количества лейкоцитов в молоке

Способ определения количества лейкоцитов в молоке

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА ЛЕЙКОЦИТОВ В МОЛОКЕ, предусматрива1ощий отбор проб молока, смешивание их с аналитическим реагентом и анализирование полученной смеси, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и чувстви - тельности, в качестве аналитического реагента используют раствор флуоресцеивдиацетата с концентрацией 10 -10 м, полученную смесь вьщерживают при комнатной температуре в течение 30-50 мин и затем измеряют интенсивность ее флуоресценции, a определение количества лейкоцитов осуществляют по уровню интенсивности флуоресценции. (Л с

СОЮЗ ООВЕТСНИХ

О ВЗЮ

РЕСПУЬЛИК зю ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

flO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОЧНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3566504/28-13 (22) 20. 01. 83 (46) 23.08.84. Бюл. и 31 (72) В.П. Зорин, С.Н. Черенкевич, Г.Г.Козлова и А.М.Пахирко (71) Белорусский государственный университет им. В.И.Ленина (53) 637.127.6 (088.8) (56) 1. Авторское свидетельство СССР, В 363915, кл. С 01 N 33/04, 1965.

2. Авторское свидетельство СССР

У 945791, кл. G 01 Я 33/04, 1978. (54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕ-.

СТВА ЛЕЙКОЦИТОВ В ИОЛСКЕ, предусмат, SU„„1109641 ривакщий отбор проб молока, смешивание их с аналитическим реагентом и анализирование полученной смеси, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и чувстви— тельности, в качестве аналитического реагента используют раствор флуоресцеиндиацетата с концентрацией

-Ь -3

10 -10 м, полученную смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 30-50 мин и затем измеряют интенсивность ее фпуоресценции, а определение количества лейкоцитов осуществляют по уровню интенсивности флуоресценции.

1109641

860

1500

2100

Изобретение относится к способам исследования молока и может быть использовано для проверки его качества при приемке на молочных предприятиях, а также для проверки его на молочных фермах.

Известен способ определения количества лейкоцитов в молоке, предусматривающий отбор проб молока, смешивание их с реактивом Фелингаи визуальное анализирование полученной смеси (1 J.

Недостатками этого способа являются низкая чувствительность и плохая воспроизводимость. 15

Наиболее близким к изобретению является способ определения количества лейкоцитов в молоке, предусматривающий отбор проб молока, смешивание их с аналитическим реагентом и 20 аналиэирование полученной смеси.

При этом в качестве аналитического реагента используют щелочной раствор фосфина Зй гидрохлорида (2). .Недостатками известного способа 25 являются низкая чувствительность и высокая погрешность.

Целью изобретения является повышение чувствительности и точности способа. 30

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения количества лейкоцитов в молоке, предусматривающему отбор проб молока, смешивание их с аналитическим реагентом и анализирование полученной смеси, в качестве аналитического реагента используют раствор флуоресцеиндиацетата с концентрацией 10—

-1G зм, пблученную смесь выдерживают 40 при комнатной температуре в течение

30-50 мин, и затем измеряют интенсивность ее флуоресценции, а определение количества лейкоцитов осуществляют по уровню интенсивности флуоресценции.

Способ осуществляют следующим образом.

Отбирают пробу молока и разбавляют ее буферным раствором (рН = 7,5, ионная сила =.0,15 М). К пробе добавляют раствор флуоресцеиндиацетата и выдерживают смесь в течение

30-50 мин, а затем на флуориметре определяют интенсивность флуоресценции, по которой судят о количестве лейкоцитов в молоке. Интенсивность флуоресценции нормального молока принимают. эа нулевую. С увеличением концентрации лейкоцитов в молоке интенсивность флуоресценции увеличивается.

Пример. Отбирают пробу исследуемого молока в количестве 1 мл, смешивают ее с 2 мл фосфатного буфера (рН = 7,5, y = 0,15 М), приливают 20 мкл раствора флуоресцеиндиацетата с концентрацией 5 10 M u выдерживают в течение 40.мин при 1820 С. По истечении этого времени

50 мкл смеси смешивают с 2 мл фосфатного буфера и определяют интенсивность флуоресценции на флуориметре. При этом длину волны возбуждающего излучения устанавливают равной

470 нм, а длину волны анализируемого излучения (флуоресценции) — 530 нм.

Для определения числа лейкоцитовстроят график: зависимости интенсивности флуоресценции от числа лейкоцитов, анализируя пробы молока с известным числом лейкоцитов (последнее определяют путем подсчета числа лейкоцитов под микроскопом).

Результаты определения количества лейкоцитов путем подсчета под микроскопом по известному и предлагаемому способам приведены в таблице.

1109641

Продолжение таблицы

1900

+++

2600

+++

3200

+++

<500

+ Количество знаков "+" пропорционально концентрации суспензии в смеси пробы молока с аналитическим реагентом.

Представленные данные показывают, что чувствительность предлагаемого способа в 2 раза, а точность в 3,5 раза выше, чем у известного способа.

Заказ 6022/29 Тираж 823 Под пи с кое

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035 Москва, Ж-35, Раушская наб, д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Составитель k.Фетисов

Редактор Г.Волкова . Техред Ж. Кастелевич Корректор M.максимишинец