Способ получения антитоксической сыворотки

Патент 1117058

Авторы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИТОКСИЧЕСКОЙ СЫВОРОТКИ путем иммунизации лошадей-продуцентов и взятия крови с последующим выделением сыворотки крови, отличающийся тем, что, с целью повышения активности целевого продукта , в крови продуцентов определяют содержание аутоантител к лизату эритроцитов и иммунизации подвергают лошадейпродуцентов , у которых отсутствуют ауто-антитела или степень положительной реакции микропреципитации по Уанье составляет 1-2 балла.

COI0S СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

3(511 А 61 К 39/02, 39/40

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ, Н ABTOPGHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3505460/28-13 (22) 26.10.82 (46) 07.10.84. Бюл. № 37 (72) В. В. Ермолов и Б. Н. Райкис (71) Ставропольский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток (53) 612.398 (088.8) (56) 1. «Регламент производства антитоксических сывороток», 12.04.66 (прототип). (54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИТОКСИЧЕСКОЙ СЫВОРОТКИ путем иммувЂ”,.SU„, 1117058 A низации лошадей-продуцентов и взятия крови с последующим выделением сыворотки крови, отличающийся тем, что, с целью повышения активности целевого продукта, в крови продуцентов определяют содержание аутоантител к лизату эритроцитов и иммунизации подвергают лошадейпродуцентов, у которых отсутствуют аутоантитела или степень положительной реакции микропреципитации (IO Уанье составляет 1 вЂ” 2 балла.

1}:,;(>lк >сlllt(«1(loc(,(ся !. мс,(I(((If(!c и к» с;<с (< 51 IIJ)«H3B«,(còâ»»1(гитокси<(сской сыI>OP«l К)1, ИРИМ IIH<. Мой ДЛЯ !C И .IiHH И ПРО(,!kl. lir I; i и«и;! н;I ) f)«()f1 l>!x it (3(f!cкиий.

11.co() полх чсния а((Сит<>кси tr C J>r r;I r .>r! .< r r K i((! X Г(,>! Jt Xf X(X>((kt3» ((ИИ Л О,!» rr ll (,(> .. с r«н с после,(ук)шим Вы,(ср»» !!1 с) Ill !»:.> J ° (« c Гfihlll <. ИОСОб н ;(»(1 !303Xl()cIx(Ir>< il! «ril«ЛдИ 1 Ь Об Hrv(!(X НО»О! J!×((к< ll lip! I I «1Н«с Гll ЖИВОТН!>IX Д;! Я (IO. (X н ния Вьгс«кс» к H(311013 антит()ксичсской l>IB«рс> гки.

1 (C, f f> п<«ор(. (C f1 f f H ((0(> f>f! 1((H k((> н«с ги цс,!Сн«п> пр«дукт».

>!»Л<1НП»Я (t(.,IЬ ДО Till cl(1(Я ГС)(, ITO

С «(. (с)(ll<) C ПОСС>С)>> I I«, (>> Ч !! r! 5! cl II 1 i!!ОКСИ и(.

CКОИ С ЫЬОP()! КИ Н) Т(Xl И >(>1 \!I i(3 I II HI(, l«lllc (ctt-продуцентов и Взятия к(и>ви с ш>слс ey<«! I((! )I Вhlд(. I(lll(CЧ (ЫЕ3«р«! I.r> К()r >В!(, В КJ)r)В(I .If!o Ц llr II I «(3 011Р<. ((,153K) I (« Ic l)!«, 10;Ill 1 Hòcë к,)из»т>, ->ри1.р«ц!«<)13 Il и,(.>1, низ»(ши подвергают !<»i!»дси-продуцснтов, у ко

ГОРЫ Х «T<"ч T< ТВ > I<) I »Ч (O;I (ITHTC. ((> It,lk! СТС ИСНЬ ((0.(0>k(HTCË!HI«é РС c!KI(H(l ЧИКРОПРСЦИ-!

lit (> 10!I(,H <>! ОбР;!3«Ч.

1 l

Гр нееихlмуниз»циеЙ ollpc ;(с;!HK)T со. е(ржание в крови аутоантител по отшипсf 1(3!0 к ли

3»тч»чтоэригроцитов и пр«гн<)лирчют В lip« ду!Icl(Ttl Тсх животных, у K«TOphlx HcслсдхC )(Ы(<»X ÒC>сl НТИТС,1с1 ОТСУГС Г(3 > IОТ, ñl В C, > Iсl(.

В ы я В, ((. н н я > ро в(> н ь и х н <. Н() е 13 ы н !» с т (13 у х

О», f,!0Á lr Р(. »КЦИИ (МИКРОН РСЦИПИТс! ЦИИ !10 х iilih(и ч«,еификации Н. H. Клсмп»рской.

/7/)f<,kf(./) /. Прогнозирование продуцентов»н.гитоксkl÷ccêOH сыворотки, н;)примеJ), „1Îll!

Н» срвом этапе на месте 3»г«тс)вки у

„IОН! <1, (lt, 01«С)Р» ННОI! IIO ПОКс>3»ТС.(ЯХI (J>kl 3Ис>л<и ической полноценности, берут 5 ч.(Kp()BH доо»вляют 1 мл 0%-ного рас1вор;! (штрат» натрия. Полу(сннуK) сх(есь Гш»гсль

НО нсрсчешивают и цснтрифуi ирук>т при

f000 ос>, х!Ин в течение 40 мин. П I;I 3 О Ц И Г Ы, O C T» B 1! I H C Ñ Я 13 I f) «()! t P KC I I «<.,i(<пс»сыв»ния плазмы, трижды Ilpo!IhIB»!oT

l!3«! «ll!l H < КИМ P»CTBOPOXt ИОЕ(<1Р(. !((l«ll O. IИ.

1!с. I(к;! ж. (01 0 llpOX(h(B» f! I(H с) с и I!ÇHK) эриТp«l(l1T«B I(ñ ((Грифугируют ири (000 об/х)ин

В т(чс!lite 15 мин. К нромытыч эритроцитам к«>»В,(5ll<> Еистиллированную воду до исx«}Hi )l с. >б (,с: » крови и цснтрифугирук>т

15 (ип нри 3Г)0() Об!чин, H»1îñ»,kî÷íóK! жидK«<. (I> < > С» h!13cl K) (И ИСПО, П>3 r К) Г (3 К а (ССТВ(.

;и(I ill СП».

l le(l3T

«> ГНОГО ll 1,7 чгl (истиллИрОВ»Н НОЙ BO 16(; K«!l I р«ль}, п<>чс п(»ют В кк)веты прибора с}».-.К t l 0! 13 H:31!с. J)HK>T не()13ОН;(ч;3,(ьн; к) li,!<)T!

r«<"r .h 3»T(! I3 KK)BCT1>! (ll. le(3!10(i Bir«C51 f

>!,! »НТИГ(. Нс((ЛИЗ»Т с! > Г«>f)И (J)«l:I! <>В I, .»(<((;Н»Я с Р»звсдс(IH>l 1: li)3(3(! с .1

ПОСЛЕ КажДОГО Р»ЗВЕДЕНИЯ 0(IP< (0.15.КП Jc,:нчину Ollтичсскоlf илoTH<>ñTll. И: и<>. ) <и иНЬ>. > I! H(j! }!«Bhl X TI X СТJ! «HT I Pc! <1! Il c<, ll cl к<пî )o>l илос>раж<и тся хс),(изчснс(<пи «и(ичс cкоЙ 11,1«TI(oc! ((и:>cl )исим<к1И <и сс);Ее PЖ в» ИИС 1(ИКР«>ПР(ЧШ П(т,!«I ичсску(о реактив-! с

I («Cl Ь ЛО III», (I I r>il K I J >r!. (>. I I((!Та. () ((C I! К> J!(< >, I J> Г;J I r! i Р(>С)<3, I, l I !I«il c 1!ÑTCX(C (вЂ” вЂ” вЂ”, -"- ) р(;(кц. 1fl ч и>;(r«ll()(. ll и и1 i! ilk(H НО Х>ci tihE В

;: ..Jlr!)ktKill(lil! 1l. 1 J. Клс чпарской

///>(О<(с/) 2..(Г(5! «I((нки имч) нологиче2; ск«lf рс »ктигн(«сти H(Ii(3«T!!hlx !10 иоказате, 5l"! i!<»кции чик(к>ирсl(51(fl! I »I!I!it были под-!

«(>I (ут(,! изу I(!IHI<) 1()5 10111»;I(й вЂ” вЂ” бу:еущих -;<>пор«(3 прспивсктолс)нячнс>Й сыворотки, (1;) с>сион»нии п«к I:«I(слсй содержания аут()»(:ти гсл 13 Kp«f3!I;I(> Отнснпсник> в лизату

2 с> е(у гоэри;pÎI(flт««;)0 жив«тных были расllP(. ((X(СНЬ(Hcl ДВС (Р>,ППЫ

К первой («ill>ITI! 0H I группе отнесены лс>ша Еи в коли н ствс 33 гс> IOB, у которых исслсдусчьи»x TodfiTJtTcла отсутствуют, а в случае выявления уровень их не превышает двуx б»л, l«B в рсакцlili чикро1IPcI! H IlH T» l(H H II« У» н ьс в модификации

H. Н. Клечпарской. <.}рс,(ний уровень аутош(титслообр»зования В !

0,5 б»лл». Ост»льные животные (17 голов), у которых индиви,!у»льныс показатели содсрж»ния;!у-.к>»ег! и Ге. I IIO отношению к ли3»ту»уэт«эри грс>ц(п Он оцс ниваются в 3вЂ”

<е б».1. (» Jl cр(, (и и Й I loк азат(.1 b рса кl(H I! микрс) нр 1(HI(If T» 1(HI" I! o Уа нье 3,() оалла, вклк)чсl!Bl В первую контроль:>у:«группу. (0

Вт«ру(О контрс>льнук> гру(ll! с"„с;-е!((ляют

»i) l«llli3дсЙ, с>тобр»ННЫХ .вЂ”,.IH . (С, I !! Iip«HÇ. н<>,kcTI3» прспивостс>лбнячной сын<;)< K:I f(. СТ»Х Зс3 Го! ОВКИ, 10 ИХ ФИЗИО I ) (И I< ".r!,1 нс)! !10!I(III!«còli согласнс> тр <)(>(3l! J) CД(, Н>НИ Я I I », 11! I l . 51 i " »I! l тел.

Вссстс>ронний»H».103 )(е!Тср.!» (ь(x

Р»1 и f3t>lx<) 1it >;>,.1!«!(i(I х

СОО»Х () бор;3,1«и)адеH 8 I. р», r(< l!1>J

ТИВОС10. l()IIH I НОИ СЫВОРОТКИ П(» .;>.3!. <»< ., ! < > на непр«изнод((гсльный llr ри}с(««:(О.к»вЂ” ния лош»дей пс. Кредл>1г»с м<;ч, (.:. :л!«< тНОММ СПОСОбс). 3<1 Т)! c!Ч !313»(Ãr,! I r. (! J;I .i C с < >3<>, количест(3о врсчени. Не>и<<с(:, ii, c

Во непроизводитсль(н>г« В(с"!(.;.: л; Гр;> и.55 вается при 0T(".орс !«ll!»1"н

l1o предлагаемому спосÎ(), <>)е. р: 111 !

1о известному способу врс,н>iH;::; lr, (;с>(,>(3КЧ;(0(3(»ÄCIJ В Ирод > цС! .Тh(iОЛЬШС B Сред(с» J2 0 .(:r

11170<)8

Op !3»I», (« tt:3x«eiIkte иммунологической

«продук(illill(>("! и» лошадей, oT00pdftllt tx

ПО ДВЧ31 i (1000()<131 13 iipo??) ??(.iitt>l (IPOTH(30сто t<>II&I 111011 сыворотки, установлеllo явное преимуп(с ство (!редла гас мого способа по сравн If(if<) С 11 3(3((.Tftt>t»t.

Гра!<п!!тес!! пая характеристика способов отбора лоп!адей в продуцепты противостолонячпой сыворотки приведена в таблице.

По з((3(.pifteftk(to подготовительного цикла гипериммупизации из состава опытной группы (животные (10 предлагаемому способу отобраны по низкому показателю аутоантителообразования) переведено в продуценты 32 лошади, что составляет 96 /<). Вместе с тем в первой контрольной группе выход в продуценты составляет всего 41 /р (7 лошадей) и среди животных (вторая контрольная группа), отобранных в хозяйствах по известному способу, этот показатель соста вл я ет 76 /О.

Использование предлагаемого способа отбора лошадей для целей сывороточного производства показывает, что гипериммунизация в подготовительном периоде резко стимулирует антитоксинобразование у 10шадей с минимальным содержанием в крови аутоантител. Так, средний титр столбнячного антитоксина по предлагаемому способу

952 МЕ/мл. В контрольных группах (первой и второй) накопление специфических антител протекает менее интенсивно и составляет соответственно 394 и 594 МЕ(мл.

При рассмотрении динамики накопления титра столбнячного антитоксина в период последуюшей гипериммунизацип ii0 предлагаемочу и известному способам отбора лошадей в продуценты его показатели Yàðàêòåðèçó(OTñÿ все улучшаюшимся качеством полученных сывороток вЂ” до

1059 МЕ/мл по предлагаемому способу на десяточ цикле. Титр антитоксина в груllll(. лоп адей, отобранных llo известному способу, в течение десяти циклов находился на уровне 594 вЂ 7 МЕ/мл.

В последуюьцих производственных цикlах гипериммунизации также отмечается более высокое содержание столбнячного антитоксина в группе лошадей, отобранных в продуценты по низкому уровню аутоантптелообразования tlo сравнению с живот1О ными, которые поставлены в продуценты fto известному способу.

Таким образом, иммунологическуf0 реактивность или перспективность лошадей (как буду(цих продуцентов противостолбнячной сыворотки) можно оценивать по колич cT(5 (3efIfto»y содержанию аутоантител в крови на местах их заготовки и к перспективныч продуцентам относить тех животных, у которых аутоантитела по отношению к лизату аутоэритроцптов отсутствуют или пх 00у держание не превышает двух баллов в реакции микропреципитации по Уа((ье в модификации H. H. Клех!царской.

Предложенный способ, разработанный на лошадях-продуцентах протпвостолбнячIIoI1 сыворотки, был приченен и li;1 группе вЂ”,>c, 101 iI<1. 10!i, П РС,I Il<(311l Д 1 1 II

i!fili оот 111!IOвь(ч ГОкс 1(но" 1 Г((п<" 1 ..

Таким обр(13031, »p(1л;1 ас;ы ;<>с««»:>жет быть It(пог!ь.<0<3(,ll » ): (. 1«><)!3;111 l.

1IP0.() П(цтоВ tP),i i 3>11<> .,>. (> "<> i< ;; >,(:;

СЬ!(30Р<>(ОК. ! 1<:ll() 1 Ь3013 < II<>«< >< «

i!0 01) (, l l> < >< >< (ll< l llli l(I !

3< .! i(! 1 » il (« " 0> l

l1Ð<>,131l(ГГI..

1 1t>li -) < .>. (<>I (1(>(. l 1)< !. 1С<>()(l, <>,: !i )(.(Е(11110 IIO 1101013!(Г(,11>но! (> Ц;! К,,;: !, ЧX < „>,lilt (131(К)т СРЕД! ип I Iftp;kiri!! (<» . 1:i.< !);)4 .Ч1: ч.(. 1331(<.T

5211 МЕ !л. тIf()("I

lie ðñ вед. но лошадс.й н !родуцеlf

Пт()() ) 1:.,) .!

I I11.I I O 1() шалей

В карин

lil l! ((1! I () I (1) 1 (. ((11 (1(. : 1() М 1 (( () (, I1() (,) () ты процент тельнотип гп периода

К():(11 ()((1(1)()

Ц(((I дей по завершен () нию да

1 . Предла гае(.(1 (й 50

96 111 952

66 33

33 тел

120 394

33 17

2. Регламентный 55 (вторая контрольная группа) 76

120 594

ЖИВОТНЫЕ с (шаким уровнем аутоантиживотные с высоким уровнем аутоантител (первая контрольная группа) !

$с(1()

I О. 1() fi

I I()(. та В.:(Оf10 1(а

fI() (! ()то- коливЂ” нитель- чество (Гшй 1(ЕI) I(()1I

Сосгавитель П. Ьонарцев

Редактор С. Саенко Техред И. Верес Корректор В. Бутяга

Заказ 7100/4 Тираж 687 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, )K вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент», r. Ужгород, ул. Проектная, 4, 1.1 I l i Т eÎ.: I h но(. Tb ! (ОДГО

ТОВИ, итр антитокси на в крови лошавЂ” подготовительного перио