Средство для консервирования спермы животных
Иллюстрации
Показать всеРеферат
СРЕДСТВО ДЛЯ КОНСЕРВИРОВАНИЯ СПЕРМЫ .ЖИВОТНЫХ, включающее разбавитель свежеполученной спермы и разбавитель для повторного разбавления спермы перед глубоким замораживанием , каждый из которых включает источник яичного желтка, лимоннокислый натрий, глюкозу и дистиллированную воду, отличающееся тем, что, с целью повышения активности и переживаемости спермы, разбавитель свежеполученной спермы дополнительно содержит аминазин, гликокол, окись этилена, трилон-Б и двузамещенный фосфорнокислый натрий, a в качестве источника желтка-центрифугат водной эмульсии яичного желтка при следующем соотношении компонентов, мас.%: Центрифугат водной эмульсии, яичного желтка14-18 Лимоннокислый натрий1,85-1,9 Глюкоза1,2-2,0 Аминазин 0,03-0,05 Гликокол0,15-0,2 Окись этилена 1,0-3,0 Трилон-Б0,08-1,1 Двузамещенный фосфорнокислый натрий0,08-1,0 Дистиллированная водаОстальное, a разбавитель для повторного разбавления спермы перед глубоким замораживанием дополнительно содержит аминазин, гликокол, окись этилена, глицерин, a в качестве источника яич ного желтка - центрифугат водной эмульсии яичного желтка при следующем соотношении компонентов, мас.%: Центрифугат водной эмульсии яичного 14-18 желтка Натрий лимонно1 ,7-1,85 кислый 3,0-3,4 Глюкоза Аминазин 0,025-0,05 0,08-0,1 Гликокол -.1,0-3,0 Окись этилена 14-16 Глицерин Дистиллированная Остальное вода
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
РЕСПУБЛИК
GQI ПИ
SU „А бР A 61 D 7/02
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ /
Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Центрифугат водной эмульсии яичного желтка
Натрий лимоннокислый
Глюкоза .
Аминазин
Гликокол
Окись этилена
Глицерин
Дистиллированная вода
14-18 1,7-1 S5
3,0"3,4
0,025-0,05
0,08-0,1 1,0-3,0
14-16
Остальное
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
Il0 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 1456787/30-15 (22) 06.07.70 (46) 30,11.84. Бюл. Ф 44 (72) Ф.И.Осташко и В.М.Зорин (7!) Научно-исследовательский ордена
Трудового Красного Знамени институт животноводства Лесостепи и Полесья УССР (53) 636. 082. 453. 5 (088 . 8) (56) 1. НИИЖ Лесостепи и Полесья УССР, Рекомендации по замораживанию и хранению спермы быков при температуре
196 С, с. 18-24. (54)(57) СРЕДСТВО ДЛЯ КОНСЕРВИРОВАНИЯ СПЕРМЫ, ЖИВОТНЫХ, включающее разбавитель свежеполученной спермы и разбавитель для повторного разбавления спермы перед глубоким замораживанием, каждый из которых включает ис- точник яичного желтка, лимоннокислый. натрий, глюкозу и дистиллированнуюводу, о т л и ч а ю щ е е с я тем, что, с целью повышения активности и переживаемости спермы, разбавитель свежеполученной спермы дополнительно содержит аминазин, гликокол, окись этилена, трилон-,Б и двузамещенный фосфорнокислый натрий, à s качестве источника желтка-центрифугат водной:. эмульсии яичного желтка при следующем соотношении компонентов, мас.й:
Центрифугат водной эмульсии, яичного желтка 14-18
Лимоннокислый натрий 1, S5-1,9
Глюкоза 1,2-2,0
Аминазин 0,03-0,05
Гликокол О, 15-0,2
Окись этилена 1,0-3,0
Трилон-Б О, 08-1, 1
Двуз амещенный. фосфорнокислый натрий . . 0,08-1,0.
Дистиллированная вода Остальное, а разбавитель для повторного pasбавления спермы перед глубоким замораживанием дополнительно содержит аминазин, гликокол, окись этилена, глицерин, а в качестве источника яичного желтка - центрифугат водной эмульсии яичного желтка при следую щем соотношении компонентов, мас.й:
1126295
Цель изобретения — повышение пе..реживаемости и активности разбавленной спермы, а также увеличение срока хранения разбавителя.
Указанная цель достигается тем, что средство для консервирования спермы животных, включающее разбавитель свежеполученной спермы и разба- 35 витель для повторного разбавления спермы перед глубоким замораживанием, каждый из которых включает источник яичного желтка, лимоннокислый натрий и глюкозу и дистиллированную 40 воду, разбавитель свежеполученной спермы дополнительно содержит аминазин, гликокол, окись этилена, трилон-Б и двузамещенный фосфорнокислый натрий, а в качестве источника желт- 45 ка — центрифугат водной эмульсии яичI ного желтка при следующем соотношении компонентов, мас.Ж:
Центрифугат водной эмульсии яичного 50 желтка 14-18
Лимоннокислый натрий
Глюкоза
Аминазин
Гликокол
Окись этилена
Трилон Б
1,85-1,9
1,2-2,0
0,03-0,05
О, 15-0,2
1,0-3,0
0,08-1,1
Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к консер вированию спермы быков.
Известно средство для консервирования спермы животных, содержащее разбавитель свежеполученной спермы и разбавитель для повторного разбавления спермы перед глубоким замораживанием каждый из которых включает
Ф источник яичного желтка, лимонно- 10 " ""у t"3.
Недостатком известного средства является то, что разбавитель не обладает достаточной стерилизацией, в ре" зультате не обеспечивает длительной 15 переживаемости спермы и сохранения ее активности.
Наличие в разбавителе макроскопических шариков яичного желтка затрудняет определение активности спер- 20 мы в разбавителе. При хранении спермы в первом разбавителе при О С снижается ее активность, а переживае-.c; мость составляет не более четырех суток. Срок хранения разбавителя сос-25 тавляет не более двух суток. фосфорнокислый натрий 0,08-1,0
Дистиллированная вода Остальное, а разбавитель для повторного разбавления спермы перед глубоким замораживанием дополнительно содержит аминазин, гликокол, окись этилена, глицерин, а в качестве источника яичного желтка — центрифугат водной эмульсии яичного желтка при следующем соотношении компонентов, мас.Ж: .Центрифугат водной эмульсии яичного 14-18 желтка
Лимоннокислый натрий
Глюкоза
Аминазин
Гликокол .Окись этилена
Глицерин
Дистиллированная вода Остальное
Для получения средства смесь яичного желтка с дистиллированной водой центрифугируют в результате чего получают яичный раствор, в котором
5-6Х яичных шариков выпадает в осадок.
Затем добавляют лиионнокислый натрий трехзамещенный п-водный (цитрат натрия) для осветления раствора, глюкозу, гликокол, трилон-Б (этилендиамии тетраацетат), натрий фосфорнокислый двузамещенный безводный, аминазин и окись этилена.
1, 70-1,85
3,0-3,4
0,025-0,05
0,08-0,1
1,0-3,0
14,0-16,0
1
Пример. В 80 мл дистиллированной воды, подогретой до 40-50 С. о и налитой в стерильный мерный сосуд, разбавляют 20 г яичного желтка, который тщательно перемешивают стерильной палочкой. Зту смесь отстаивают 30 мин, до полного растворения лецитина, а затем разливают в пробирки центрифуги и центрифугируют 10 мин .со скоростью 16 тыс. об/мин с сохранением лецитина и линопротеина. При этом в осадок выпадает 6 г белковых шариков.
Надосадочный слой сливают в стериль- ный мерный сосуд, в который добавляют
1,9 r цитрата натрия, который является хелатным агентом, активно связывающим кальций и тяжелые металлы и который расслаивает линопротеиды желтка, после чего смесь становится прозрачной.Затем в нее добавляют 1,2 r глюкозы, 0,2 r гликокола, 0,1 г натрия фосАлакислого двузаиещенного без3 водного, 0,05 r, аминазина, 1 г трилона-Б. Осматическое давление смеси составляет 8,2 рН при этом 6,8. Эту смесь заливают в ампулу и охлаждают до 0-4 С и при этой температуре охо лажденной пипеткой добавляют 3 r окиси этилена. Полученную таким образом первую среду тщательно взбалтывают и ставят в водяную баню при температуре 50-55 С на 15 ч. В течео ние этого времени окись этилена испаряется, уничтожая все микроорганизмы в окружающей среде. По истечении 15 ч ампулу запаивают.
Вторую среду разбавителя получают таким же способом, как и первую, с той разницей, что компоненты среды принимают в соотношениях, r:
Вода дистиллированная 70
Яичный желток 20
Цитрат натрия 1,7
Гликокол 0,07
Глюкоза 3,4
1126295
0,05
Таблица 1
Компоненты предлагаемом средстве для консервирования спермы
1 2 1 2 среда среда среда сред звестном
1 2 среда среда
Вода дистиллированная, г
20
3,4 1,2 3,3 3
1,2
Гликокол, r
0,07 0,2 0,06
0,2
0,4
Трилон-Б, r с
0,08
0,1
Йа2НРО
Глицерин, мл
16
3 1
Окись этилена, мл
Ф. 0,05::0,05
0 05. 0,05
Аминазин,-, в
Желток куриного яйца,г нитрат натрия, г
Глюкоза, г
Аминазин рН при этом — 6,9
В отличие от способа получения первой среды, при получении второй среды после центрифугирования добавляют 16 мл глицерина а натрий фосфорнокислый и трнлон-Б в нее не включают.
В табл. 1 и 2 показаны качествен10 ные показатели спермы при разбавлении ее данным средством при различных соотношениях компонентов, а также при использовании известного технического решения., 15 . Средство для разбавления спермы
; животных обладает высокой стерильностью, в результате срок хранения увеличивается до одного года.
Средство пригодно для хранения о спермы как при 0 С, так и при более низких температурах, и позволяет производить точное определенйе aicтивности спермиев в разбавителе.
Количество компонентов в
70 80 70 100 100
20 20 . 20 20 20
1 7 1 85 65 1 4 2 4
1126295
Т а б л и ц а 2
Показатели
Средство для разделения спермы
1 2 ) 3
Переииваемость спермы каждого разбавителя при .ф 38 5 С ч
17,3
24,3
10,1
0,8
0,8
0,8
Начальная активность
Активность после оттаивания
0,6
0,5
0,41
Йеревиваемость после а оттаивания Ф 38,5 С, ч
10,1
14,9
7,1
Оплодотворяющая способность после первого осеменения, Х
78,1
75,5
Перемиваемость спермыпри 0 C сут о
0,55Х
0,65Х
0,65Х
5,5 сут
5 сут
3 сут
Заказ 8585/5 Тиран 687 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, %-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4
Ю Составитель Е.Арская
Редактор Т.Митейко Техред Т.Маточка . Корректор А.Зимокосов