Гидрохлорид 3-(2-диэтиламиноэтилтио)-9-метил-1,2,4- триазино/6,5-в/ индола, обладающий противогипоксической активностью

Гидрохлорид 3-(2-диэтиламиноэтилтио)-9-метил-1,2,4- триазино/6,5-в/ индола, обладающий противогипоксической активностью

Реферат

 

Гидрохлорид 2-(2-диэтиламиноэтилтио)-9-метил-1,2,4-триазино(6,5-в)индола формулы обладающий противогипоксической активностью.

Данное изобретение относится к новому производному 1,2,4-триазино/6,5-в/индола, а именно к гидрохлориду 3-(2-диэтиламиноэтилтио)-9-метил-1,2,4-триазино/6,5-в/индола формулы I (I) обладающему противогипоксической активностью. Стуктурными аналогами соединения I являются производные 1,2,4-триазино/6,5/индола формул II и III [1,2] (II) и (III) Наиболее активным среди этих соединений является дигидрохлорид 3-этилтио-5-(2-диэтиламиноэтил)-1,2,4-триазино/6,5-в/индола (III), обладающий противовоспалительной активностью и повышающий устойчивость организма к гипоксии [1] Целью данного изобретения является увеличение активности в осложненных условиях гипоксической гипоксии и уменьшение токсичности. Поставленная цель достигается гидрохлоридом 3-(2-диэтиламиноэтилтио)-9-метил-1,2,4-триазино/6,5-в/индола формулы I, обладающим противогипоксической активностью, более выраженной по сравнению со структурным аналогом III в осложненных условиях гипоксической гипоксии, и менее токсичным, чем III. Способ получения соединения 1 основан на известной реакции алкилирования и заключается во взаимодействии 2,3-дигидро-9-метил-1,2,4-триазино/6,5-в/индолтиона-3 с гидрохлоридом 2-диэтиламиноэтилхлорида в присутствии избытка щелочи. Вещество формулы I представляет собой зеленовато-желтый кристаллический порошок, трудно растворимый в воде (растворимость 3,3%), нерастворимый в метиловом и этиловом спиртах при комнатной температуре, при нагревании легко растворим в этаноле, умеренно в метаноле. Вещество устойчиво при хранении, не гигроскопично. Вещество 1 однородно по данным тонкослойной хроматографии, для его очистки достаточна 2-кратная перекристаллизация. Условия тонкослойной хроматографии. Абсорбент окись алюминия, растворитель для нанесения хлороформ, подвижный растворитель бензол-спирт 7,5:1, R_f 0,78. Вещество как в видимом, так и в УФ-свете не содержит примесей, в том числе исходных веществ. Строение подтверждается данными элементного анализа, потенциометрического титрования щелочью в водном растворе, а также УФ-спектра. Пример. К раствору 4,16 г (19,4 ммоль) 2,3-дигидро-9-метил-1,2,4-триазино/6,5-в/индола в 560 мл 1 н. раствора едкого натра прибавляют раствор 4,4 г /2,75 ммоль/ гидрохлорида 2-диэтиламиноэтилхлорида в 24 мл воды и оставляют на ночь при комнатной температуре. Вскоре после смешивания из раствора выделяются мелкие желтые иглы продукта реакции. Фильтруют, осадок промывают ледяной водой /5х20 мл/ и сушат в вакууме над едким натром. Получают техническое основание 3-/2-диэтиламиноэтилтио/-9-метил-1,2,4-триазино-/6,5-в/индола, выход 5,82 г /96% от теории/, т.пл. 82^oC. По данным ТСХ исходное вещество отсутствует: адсорбент окись алюминия, растворитель для нанесения ацетон, подвижный растворитель бензол-спирт, 10:1, R_f 0,71. 5 г основания растворяют в 80 мл ацетона и при перемешивании насыщают полученный раствор газообразным безводным хлористым водородом. Выпавший осадок отфильтровывают, осадок промывают ацетоном /6x8 мл/ и сушат в вакуум-эксикаторе над хлористым кальцием. Получают соединение I в виде грязно-желтых кристаллов, выход 5,16 г, его очищают перекристаллизацией из метилового спирта /48 мл/г/ и получают в виде ярко-желтых кристаллов, т.пл. 266^oC. Выход при перекристаллизации 78% Найдено, C 54,15, 54,20; H 6,26; Cl 10,27, 10,42; N 19,79, 19,66; S 9,04, 9,33, M 355 (потенциометрическое титрование щелочью). С₁₅H₂₀ClN₅S. Вычислено, C 54,61; H 6,30; Cl 10,08; N 19,90; S 9,11. M 351,9. УФ-спектр в воде, _макс, нм/lg E/: 217/4,339/, 270/4,552/, 302/ пл. 3,769/, 336/3,994/, 430/3,286/, положение полос поглощения характерно для производных 1,2,4-триазино/6,5-o/индола с ароматическим строением триазинового ядра [2] Оценку и изучение противогипоксической активности соединения I проводили на двух моделях гипоксии: гипоксической и гемической. Гипоксическую гипоксию воспроизводили подъемом животных в барокамере с использованием приточно-вытяжной вентиляции на высоту 11 000 м. Наблюдение за испытуемыми животными вели в течение 45 мин с момента достижения заданной высоты. Регистрировали выживаемость животных в опыте и контроле (в). Гемическую гипоксию моделировали внутрибрюшинным введением 2%-ного раствора нитрата натрия в дозе 200 мг/кг. Кроме того, исследовали противогипоксическую активность соединения в осложненных условиях путем предварительного введения животным подкожно изадрина в дозе 80 мг/кг массы тела. Все опыты проведены на белых мышах-самцах, весом 18-22 г и крысах весом 180-210 г. Соединение I вводили внутрибрюшинно в дозе 12,5; 25; 50 и 100 мг/кг за 1 ч до моделируемой гипоксии в виде тонкой суспензии на твине-80. Контрольным животным вводили такой же объем физиологического раствора на твине-80. Результаты сравнивали с биологической активностью дигидрохлорида 3-этилтио-5/2-диэтиламиноэтил/-1,2,4-триазино/6,5-в/индола (III). В результате исследования установлено, что профилактическое введение соединения I в дозе 100,50 и 25 мг/кг защищает от гибели от 45 до 70% животных на высоте 11 000 м. 18-20% исследуемых животных погибает в первые 5-10 мин пребывания на этой высоте. Введение этого соединения в дозе 12,5 мг/кг позволило сохранить жизнь в течение 45 мин 60% исследуемых животных. Сопоставительный анализ полученных данных позволяет выявить некоторые преимущества соединения I по отношению к известному III. Так, если при гипоксической гипоксии обнаружена "защита" от гибели веществом III 50-45-60 и 70% исследуемых мышей в дозе 12,5, 25,50 и 100 мг/кг, то в тех же дозах вещество I "защищает" 60-70-70 т 80% животных, в то время как в контроле выживает лишь 10% исследуемых животных. Биологические испытания были обнаружено наличие защитного эффекта и на этом виде животных, хотя и менее значительного, чем на мышах. Так, выживаемость на высоте 12 000 м составила 65% в то время как у известного соединения III зарегистрировано 60% выживших крыс /P < 0,01/. В осложненных условиях исследовали активность не только соединения I, но и соединения III. В этой серии опытов крысам предварительно за 1 сут до подъема в барокамере вводили подкожно изадрин в дозе 80 мг/кг. В результате обнаружено, что животные, которым вводили вещество I, погибают значительно позже. Так, если после введения изадрина животные гибнут на высоте 12 000 м в течение 7,01,3 мин, то предварительное введение вещества I удлиняет им жизнь до 241,2 мин на той же высоте. Вещество III лишь восстанавливает длительность жизни исследуемых животных до уровня контрольных, т.е. 10 мин. Результаты определения противогипоксической активности на модели гемической гипоксии с нитритом натрия показали, что профилактическое введение вещества I в дозе 12,5, 25, 50 кг/кг увеличивает продолжительность жизни мышей соответственно до 37,43,4; 44,15,4; 46,64,8 мин. Соединение III в соответствующих дозах увеличивало длительность жизни до 404,6, 481,4 и 31,23,6 мин. Различия недостоверны при дозах 12,5 и 25 мг/кг, а в дозе 50 мг/кг достоверны при Р 0,05 /по критерию Пирсона "хи-квадрат"/ (табл. 2). Определение острой токсичности проводили на белых мышах весом 18-22 г при внутрибрюшинном введении вещества в виде тонкой суспензии на твине-80. Установлено, что LD₅₀ для соединения I в данных условиях составила 378,37,2 мг/кг. Статистическая обработка полученных данных проводилась по методу Беренса. LD₅₀ соединение III 1567,7 мг/кг [1] Таким образом, вещество I более активно при гипоксической гипоксии и проявляет высокую активность в осложеннных условиях в сравнении с известным соединением III /табл. 1 и 3/ и обладает меньшей, чем соединение III, токсичностью.

Формула изобретения

Гидрохлорид 2-(2-диэтиламиноэтилтио)-9-метил-1,2,4-триазино(6,5-в)индола формулы обладающий противогипоксической активностью.

РИСУНКИ

Рисунок 1