Способ получения сапогенинов

Способ получения сапогенинов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ САПОГЕНИНОВ путем измельчения корневищ диоскореи дельтовидной, обработки водными растворами ферментных препаратов, инактивации ферментных препаратов, кислотного гидролиза, нейтрализации, высушивания гидролизатов с последующим экстрагированием петролейным эфиром и отгонкой растворителя , отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и чистоты целевого продукта , сырье обрабатывают раствором ферментного препарата пентоаваморина П10Х из Aspergillus awamori или раствором ферментного препарата, полученного спиртоосаждением из культуральной жидкости высшего базидиального гриба Coriolus hirзцШз , при концентрации ферментных препаратов 0,9-1,1 мае. % в течение 3-24 ч при соотношении твердой и жидкой фаз 1:10.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

PECnYEiflHH

4(5D А 61 К 35 78

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3530990/13 (22) 28.12.82 (46) 23.05.85. Бюл. № 19 (72) К. М. Сытник, Н. И. Даниляк, Л. Г. Дудченко, В. С. Фонин и И. А. Трутнева (71) Институт ботаники им. Н. Г. Холодного и Всесоюзный научно-исследовательский институт лекарственных растений (53) 615.32(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР № 520986, кл. А 61 К 35/78, 1976. (54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ САПОГЕНИНОВ путем измельчения корневищ диоскореи дел ьтовидной, обработки водными

„SU„1156695 A растворами ферментных препаратов, инактивации ферментных препаратов, кислотного гидрол иза, нейтрал изации, высушива ния гидролизатов с последующим экстрагированием петролейным эфиром и отгонкой растворителя, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и чистоты целевого продукта, сырье обрабатывают раствором ферментного препарата пентоаваморина П IOX из Aspergil lus awamori или раствором ферментного препарата, полученного спиртоосаждением из культурал ьной жидкости высшего базидиального гриба Coriolus hirsutus, при концентрации ферментных препаратов 0,9 — 1,1 мас. % в течение 3 — 24 ч при соотношении твердой и жидкой фаз 1:10.

1156695 выход диосгенина, Наличие дианов

Способ обработки

140, 2

151,0

Asp. Aqamori

С. пггзоснз

Контроль:

Без ферментативной обработки (по предлагаемому способу

100,0

136,5

Ilo известному способу

Н р и м е ч а н и е: + 0,3-0,57, ++ До 17., +++ Более 27, 0 отсутствие.

Составитель Н. Гуляева

Техред И. Верес Корректор Е. Рошко

Тираж 722 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Редактор Л. Зайцева

Заказ 3218/5

Изобретение относится к медицинской промышленности и может быть использовано для получения лекарственных веществ из растительного сырья.

Целью изобретения является повышение выхода и чистоты целевого продукта.

Пример 1. Сырье — измельченные корне ви ща диос коре и дельтовид ной (на веска

1 г, диаметр частиц 2 мм) заливали 10 мл ферментного препарата пектоаваморина

П10Х из Aspergillus awamori. Дозировка препарата 1 мас. Я на абсолютно сухое вещество, рН раствора около 5,0. Инкубацию проводили 13,5 ч, при 40 С в термостате.

Инактивацию ферментов и последующий кислотный гидролиз проводили с обратным холодильником при добавлении к раствору

2 мл концентрированной соляной кислоты в течение 2-х ч при 115 С на глицериновой бане. Гидрол изаты корневищ отфильтровывали через бумажный фильтр, осадок на фильтре, содержащий сапогенины (диосгенин), 20 промывали водой (25 мл), 5Я-ным раствором аммиака (20 мл), снова водой (10 мл) и сушили при 60 С в течение 10 — 12 ч.

Диосгенин извлекали из осадка петролейным эфиром (фракция 40 — 70 С) в аппарате

Сокслета в течение 24 ч. Экстракты сгущали досуха, остаток диосгенина количественно растворяли спиртом в определенном объеме.

Содержание диосгенина определяли на фотоэлектроколориметре при 530 нм.

Выходсапогенинов (диосгенина) с применением пектоаваморина П10х составлял

4,35 мас. Оо на абсолютно сухое вещество при ферментации в течение 13,5 ч. При тонкослойной хроматографии целевого продукта в опытном варианте не выявлено побочных продуктов в сравнении с известным способом и вариантом без ферментативной обработки сырья.

Пример 2. То же, что в примере 1, но инкубацию сырья проводили ферментным препаратом, полученным из гриба Coriolus

hirsutus, выращенного глубинным способом в течение 120 ч. Ферменты осаждали спиртом из культурального фильтрата с последующей лиофилизацией. Дозировка препарата

1 мас. Я на абсолютно сухое вещество, рН раствора около 5,0. Инкубацию проводили

13,5 ч при 40 С в термостате. Инактивацию ферментов и последующий кислотный гидролиз проводили с обратным холодильником при добавлении к раствору 2 мл концентрированной соляной кислоты, в течение 2-х ч при 115 С на глицериновой бане. Гидролизаты корневищ отфильтровывали через бумажный фильтр, осадок на фильтре, содержащий аногенины (диосгенин), промывали водой (25 мл), 5Я-ным водным раствором аммиака (20 мл), снова водой (10 мл) и сушили при 60 С в течение 10 — 12 ч. Диосгенин извлекали из осадка петролейным эфиром (фракция 40 — 70 С) в аппарате Сокслета в течение 24 ч.

Экстракты сгущали досуха, остаток диосгенина количественно растворяли спиртом в определенном объеме. Содержание диосгенина определяли на фотоэлектроколориметре при 530 нм.

Выход сапогенинов (диосгенина) с применением ферментного препарата из Coriolus

hirsutus составлял 4,72 мас.оА, на абсолютно сухое вещество при ферментации 13,5 ч.

При тонкослойной хроматографии целевого продукта в опытном варианте не выявлено побочных продуктов в сравнении с известным способом и вариантом без ферментативной обработки сырья.

Влияние ферментативной обработки корневищ диоскореи на выход диосгенина приведено в таблице.

Как видно из да нных, представленных в таблице, предлагаемый способ позволяет повысить выход и чистоту . целевого продукта.