Способ определения @ -рецепторов нейтрофилов человека

Способ определения @ -рецепторов нейтрофилов человека

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ FC-PEЦЕПТОРОВ НЕЙТРОФИЛОВ ЧЕЛОВЕКА включающий смешивание суспензии нёйтрофилов с частицами носителя, покрытого антителами, с последующим уче том кле ток, ев я завших частицы, отличающийся тем, что, с целью .упрощения и ускорения определения , в качестве частиц носителя антител используют взвесь стафилококков штамма Staphylococcus aureus № 141 (депонирован в ГНИИСКМБП им. Л.А.Тарасевича под № 120), а в.качестве антител для обработки используют антитела класса IgG к стафилококку.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

„„SU„„3 158932 А

«„G 01 Н 33/54

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3505462/28-13 (22) 28,10.82 (46) 30.05.85. Бюл. №- 20. (72) А.Н.Иаянский, P.À.Ïàðøàêîâà и Е.Г.Зеленова (71) Горьковский государственный медицинский институт им. С.М.Кирова и Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии (53) 615. 375 (088. 8) (56) "Blood" 1979, с. 53, 6, 1106-1113 (прототип). (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ FC-РЕЦЕПТОРОВ НЕИТРОФИЛОВ ЧЕЛОВЕКА, включающий смешивание суспензии нейтрофилов с частицами носителя, покрытого антителами, с последующим учетом клеток, связавших частицы, отличающийся тем, что, с целью .упрощения и ускорения определения, в качестве частиц носителя антител используют взвесь стафилококков штамма Staphylococcus aureus

¹ 141 (депонирован в ГНИИСКМБП им. Л.А.Тарасевича под № 120), а в качестве антител для обработки используют антитела класса ZgG к стафилококку.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ -

Согласно предлагаемому способу проведено изучение Fc — рецепторов нейтрофилов у 2! здорового донора в возрасте 20-40 лет.. Средний показатель составил 35,3+3,6X. Число

Fc ïîýèòèâíûõ нейтрофилов у здоровых людей составляет 19-80%. Самый низкий показатель (197) отмечен в опытах с IgG человека (по прототипу), Зо в остальных случаях. использовали

IgG-антитела кролика.

При реализации предлагаемого способа длительность анализа сокращается в два раза.

Составитель П.Бонарцев

Редактор С.Тимохина Техред C éoâæèé Корректор А Зимокосов с

Заказ 3579/44 Тираж.897 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г.Ужгород, ул,Проектная, 4

1 1l

Изобретение относится к медицине и может бьггь использовано при опре- . делении функционального состояния. нейтрофилов при патологических сос-. тояниях организма.

Целью изобретения является упрощение и ускорение определения Fcрецепторов нейтрофилов.

Способ осуществляется следующим образом.

Проводится оценка Fc-рецепторов нейтрофилов у исследуемого донора.

В стерильных условиях из вены получают 2,5 мп крови. Нейтрофилы выделяют путем центрифугирования в гра диенте плотности (1, 114 г/см ) .4чколл-верографин. После двухкратного отмывания раствором Хенкса (общий объем 20 мл) клетки ресуспендируют в растворе Хенкса, содержащем 27 альбумина. Конечная концентрация нейтрофилов — 20 млн клеток/мл. Все манипуляции проводят в силиконированной стеклянной посуде. Вакцину стафилококка (Staphylococcus aureus М 141), 5 млрд клеток/мл, в объеме 0,2 мл смешивают с 0,2 мл фракции IgG-иммуноглобулинов человека (10 мг/мл), инкубируют 30 мин при 37, трижды отмывают физиологическим раствором (общий объем 15 мл) при 500 g и взвешивают в растворе Хенкса,,конечная концентрация — 5 млрд клеток/мл, В силикониров анных пробирках

58932 2 смешивают по 0,1 мл нейтрофилов и IgG-обработанных стафилококков.

В контроле используют стафилококко-.

syro вакцину, необработанную IgG

После инкубации 30 мин при 37 в пробирки добавляют 10 мл раствора Хенкса, центрифугируют при 200 g и нз клеточного осадка готовят мазки, которые фиксируют метанолом н окраши-!

0 вают по Романовскому. Просматривают

100 нейтрофилов, из них отмечают чис. ло клеток, содержащих более 5 стафилококков. Результат: в .опыте — 357, в контроле - 37.. Отсюда число Fñ1S позитивных. нейтрофилов составляет

327. (35-3-32). Полученные результаты согласуются с известными данными, где число Fc-позитивных нейтрофилов у здоровых людей составляет 19-80%.