Штамм ацидофильных метилотрофных бактерий @ @ всб-924- продуцент белка
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Штамм ацидофильных метилотрофных бактерий Acetobacter methylicum ВСБ-924(коллекция Центрального музея промышленных микроорганизмов ВНИИгенетика , коллекционный номер ЦМПМ В-2942) - продуцент белка.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ рА, с< Й:
° улаф
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
IlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3695262/28-13 (22) 27.01.84 (46) 30.09.86. Бюл. II 36 (7 1) Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ (72) Э.М.Диканская, В.П.Куликова, Н.А Тюхина, В.Н.Яшина, П.Н.Фишер, Д.И.Вольфович, Б.М.Шварцкройн, В.Е.Загребельная и Ж Ф.Шершнева
1 (53) 577.17 (088.8) „„SU„„1163636 А (51) 4 С 12 N 1/32, 15/00, 1/20, R (54) ШТАММ АЦИДОФИЛЬНЫХ ИЕТИПОТРОФНЫХ БАКТЕРИЙ ACETOBACTER NETHYLICVN
ВСБ-924-ПРОДУЦЕНТ БЕЛКА (57) Штамм ацидофильных метилотрофных бактерий Acetobacter methyticum
ВСБ-924(коллекция Центрального музея промышленных микроорганизмов ВНИИгенетика, коллекционный номер ЦМПМ
В-2942) — продуцент белка.
1163636
Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается. нового штамма ацидофильных метилотрофных бактерий - продуцента биомассы на основе метанола.
Получение микробной биомассы на основе метанола - один из эффектных путей обеспечения народного хозяйства и, в первую очередь, животноводства белково-витаминными концентратами.
Цель изобретения состоит в селекции нового штамма ацидофильных метилотрофных бактерий, способного развиваться при повышенной температуре и расти на средах в метанолом при температуре 34-36 С, обеспечивая выход биомассы, рувный 40-507 к saданному метанолу.
Предлагаемый штамм метанолокисляющих бактерий Acetobacter methy1icum
ВСБ-924 выделен из спонтанного микробного комплекса, образующегося в процессе ферментации метанола ацидофильными метанолокисляющими бактериями в нестерильных условиях, и далее селекционирован в процессе длительного пассирования на средах с мета" иолом, Штамм Acetobacter methy1icum BCB924 характеризуется следующими признаками.
Морфологические признаки.
Клетки штамма прямые, короткие палочки, одиночные или соединенные попарно, редко образуют короткие цепи.
Размеры клеток на синтетической среде 0,8-1,0 «1, 1 -1,6 мкм.
Бактерии грамотрицательные, подвкжные, спор не образуют.
Колонии на минеральной среде с метанолом округлые, гладкие, выпуклые е блестящей поверхностью и ровным краем, не прозрачны, серо-белого цвета, вязкой консистенции, диаметром 1-2 мм.
Физиологические и культуральные свойства.
Факультативный метилотроф. Из С—
1 соединений использует метанол, не использует метиламин, диметиламин, триметиламин; из сахаров использует глюкозу, сахарозу, не использует галактозу, ксилозу, лактозу, мальтозу, рамнозу; из,спиртов, кроме метанола, использует глицерин и.с1або этанол, не использует.пропанол, изо-пропанол, н-бутанол, изобутанол, изоамиловйи, маннит, дульцит; из органических кислот использует ацетат, слабо пируват, сукцинат, не использует формиат, ок5 салат, лактат, пропиоиат, бутират, фумарат, малат, малеат,a(-кетоглутарат, цитрат.
На мясо-пептонном агаре не растет.
10 На средах с желатиной не растет и желатину не разжижает.
Нитраты в нитриты не восстанавливает.
К брожению не способен.
Тесты на оксидазу каталаэу положительные.
Для роста нуждается в пантотено20 н вои кислоте, которая может быть заменена автолизатом или другими содер жащнми ее источниками. При незащищен. ной ферментации в присутствии небольmoro числа неметилотрофных спутников
25 может расти без добавок пантотеновой кислоты. Штамм чувствителен к типовому фагу МО-1 и устойчив к окситетрациклину.
В нестерильных условиях штамм устойчив к инфицированию посторонней микрофлорой.
Штамм хорошо сохраняется в лабораторных условиях на агаризированных средах с метанолом..
Бактерии относятся к облигатным аэробам, хорошо растут на синтетических средах с метанолом, содержащих источники азота, фосфора, микроэлементы и другие минеральные компо-, ненты, при низких значениях рН среды
2,0-6,0, максимальный рост при рН 3,5-5,0, при рН 6,9 рост отсутствует.
Штамм развивается при температуре
45 28-57 С, оптимальная температура росо та 30 ЗбсС
При оптимальной температуре штамм растет со скоростью 0 21 ч ", выходом биомассы к заданному метанолу
40-50 и содержанием белка 70-76Х.
Штамм непатогонен.
Пример 1. Штамм бактерий
$cetobacter methy1icum ВСБ-924 выра. щивают непрерывным способом в несте55 рильных условиях в ферменте обьемом 0,8 м при 34 С на минеральной среде с рН 4,0 следующего состава, г/кг сухой биомассы:
1163
20
Редактор О.Юркова Техред A.Кравчук Корректор А.Тяско
Заказ 5266/2 Тираж 490 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5
Производственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная,4
Н PO 60,0
МАМБО 7Н О 24,6
КС1 26,7
CuS0, 5H О 0,235
CoS0 ° 7Н О 0,24 5
МпБ0,1 5Н О 0 51
ЕеБО 7Н О О, 99
НАВОЗ 0 52
Ма МоО 0,08
ЕпБО 7Н О 0,4
Содержание метанола в приточной среде 115 кг/м . Источником азота служит раствор аммиака, который одновременно используют и для поддержания рН на заданном уровне. Непре- 15 рывное выращивание осуществляют при скорости протока 0,16 ч. Выход биомассы составляет 50 ОХ .к заданному метанолу. Биомасса содержит до 77Х сырого протеина.
П.р и м е р 2. Штамм бактерий
Acetobacter methy1icum ВСБ-924 выращивают таким же способом и на такой же среде, как в примере 1, но при температуре 36 С, содержании метано.- !5 ла в приточной среде 144 кг/м и скорости протока 0,12 ч . Выход биомассы составляет 45,5Х к заданному метанолу. Биомасса содержит.70,27 сырого протеина. 30
Пример 3. Штамм бактерий
Acetobac ter methy1icum ВСБ-924 выращивают таким же способом и на такой же среде, как в примере 1, но .в фер636 ментере объемом 30 л, содержании ме-, танола в приточной среде 38 кг/м, скорости протока 0 21 ч при температуре 30 С. Выход биомассы от заданного метанола составляет 42Х и содер. жание сырого протеина 74Х.
Пример 4. Штамм бактерий
Acetobacter methy1icum ВСБ-924 выращивали периодическим способом в колбах на качалке при температуре
30 С, рН среды 4,0 на минеральной среде следующего состава, г/л:
NHHРО, 20 (NH ) НРО 0 5
МАМБО, 0,2
К БО 0,2
Раствор микроэлементов (0,5 л), содержащий, г/л:
KI 0,02
Н ВОз 0,02
МйБО 5Н О 0,02 (NH<)2 Мо04 0,02
РеБО„ 0,1
Метанол вйосят в среду в количестве 5 мл/л. В среду добавляют дрожжевой автолизат в количестве 2 мп/л.
После 2 суток роста выход биомассь ,от заданного метанола составляет 40Х.
Пример 5. Штамм бактерий
Acetobacter methy1icum ВСБ-924 выраз щивают таким же способом и на такой же среде, как и в примере 4, но при температуре 37 С. Выход биомассы от заданного метанола составляет ЗОХ.