Способ количественного определения цистеина
Иллюстрации
Показать всеРеферат
СПОСОБ КОЛтЕСТВЕННОГО OlfPEДЕЛЕНИЯ ЦИСТЕИНА путем обработки анализируемой пробы цветореагентом с последующим фотометрированиемполученного раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и сокращения длительности определения, в качестве цветореагента используют раствор N-xлop-1,4-бензохинонимина в изопропаноле и обработку ведут в среде универсального буферного раствора с рН 9,0. (Л с
C0IO3 СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (19) (1I) (s»4 G 01 N 21/78
5I. Ъ|- !
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3714318/23-04 (22) 22 ° 03.84 (46) 23.07.85. Бюл. 1(- 27 (72) С.С.Артемченко и В.В.Петренко (7 1) Запорожский медицинский институт (53) 543.42.063(088.8) (56) 1. Сиггиа С., Ханна Дис.Г, Количественный органический анализ по
tt 1! функциональным группам. М., Химия
1983, с. 540-541.
2. Коренман И.M. Фотометрический анализ. Методы определения органичес= ких соединений. N., "Химия", 1975, с. 291 (прототип).
3. Лурье Ю.Ю. Справочник по анали-!! !! тической химии. Изд. 5-е. М., Химия
1979, с. 3 1 2. (54) (57) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИСТЕИНА путем обработки анализируемой пробы цветореагентом с последующим фотометрированием- полученного раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения чувстви тельности и сокращения длительности определения, в качестве цветореагента используют раствор Й -хлор-1 4-бензохинонимина в изопропаноле и обработку ведут в среде универсального буферного раствора с рН 9,0.
1168834
Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения цистеина 1-амино-2 -меркаптопропионовой кислоты, применяемого в медицинской практике для задержки развития катаракты и просветления хрусталика глаза.
Известен способ количественного определения цистеина потенциометрическим титрованием с серебряно-суль- 1о
Фидным электродом в 0,1 М растворе гидроксида натрия и .
Недостатком способа является низкая чувствительность (12 мкг).
Наиболее близким к изобретению по.15 технической сущности и достигаемому результату является способ количественного определения цистеина, заключающийся в обработке анализируемой пробы 0,5 мл 0,02 И раствора тетра- 20 хлорпалладата аммония в 1 н, хлористоводородной кислоте с последующим измерением (через 1 ч) величины оптической плотности при 350 нм 2 .
Недостатками способа являются от- 25 носительно невысокая чувствительность (2.,33 мкг/мл) и большая продолжительность анализа (более 1 ч).
Целью изобретения является повышение чувствительности и сокращение gp длительности определения.
Поставленная цель достигается тем, что согласно способу количественного определения цистеина путем обработки анализируемой пробы раствором 0-хлор35
-1,4-бензохинонимина в изопропаноле в среде универсального буферного раствора с рН 9,0 и последующим фотометрпрованием полученного раствора, в качестве цветореагента раствора И-хлор-1,4-бензохинонимина в изопропаноле и обработку ведут в среде универсального буферного раствора с рН 9,0, Универсальный буферный раствор описан в f3) .
° °
Пример. Количественное опрееление цистеина в субстанции. Навеску цистеина в пределах 0,015-0,025 г растворяют в воде в мерной колбе 50 вместимостью 200 мл и доводят до мет- ки тем же растворителем. 2 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют
3 мл О, 1Е-ного раствора N-хлор-1 4" 55
-бензохинонимина в изопропаноле и доводят до метки универсальным буфер" ным раствором с рН 9,0. Параллельно проводят опыт со стандартным раствором цистеина и контролем. Через
15 мин измеряют оптическую плотность анализируемых растворов на фоне контроля при помощи спектрофотометра при
423 нм в кюветах с толщиной слоя
1 см.
Расчет количественного содержания цистеина проводят по формуле
D 2500 Со
C Å = где D — оптическая плотность анализируемого раствора, 9 — оптическая плотность стано дартного спектрофотометрируемого раствора
С вЂ” концентрация стандартного спектрофотометрируемого раствора (0,0008 г в 100 мл);
p — навеска, г
1 — толщина слоя, см.
Результаты количественного определения цистеина в субстанции приведены г в табл.1.
Таблица 1
Навеска,г Найдено,X Метрологичес-: кие характеристики
0,0187
98,97 х=99,49
0,0220
0,0188
99,02
99,49
S=0 4313
Sv =0,0043
0,0200
0,0214
99,64
100,iO
0,0209
99,70
Сравнительная характеристика предлагаемого способа и известного приведены в табл.2.
Т а б л и ц а 2
Характеризуемы показатель
Способ звест- Предлагаеый MblH
Чувствительность, мкг/мл 2,33
0,71
Продолжительность анализа, мин
1168834
Составитель С. Хованская
Редактор А.Шандор Техред Д.Микещ Корректор М.Самборская
Заказ 4608/37 Тираж 897 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4!5
Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная, 4
Как видно из табл.2, величина чувствительности данного способа выше, чем у известного более чем в
3 раза. По технике выполнения данный способ требует в 4 раза меньших временных затрат на проведение анализа.