Способ определения индивидуальной реактивности больного на лекарственный препарат

Способ определения индивидуальной реактивности больного на лекарственный препарат

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНДИВИДУАЛЬНОЙ РЕАКТИВНОСТИ БОЛЬНОГО НА ЛЕКАРСТВЕННЫЙ ПРЕПАРАТ путем определения активности ферментов лимфоцитов цитохимическим методом, отличающийся тем, что, с целью упрощения и ускорения способа , к монослою лимфоцитов, вьщеленных из крови больного, добавляют исследуемый препарат в терапевтических дозах, далее смесь культивируют при 36-J8 C в присутствии 10%-ной сыворотки крови человека N группы крови и по изменению активности ферментов в культуре с лекарственным веществом и в контрольной пробе i определяют индивидуальную реактивность больного на лекарственный СЛ препарат.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

PECflVSËÈН (S I) 4

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ

e aecocceoec ceeeEceocccev

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТЮ (21) 3729147/28-13 (22) 29. 04. 84 (46) 07.08.85. Бюл. У 29 (72) E.È.Ñîêoëîâ, П.В.Глан и Е.И.Казначеева (71) Московский ордена Трудового

Красного Знамени медицинский стоматологический институт им. Н.А.Семащко (53) 615.475 (088.8) (56) Филимонов Ф.Г. Цитохимическая оценка действия лекарственных препаратов на клетки крови. Дис. канд. мед. наук. М.: ММИ, 1974. (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНДИВИДУАЛЬНОЙ РЕАКТИВНОСТИ БОЛЬНОГО

„„SU„„117169

НА ЛЕКАРСТВЕННЫЙ ПРЕПАРАТ путем определения активности ферментов лимфоцитов цитохимическим методом, отличающийся тем, что, q целью упрощения и ускорения способа, к монослою лимфоцитов, выделенных из крови больного, добавляют исследуемый препарат в терапевтических дозах, далее смесь культивируют при 36-38 С в присутствии 10Х-ной сыворотки крови человека 1ч группы крови и по изменению активности ферментов в культуре с лекарственным веществом и в контрольной пробе определяют индивидуальную реактивность больного на лекарственныйпрепарат.

1 1171

Изобретение относится к области медицины, а именно цитохимии, и может быть использовано для оценки индивидуальной реактивности больного на лекарственное вещество по изменению активности дегидрогеназ лимфоцитов.

Цель изобретения — упрощение и ускорение способа, Способ осуществляется следующим ц} образом.

Гепаринизированную кровь из вены наслаивают на смесь фиколла и веро- . графина, центрифугнруют при

1400 об/мин в течение 35 мин. На границе плазмы и rpадиента собирается клеточный осадок, который состоит из мононуклеарных клеток. Клетки собирают .пастеровской пипеткой, двжкды отмывают в фосфатном.буфере

20 (рН 7,2-7,4), затем ресуспендируют в среде 199 с добавлением 10Х-ной сыворотки крови человека 1V группы, достигая концентрации 0,5 млн./ил.

Взвесь клеток в питательной.средне разливают в пенициллиновые флаконы, на дне которых находятся обезжиренные покровные стекла, предваритель- . но покрытые слоем формвара (0,2X" ный раствор .в дихлорэтане), обеспечивающего прилипание всех мононуклеаров. Все флаконы разделяют на несколько групп, в каждую иэ которых последовательно добавляют лекарственное вещество в исследуемой дозе в 0,1 мл среды 199. В контрольную группу

35 вместо лекарства добавляют 0,1 мл среды 199. Через 1 ч инкубации при

36-38 С стекла осторожно вынимают, высушивают на воздухе и фиксируют в смеси ацетона и трилона Б (рН 5,0) в течение 30 с.

Готовые препараты микроскопируют в тот же денЬ или на следующее утро, но не позднее, чем через 16-20,ч после их приготовления. Результат выражают в виде среднего числа гранул формазана в одном лимфоците.

Всего просчитывают не менее 50 лимфоцитов.

С использование предлагаемого способа изучено действие нового имиуностимулирующего препарата — кемантана на активность сукцинатдегидрогенаэы лимфоцитов больных неспе- 5$ цифическими заболеваниями легких.

Эксперименты показали, что он обладает способностью стимулировать ry691 2 моральный и клеточный иммунитет у животных, ослаблять иммунодепрессивное действие цитостатиков, однако нет данных о влиянии этого препарата на метаболизм лимфоцитов человека.

Полученные результаты представлены в таблице.

Из таблицы видно, что кемантан в подавляющем большинстве случаев в выбранном спектре доз вызывает стимуляцию активности .сукцинатдегидрогеназы в лимфоцитах. При этом очевидно, что реакция лимфоцитов, полученных от разных больных, не одинакова, у одного иэ 1 1 стимуляция отсутствовала, у остальных она была количественно различной, причем оптю альная стимуляция регистрировалась в каждом отдельном случае нри определенной дозе в зависимости от индивидуума.

Использование изобретения позволило выявить ценное свойство кеманта" на — вызывать стимуляции активности сукцина — дегидрогеназы, а также выявить различную индивидуальную реактивность лимфоцитов больных неспецифическими заболеваниями легких на кемантан.

Пример. Больной С. находился под наблюдением по поводу обострения хронической пневмонии стадйи, инфекционно-аллергической бвонхиальной астмы. В лнмфоцитах данного больного выявлено снижение активности сукцинатдегидрогенаэы. С использованием предлагаемого способа исследова" на чувствительность лимфоцитов этого больного к иммуностимулирующему пре- парату — кемантану. Выявлено, что в дозах 40-10 /мл кемантан вызывает

Ь стимуляцию активности сукцинатдегидрогеназы. Больному проведен курс терапии кемантаном, в .результате чего активность этого фермента увеличилась, что сопровождалось выраженныи клиническим эффектом.

Предлагаемый способ дает возмож" ность установить исходный ферментный статус больного до начала лечения, позволяет выявить вне организма стимулирующее или угнетающее действие предлагаемого лекарственного препарата на метаболизм лимфоцитов больного, дает воэможность выявить лекарственный препарат, способный стимулировать клеточный метаболизм конкретного больного, позволяет подобрать дору препарата, необходжую дпя дости3 1171691 4 ження максимального лечебного эффек- экспресс-метода для оценки индивидута у конкретного больного. альной реактивности больного иа лекарственный препарат, что обпегчает

Основные отличия предлагаемого лечение больньк, устранит аллергиспособа и его преимущества дают воэ- g ческие реакции и их тяжелые последможность применять его в качестве ствия

Фамилия больного Контроль Концентрация кемантана, мкг/мл

80 40 20 10 5

18,03 17,99 21,30 21,90 f9,73 22,93. Ч-ва

22,10 22,30. 20,90 20 23 21,53 t9 56

А-ев.19 40 t7 20 15 86 17 50 20 90 22 83

18, 76 19, 68 19в 73 22 ° 43 24э 03 22>73

Ф-ов

У-ов

16,70 16,90 17,83 18,46 17,40 19,00

3-ва

16 27 19 40 19 40 19 77 19 33 19 80

И-ин

t3 43 12 80 12 ?3 15 73 14 63 11 80

К-ев

14 60 13 80 16 90 21 40 15 83

15,53

М"ин

16,38 16,20. 18,08 16,16 15,62 16,30

1790 . 1930 2013 1823 1683 1630

К-ин

А-ин

11,82 13,20 12,42 14,14 15,26 15 ° 14

С-ов

Составитель Т.Журавкина

Техред С.йовжнй Корректор А.Тяско

Редактор Л. Зайцева

Закаэ 4854/36 Тираж 897 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам иэобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4