Способ определения иммунопатологического фактора олигозооспермии у больных простатитом и везикулитом

Способ определения иммунопатологического фактора олигозооспермии у больных простатитом и везикулитом

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

1. СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИММУНОПАТОЛОГИЧЕСКОГО ФАКТОРА ОЛИГО-ЗООСПЕРМИИ У БОЛЬНЫХ ПРОСТАТИТОМ И ВЕЗИКУЛИТОМ путем выявления иммуногло-;. булинов класса А в семенной жидкости отличающийся тем, что., с целью повышения точности способаи сокращения времени исследования, из семенной жидкости выделяют сперматозоиды и выявляют дополнительно иммуноглобулины класса М, 6 непосредственно на поверхности сперматозоидов методом люминесцентных антител и по наличию иммуноглобулинов трех классов определяют иммунопатологический фактор. 2. Способ по п. 1, отличают щ и и с я тем, что семенную жидкость обрабатывают в течение 5 мин раст Л вором терилитина в концентрации 50-60 ПЕ с последующим центрифугированием при 2000 g в течение 5 мин.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

ОЗИ

РЕСПУБЛИК (sl)4 А 61 В 10/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3562970/28-13 (22) 17.03. 83 (46) 23.08 85 Бюл. и 31 (72) М.И.Ухаль, М.А.Гончар и Т.М. Вишневская (71) Запорожский институт усовершенствования врачей им. М.Горького (53) 616. 361 637 (088. 8) (56) Qitkins S.S. at al Ig А Antibolly to speimatozoa in seminal and

Prostatic fluidse subfertill. М. I

Amer Med Ass; 1982, 247, 7, 1014101 5. (54)(57) 1. СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИММУ-"

НОПАТОЛОГИЧЕСКОГО ФАКТОРА ОЛИГО-ЗООС"

ПЕРИИИ У БОЛЬНЫХ ПРОСТАТИТОМ И ВЕЗИ-

КУЛИТОМ путем выявления иммуногло-,.

„„SU„„1173985 А булинов класса А в семенной жидкости отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа и сокращения времени исследования, из семенной жидкости выделяют сперматозоиды и выявляют дополнительно иммуноглобулины класса М, 6 непосредственно на поверхности сперматозоидов методом люжнесцентных антител.и по наличию иммуноглобулинов трех классов определяют иммунопатологический фактор.

2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю шийся тем, что семенную жидкость обрабатывают в течение 5 мин раст- 3 вором терилитина в концентрации

50-60 ПЕ с последующим центрифугиро ванием при 2000 g в течение 5 мин.

1173985

Изобретение относится к медицине, преимущественно к лабораторной диагностике олигоэооспермии у боль| ных простатитом и виэикулитом.

Целью изобретения является повышение точности способа и сокращение сроков исследования.

Способ осуществляется следующим образом.

Сбор семенной жидкости в пробирку больные производят общепринятым методом. Готовят ех tempore раствор терилитина путем добавления во флакон с порошкообразной.массой фермента 5 мл 0,9%--раствора хлористого натрия. Семенную жидкость разливают поровну в 4 пробирки и к ней добавляют раствор терилитина, содержащий не более 50-60-IIE. Смеси осторожно встряхивают и помещают 20 в .штатив пробирки, выдерживая их при комнатной температуре в течение

5 мин. 3а это время слизь практичес- ки растворяется, а сперматозоиды и лейкоциты остаются неразрушенными и переходят в окружающую среду. По истечении срока инкубации в пробирки к смесям добавляют по 8 мл 0,9%ного раствора хлористого натрия, осторожно встряхивают и центрифугируют 30 при 2 тыс g в течение 5 мин. Надосадочиую жидкость сливают. К осадку добавляют по 0,3 мл .среды 199 и пробирки встряхивают, Из разведенных осадков на предметных стеклах готовят 5 мазки, Последние высушивают при комнатной температуре и фиксируют в течение 5 мин химически чистым метиловым спиртом. Мазки высушивают при комнатной температуре, готовят 40 разведения моноспецифических люминис" центных антител М, g и А. С этой целью в ампулы добавляют по 1 мп сре ды 199. На первый мазок (контроль ) наносят 0,3 мп среды 199, а на три последующие " раздельно по 0,3 мл раствором.люминисцентных антител М, g и А. Мазки инкубируют во влажной камере в течение 15 мин. По окончании, срока инкубации производят смыв маз- 50 ков 0,9%-ным раствором хлористого натрия и струйно дистиллированной водой. Мазки высушивают и с помощью люмисцентного или обычного микроскопа производят микроскопию при 5»

Х 400.

Способ иллюстрируется следующим примером.

Больной Д. Жалобы на боли в надлобковой области и в промежности, рези при мочеиспускании, быструю утомляемость при физической и умственной нагрузке ° а также умеренное снижение

libido и отсутствие потомства в браке.

Семейный анамнез не отягощен. В детстве болел ангиной, респираторными заболеваниями и ветряной оспой. Туберкулезом, венерическими заболеваниями не болел. Травм, оперативных вмешательств не переносил. Паротитом и болезнью Боткина не болел. Хроническим простатитом более с 1977 г.

Женат с 1978 r..Ïo заключению врачагинеколога жена здорова.

Диагноз: хронический простатит.Веэикулит. Олигозооспермия ° Мужское бесплодие.

Данные лабораторного, биохими» ческого и иммунологического исследования: общий анализ крови и мочи не иэменены, печеночные пробы не изменены, сахар крови 5,4 млмоль/л, Анализ секрета предстательной желеэы — лейкоцитов на 1/2 поля зрения, лецитиновых зерен мало. Симптом

I крис таллизации +++.

Анализ семенной жидкости: количество 2 мл, рН 1,6. Общее количество сперматозоидов 18млн. Из них подвижных !8Х,слабоподвижных 20%и неподвиж-!

1 ных 62%. Лейкоцитов 25-30 в поле зрения микроскопа.

В посеве секрета предстательной железы патогенной микрофлоры не определяется, При определении I@ A . в семенной жидкости с помощью метода радиальной иммунодиффузии по Mancini эти иммуно глобулины не определяются.

При исследовании содержания имму ноглобулинов на сперматозоидах по предлагаемой методике они определяют» ся на подавляющем большинстве сперматозоидов, При этом íà 60Х сперматозоидов определяются Ig А, на 30%—

Ig g и на 10% — Ig M, После проведенного курса лечения с применением левомизола, индометацина, витамина E витамина А и метандростенолона, состояние больного улучшилось. Боли и дизурические явления прекратились, Уменьшилась утомляемость, Повысилось libido,.Количество сперматозоидов повысилось до 68 миллионов. Иэ них подвижных

56%, слабсподвижных 18Х.и неподвиж1173985

Составитель Л. Бонарцев

Редактор О, Черниченко Техред С.Мигунова

Корректор Л.Бескид

Заказ 5088/3 Тираж 722

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб.. д. 4/5

Подписное

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 ных 24Х. При иммунофлюоресцентном исследовании Ер M, g и А на сперматозоидах практически не определялись.

Спустя один месяц после окончания курса лечения у жены наступила бе- S ременность, которая протекала нормально и закончилась родамн здорового ребенка.

Исследования проведены у 35 больных хроническим пиелонефритом и вези-1О кулитом, а также у 5 здоровых доноров. У 18 больных с хроническим про статитом и везикулитом отмечалась олигозооспермия.

Положительный эффект, специфич- 13 ность и точность способа подтверждаются следующими данными.

При хроническом простатите и вези кулите без олигозооспермии (17 человек ) Ig А, g и М определяются у всех30 больных на 3-4Х сперматозоидов от их общего количества в семенной жидкости, а при олигозооспермии (18. человек ) — на 80-90Х сперматозоидов, При этом наиболее часто на сперма- 25 тозоидах определяются Ig А (на 60X }, . а затем Ig g (на ЗОХ ).

У здоровых доноров Ig А, g и М на сперматозоидах не определяется.

С помощью метода радиальной иммунодиффуэии по Мапс пь (известный ) Ig А в семенной жидкости у боль ных с хроническим простатитом и везикулитом беэ олигоэооспермии прах . тически не определяется, а у боль" ных с олигозооспермией эти Ig выявляются в количестве 20"80 МЕ лишь у

62,2Х больных, т.е. у 11.иэ 18 человек. Как указано, с помощью предлагаемого способа Ig А, g и М определяются у всех 18 больных с олигозооспермией (у 100Х случаев ). Этот факт свидетельствует о том, что предлагаемый способ, определения Ig А, и М на поверхности сперматозоидов с помощью люминисцентных антител является более точным, чем нэвестный.

Кроме того, предлагаемый способ значительно сокращает сроки исследования по сравнению с методом радиальной иммунодиффузии (до 1 ч вместо 24 ч J.