Октадекан-7-спиро-2-/ @ -оксил-4,5, 5-триметил- @ - имидазолин/-триметиламмония метансульфонат в качестве нитроксильного зонда для оценки изменения заряда липопротеидов

Октадекан-7-спиро-2-/ @ -оксил-4,5, 5-триметил- @ - имидазолин/-триметиламмония метансульфонат в качестве нитроксильного зонда для оценки изменения заряда липопротеидов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Октадекан-7-спиро-2 (N-OKCHji4 ,5,5-триметил- Л имидазолин) -три. метиламмония метансульфонат формулы СН, VY,СНзЗО/, е NYK-O ® СНз(СН2)ш (СН2)б--К-(СНз)з S в качестве нитроксильного зонда.для оценки изменения заряда липопротеи (Л ДОВ.

СОЮЗ СОНЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (19) (ill 1 1 44 (51)4 С 07 D 233/26 хесарщр

1 . л.йл с,1 А1 . "Блй01%к

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

СНЗ Ф

ГОСУДАРСТЯЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21 ) 3745724/23-04 (22) 05.84 (46) 23.08.85. Бюл. Ф 31 (72) M.Ë.Áoðèí, В.И.Швец, О .М.Пане.сенко, О.А.Азизова и И.А.Лукьянчикова (71) Научно-исследовательский институт по биологическим испытаниям химических соединений (53) 547.781.785 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР по заявке h"- 3597658/23-04, кл. С 07 D 233/26, 1984. (54) ОКТЖЖКАН 7-СПИРО-2 -(N-ОКСИЛ4,5,5 -ТРИМЕТИЛ-d -ИМИДАЗОЛИН) -ТРИМЕТИЛАЯМОНИЯ МЕТАНСУЛЬФОНАТ В КАЧЕСТВЕ НИТРОКСИЛЬНОГО ЗОНДА ДЛЯ

ОЦЕНКИ ИЗМЕНЕНИЯ ЗАРЯДА ЛИПОПРОТЕИДОВ. (57) Октадекан-7-спиро-2 -(N-оксилI

4,5,5 -триметил- -имидазолин) -три.— метиламмойия метансульфонат формулы

3 НЗ- 3

Г . Щ

CH3(CÍ )„(CH ); N- (CH3)

4 в качестве нитроксильного зонда.для оценки изменения заряда липопротеидов.

1174429 2

Вычислено, X: C 60,67, Н 10,48, N 7,86.

Изобретение относится к новым производным имидазолина, а именно к октадекан-7-спиро-2 -(N-оксил4,5,5 -триметил-Л -имидазолин).-триI I метиламмония метансульфонату формулы

10 в качестве нитроксильного зонда для оценки изменения заряда липопротеидов. Цель изобретения — поиск новых соединений в ряду имидазола, обладающих гидрофобными свойствами и чувствительностью .к изменению поверхностного заряда липопротеидов, что позволяет их использовать в качестве нитроксильного зонда для оценки изменения заряда липопротеидов ..

На чертеже изображена кривая спектра ЭПР предлагаемого соединения.

Соединение формулы (13 получают

30 взаимодействием мезилата октадекан7-спиро-2 -(N-оксил-4,5,5 -триметилI I ,о -имидазолин)ола с триметиламином . при 120 С.

Пример. В ампулу, содержащую

145 мг мезилата в 10 мл сухого тетрагидрофурана при охлаждении до

-25 C пропускают сухой газообразный триметиламин до накопления 2-3 мл.

Ампулу замораживают, запаивают и нагревают в течение 3 ч при 120 С. 40

Ампулу охлаждают, снова эамораживают, вскрывают, избытку триметиламина дают испариться, смесь упаривают досуха, остаток растворяют в четыреххлористом углероде, добавляют 45 сухой эфир для высаживания соли. Осадок отделяют обратным фильтрованием, растворяют в хлористсм метилене и хроматографируют на колонке с силикагелем. Смесью хлороформ:метанол

3:1 элюируют целевое соединение. Получают 96 мг (60,3X ) соли в виде светло-желтого воскообразного вещества.

ИК-спектр, см : 1210-1180 (S03), 1650 (C=N). ЭПР-спектр (10 М растsop в спирте ): М 1,46 мТ, 5,8 х 10 спин/моль.

3 3 3

НЗ о%

Ni Я-О ,С ф

СИЗА )1О (Сн )6- Х- (СН3)

С27Н ИЗБОУ

Найдено, 7: С 60,12; H 10,95, N 7,47.

В качестве объекта изучения использовали ЛПНИ и ЛПВП, выделенные из плазмы крови здоровых доноров и больных ишемической болезнью сердца (ИБС ).

Липопротеиды выделяют из плазмы крови. здоровых доноров и больных ИБС методом ультрацентрифугирования в солевых растворах различной плотности. Полученные препараты ЛНПН (d =

1,065-1,125 г/см,) и JIIIBII> (<1

>1,21 r/cM3) диализуют прй 4 С против раствора 5 мМ трио-НС1-буфера рН 7,3 в течение 18 ч.

Методика приготовления образцов для регистрации ЭПР-спектров заключается в следующем. К 100 мкл суспензии ЛП (содержащей 1 мг фосфолипидов на 1 мл ) добавляют 1 мкл раствора зонда в этаноле. Конечная кон-5 центрация зонда 8,7 10 M этанола

1 об.7, Смесь инкубируют 5 мин, помещают в плоскую кварцевую ампул . и регистрируют спектр ЭПР в режиме: микроволновая мощность 10 мВт, амплитуда модуляции 1-1,6 Гс, развертка магнитного поля 25 Гс/мин при постоянной времени 1 с. Спектр ЭПР предлагаемого соединения представляет собой суперпозицию двух сигналов (фиг.1): от зондов, встроившихся в

ЛП (сигнал А), и от зондов, растворенных в водном окружении (сигнал Б ).

Для характеристики степени связывания соединения формулы (1 ) с ЛП из спектров ЭПР определяют параметр / Ъ где Ъ вЂ” интенсивность низко2 1 польного сигнала спектра ЭПР от зондов, связанных с ЛП, b2 — интенсивность высокопольной компоненты спектра ЭПР от зонда, растворенного в воде. Распределение заряженных соединений между мембраной и ее окружением зависит от поверхностного заряда мембраны, поэтому изменения измеряемого спектрального параметра

/ 1 отражают изменение поверхност2 ного заряда мембраны ЛП.

Для сравнения с предлагаемым соединением (зонд 1) определяют изменение параметра 1 „ /1 2 незаряженного структурного аналога (зонд 111). Обследовано 10 больных ИБС и 10 здороЗонд 1, / Й2

Зонд 111 Ъ„/,42

Абсолют- Процент ное зна- к контПроцент к контАбсолютное значение чение ролю олю

ЛПНП

0,65

100

100 . 1,81

58,5 2,02 здоровые

109,6

0,38 больные ИБС

ЛПВП

100 1,27

100

1,52 здоровые

1,99 130,9 1,31 больные ИБС

102,1

Составитель Н.Подхалюэина

Техред И.Асталош Корректор/ Л. Бескид

Редактор О.Юрковецкая

Заказ 5136/25 Тираж 384

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 вых доноров, полученные данные усреднены.

Значения параметра распределения исследуемых зондов у здоровых доноров и больных ИБС представлены в таблице (ошибка измерений 107 ).

Иэ данных таблицы следует, что изменения параметра h / 5 зонда ll! незначительны и находятся в пределах ошибки опыта. В то же время рас174429 4 пределение предлагаемого зонда .! и

ЛП больных значительно отличается от его распределения в ЛП здоровых доноров: на 32,57 для ЛПНП и на

30,9Х для ЛПВП. Таким образом, предлагаемое соединение является чувствительным к изменениям заряда липопротеидов и может быть использовано в медицине для контроля за состоя l0 кием липопротеидов при различных типах патологии.