Способ определения витамина @ в травяной муке

Способ определения витамина @ в травяной муке

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)4 G 01 N3Î 4

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3684777/23-OA (22) 02.01,84 (,46) 30.08.85. Бюл. Ф 32 (721 И,А. Ионов, П.Ф. Сурай, М,С, Жедек и А Н. Стефанович (71) Украинский научно-исследовательский институт птицеводства (53) 543.54.42 (088,8) (56) Авторское свидетельство СССР ! 1109631, кл. С» 01 М 31/08, 1983 . (, 54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИТАМИНА

К1 В ТРАВЯНОЙ МУКЕ путем экстракции его иэ аналиэируемой !пробы бензолом, содержащим н-бутанол, с последующим тонкослойным хроматографированием экстракта в системе растворителей гексан-хлороформ, удалением целевого компонента с пластинки и экстракции его этиловым спиртом с последующим фотометрированием экстракта, отличающийся тем, что т с целью сокращения длительности определения и повыпения чувствительности способа, экстракт перед фотометрированием обрабатывают О, 1-0,2%-ным раствором боргидрида натрия в этаноле.

1 1175874 2

Изобретение относится к химичес- рителей гексан-хлороформ, взятых в ким методам определения витамина К:1 объемном соотношении 50:50. После то((филлохинона) с применением.хромато- ro, как фронт подвижной Фазы подниграфических методов очистки, в част- мается на высоту 15 см, пластинку ности тонкослойной хроматографии, и 5 вынимают из камеры, просушивают и может быть использовано в различных быстро определяют положение витамианалитических лабораториях при опре- на К1 по свидетелю под ультрафиоледелении содержания витамина К в кор- товой лампой (проявляется в виде мах и других продуктах растительного .. темной полосы). происхождения и кормовых препаратах.1О Пятно силикагеля с адсорбированЦель изобретения — сокращение ным на нем витамином К» соскаблидлительности определения и повыше- вают с пластинки, переносят в проние чувствительности способа. бирку с притертой пробкой, заливают

Изобретение иллюстрируется.сле-,3 мл 96%-ного этилового спирта и ста15 дующими примерами.

Пример 1, Берут 500 мг травяной муки, вносят в пробирку с притертой пробкой, заливают 10 мл экстрагирующей смеси — бензол с 2% (объем вят в темное место на 30 мин. Затем отфильтровывают раствор через бумажный фильтр (красная полоса), смоченный этиловым спиртом, пробирПример 2, Осуществляют определениее в ит амина К р ан ало гич но примеру 1 с раствором боргидрида нат4р рия различной концентрации .с целью установления оптимальных количеств используемого восстановителя. Результаты представлены в табл, 1.

Таблица 1

Определение оптимальной концентрации боргидрида натрия для востановления Филлохинона

1Используемая концентрация боргидрида натрия s этаноле, % (0,02 0 05 0,1

О, 2 (О, 3 (О, 5 1, О

Определено витамина

К1, %

81,5 89,3 100 100 98,1 96,0 96,2

«)

В каждом варианте добавляли по 0,1 раствора.

) н-бутанела к 10 мл бензола: добав- 20 ляют 0,2 мл н-бутанола и хорошо перемешивают, Пробирку ставят в темное место на 3 ч. Заполняют колонку диаметром 10 см слоем силикагеля ? см ) и св.ерху него насыпают 1 см 25 безводного сульфата натрия, Содержимое пробирки пропускают через колонку, а пробирку .ополаскивают пятью порциями по 5 мл экстрагирующей смеси, которые также пропускают через З11 колонку. Фильтрат выпаривают на роторном испарителе при 80 С и сухой остато|: растворяют в 0,2 мл бензола.

Затем с помощью микропипетки переносят полученный раствор (0,2 мл ) на пластинку "Силуфол", размером

15х15 см, и по обе стороны. образовавшейся полости наносят свидетель-раствор - 3 мкг филлохинона в 0,1 мл хлороформа.

Развитие хроматограммы проводят в камере (180х70х170 см), насыщенной в течение 30 мин парами смеси раствоку ополаскивают 1 мл этанола, который переносят на этот же фильтр.

Далее к элюату добавляют О,1 мл

0 1%-ного раствора боргидрида натрия в этаноле. Содержимое пробирки быстро перемешивают, переносят в кювету для измерений и через 20 с после внесения боргидрида натрия проводят первое фотометрирование элюата на длине волны 243 нм, Затем после достижения максимума экстинции (через

3-4 мин) проводят повторное фотометрирование и по разнице показаний между начальным и конечным измерениями находят прирост экстинции и определяют количество витамина К1 по калибровочной кривой.

3 1175874 4

Пример 3. Осуществляют on- образец люцерновой муки. Результаределение витамина К1 аналогично ты экспериментов представлены в примеру !, анализируя усредненный табч.2.

Таблица2.

t 1

Чувст

Среднее время анализа, ч витель ность мкг

1 ( предлагаI

t емый 20,94 + 0,02

3-35 1 25,49 + 0,02

6

L L

1 !

Извес тный . 20,37 + 0,02 б ч8 3

5-30 24,91 + 0)02 18, 2

20 но и весь находящийся в растворе витамин К1 не определяется. В случае добавления к исследуемому злюату витамина К1 избытка боргидрида натрия элюат мутнеет, что делает невозмож25 ным фотометрирование.

Данные табл. 1 свидетельствуют о том, что оптимальной концентрацией раствора боргидрида натрия в этаноле является,0,1-0,2Х. при.добавлении низких концентраций (0,02-0,05Х ) прирост экстинций идет очень медленСоставитель .С. Кованская

Ф

Редактор М. Бандура Техред Т.Фанта Корректор Л.Бескид

Заказ 5364/26 Тираж 897 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППп "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Способ Кол-во вита1мина К в 1

tr травяной

t муки, мкг

1

1Кол-во

1 опре1

1деле иий

I 1

1 Кол-во вита- 1Надейно

t

1мина К» в 1 1витами1г. травяной на К(, 1муки + 5 мкг Х стандарта, мкг