Способ определения биосовместимости гемосорбентов

Способ определения биосовместимости гемосорбентов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОСОВМЕСТИМОСТИ ГЕМОСОРБЕНТОВ путем исследования нейтрофилов до и после инкубации с гемосорбентом, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, к нейтрофипам предварительно добавляют раствор нитросинего тетразо.пия в конечной концентрации 2-4 мг/мл, далее определяют бкосовместнмость гемосорбентов по увеличению отношения числа нейтрофилов, имекяцих отложения диформазана, до и после инкубации с -емосорбентом. Ш

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

А (5!)4 G 01 N 33/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPGHOMV СЕМДЕТЕЛЬСТВУ

81?Г 0 (21) 3537 145/28-14 (22) 03.12.82 (46) 30.08.85. Бюл. Ф 32 (72) А.H.Ìàÿíñêèé, Е.П.Гуревич, М.А.Бейлин и E.Ñ.Ìàðãoëèí (71) Казанский научно-исследовательский.институт травматологии и ортопедии, Казанский государственный институт усовершенствования врачей и Горьковский медицинский институт (53) 615. 112 (088. 8) (56) Лопухин 10.М., Молоденков М.Н, Гемосорбция. М.: Медицина, 1978, с. 115.

„„Я0„„1176249 (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОСОВМЕСТИМОСТИ ГЕМОСОРБЕНТОВ путем исследования нейтрофилов до и после инкубации с гемосорбентом, о т— л и ч а ю шийся тем, что, с целью повьппения точности способа, к нейтрофилам предварительно добавляют раствор нитросинего тетразолия в конечной концентрации 2-4 мг/мл, далее определяют бгосовместимость гемосорбентов по увеличению отношения числа нейтрофилов, имеющих отложения диформазана, до и после инкубации с гемосорбентом.

249

Составитель K.Æèòíèêîâà

Редактор M.Íåäoëóæåíêo Техред С.Мигунова. Корректор С.Шекмар

Заказ 5353/44 Тираж 897 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г, Ужгород, ул. Проектная, 4

1 117б

Изобретение относится к медицине и используется для оценки совместимости с кровью различных гемосорбентов.

Целью изобретения является повышение точности исследования.

Способ осуществляется следующим образом.

Готовят стандартную лейковзвесь:

5,0 мл крови донора помещают в сили- 10 конированную пробирку, добавляют

200 ед. гепарина, 2,5 мл З раство; ра .желатина. Пробирку устанавливают б .под углом 45 и термостатируют

40 мин при 37 С. Отбирают надосадочную жидкость и подсчитывают количество лейкоцитов. Доводят содержа.ние лейкоцитов до 2 ° 10 /мл.

-20 мг адсорбента инкубируют при

37 С в течение 5 мин с 1,0 мл стан- рб

С дартной лейковзвеси донора.

К 0 1 мл готового раствора нитросинего тетразолия (2-4 мг/мл) в

0,1 мл О, 15 M фосфатно=о буфера прибавляют 0,1 мл бывшей в контакте с 25 сорбентом лейковзвеси и помещают в термостат при 37 С на 30 мин. Параллельно ставят пробу с интактной лейковзвесью (не бывшей в контакте с адсорбентом).

Затем готовят мазки из осадков после центрифугирования, фиксируют абсолютным метиловым спиртом в течение 20 мин и докрашивают 2Х-ным раствором метилового зеленого. Микроскопируют при увеличении 7к90. Подсчитывают число клеток с отложениями диформазона в 100 нейтрофилах и по отношению числа нейтрофилов, имеющих отложения диформазона до и после инкубации с гемосорбентом, судят о его биосовместимости с кровью.

Пример. Провели сравнительное изучение совместимости с кровью донора К., угля ИГИ и силикагеля

АСК. По описанной методике провели определение гемосовместимости кажфого сорбента. До контакта с ними было 8Х нейтрофилов с отложениями диформазона. После контакта с углем

ИГИ определялся 513 нейтрофилов с отложениями диформазана, после контакта с снликагелем АСК вЂ” 45X. Поскольку отношение числа нейтрофилов с отложениями диформазана до .и после контакта с углем ИГИ (8751) меньше такового при контакте с силикагелем АСК (8/45), можно судить о лучшей биосовместимости силикагеля

АСК с кровью, по сравнению с углем

ИГИ.

Данный способ позволяет интегрально отразить результат взаимодействия гемосорбентов с кровью, дает новую информацию о результатах такого взаимодействия и дополняет арсенал имеющихся средств для оценки биосовместимости с кровью, различных адссрбентов.