Штамм вируса алма-арасан n каз-1380 кл,используемый для получения диагностических препаратов

Штамм вируса алма-арасан n каз-1380 кл,используемый для получения диагностических препаратов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

итамм Алма-Арасан № Каз-1380 кл, ГКВ № 675 (Государственная коллекция вирусов Института вирусологии им, Д.И.Ивановского), используемый для получения диагностических препаратов .

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

ОГ)ИСАНИЕ ИЗОБРЕТ

К АВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3718815/28-13 (22) 02. 04. 84 (46) 30. 09.85. Бюл. у. 36 (72) Д.К.Львов, С.К.Каримов, Т.В.Кирющенко, В.Л. Громашевский и Н, И.Дро-. бищенко (71) Научно-исследовательский институт эпидемиологии, микробиологии,и инфекционных болезней и Институт вирусологии им..Д.И.Ивановского (53) 615.373.3.576.8.097(088.8) „„SU„„1182077

ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ. (57) Ытамм Алма-Арасан Р Каз-1380 кл, ГКВ Ф 675 (Государственная коллекция вирусов Института вирусологии им. Д.И.Ивановского), используемый для получения диагностических препаратов.! 18207

Изобретение относится к вирусоло-i гии, в частности к производству вакционно-сывороточных препаратов.

Целью изобретения является получение нового штамма неизвестного ранее: арбовируса, пригодного для производства специфических диагностических препаратов.

Морфологические признаки. При фильтрации вирусосодержащей суспенэии через миллипоровые фильтры размером 100 и 50 нм снижения инфекционного титра не наблюдалось. Обработка вирусосодержащей мозговой суспензии .дезоксихолатом натрия приводит с сни-15 жению титра вируса на 4,8 1Р, Это свидетельствует о том, что вирус имеет размеры в пределах до 50 нм и содержит липосодержащую оболочку.

При обработке БУДРом титр вируса не снижался, что является косвенным доказательством о принадлежности его к PHK-содержащим вирусам.

На основании морфологических, морфогенетических и антигенных признаков изолированный вирус отнесен к семейству Тогавириде, роду Флавивиру, антигенной группе В.

Культуральные свойства. Размножается в культуре клеток СПЭВ без цитопатического действия. Титр вируса

30 в культуральной жидко ти при титровании на мышах равен 4,2 1р LD

50/0,02 мл.

Адаптационные свойства. Исходный вирус выделен от клещей Ixodes per- 35

sulcatus и адаптирован к организму

1-2-дневных белых мышей, прошел 7 пасажей. Инкубационный период ñîñтавил 7 дней при первичном выделении и сократился до 3-4 дней в последу- 40 ющих пассажах. Инфекционный титр вируса для новорожденных белых мышей при мозговом заражении достигает

8,0 1g LD 50/0,02 мл. Антигенные свойства. Серологичес- <5 кая идентификация штамма У Каз- 1380 кл с использованием иммуных асцитных жидкостей к 114 арбовирусам 27 антигенных групп не выявила антигенной связи с известными арбовирусами за 50 исключением односторонней связи с вирусом Повассан. В РСК антиген вируса Повассан взаимодействовал с иммуной асцитной жидкостью (ИАЖ) к штамму Каз-1380 кл, в то же время 55 антиген штамма Каз-1380 кл не реагировал с ИАЖ к вирусу Повассан. Антигенное различие штамма Каз-1380 кл от вирусов IIQBBeсан и клешевого энцефалита выявлено и в реакции торможения гемагглютинации. Серологическая идентификация штамма Каз-1380 кл в РСК и РТГА согласуется с данными реакции биологической нейтрализации.

Так, штамм Каз-1380 кл не нейтрализовался ИАЖ к вирусу Повассан, а индекс нейтрализации вируса Повассан с ИАЖ к штамму Каз-1380 кл составил всего 2,5 18, при индексе нейтрализации 5,0 18 изучаемого штамма с гомологической ИАЖ.

Штамм У Каз-1380 кл при иммунизации лабораторных животных вызывает образование комплементсвязывающих, преципитирующих и вируснейтрализующих антител.

У больных людей с остролихорадочными заболеваниями, вызываемыми вирусом Алма-Арасан, также в сыворотках крови выявляются комплементсвязывающие, преципитирующие и вируснейтралиэующие антитела °

Патогенные свойства вируса для животных. Вызывает смертельную инфекцию у новорожденных и взрослых белых мышей при внутримоэговом заражении, Инфекционный титр вируса в мозгу достигает 8,0 lg LD 50/0,02 мл.

Патогенные свойства вируса АлмаАрасан для людей, Вирус Алма-Арасан является патогенным и для человека.

При обследовании остролихорадочных больных роль этого вируса в инфекционной патологии установлена в 27 случаях. У этих больных наблюдались явления серозного менингита, Для получения диагностических препаратов штамм Р Каз-1380 кл размножают путем внутримозгового заражения новорожденных белых мышей.

Из мозга животных, взятых на высоте клинических проявлений заболевания, 1 готовят диагностический антиген путем

«ахаро-ацетоновой экстракции.

П р и м е v. Приготовление имммунной асцитной жидкости.

Лабораторные животные — взрослые белые мыши,, самки. Проводят пятикратную иммунизацию с интервалом в 7 дней, способ введения — внутрибрюшинный, Объем вводимой вирусосодержащей суспензии при 1 и 2 -й иммунизации—

0,2 мл, при 3,4,5 — и — 0,25 мл.

Суспензию перед введением смешивают с равным объемом полного адьюванt

Составитель Г.Смирнова

Редактор Н,Швыдкая Техред Ж.Кастелевич Корректор М.Пожо

Заказ 6069/26 Тираж 524 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам. изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 118 та Фрейнда.Через 1 сут. после 5-й иммунизации внутрибрюшинно вводят асцит — sarcoma 180 ТС. Спустя 13- 14

-дней после введения асцита получают асцитную жидкость, содержащую 5

-I комплемент-связывающие антитела. Иммуная асцитная жидкость не теряет активности и специфичности после лиофилиэации, что доказано повторной проверкой активности пре- 1ð парата по реакции связывания комплемента. Титр иммуной асцитной жидкости предлагаемого препарата с гомологичным антигеном составил

1:256, с гетерологичным антигеном вирусов антигенной группы В реакцИя была отрицательной.

Яля лабораторной диагностики заболевания человека, вызванного вирусом Алма-Арасан, взят материал для исследования — сыворотки крови от больных людей с подозрением на арбовирусные инфекции, взятые в начальном периоде заболевания и

2077 4 реконвалесценции. Проводят постановку серологических реакций — РСК, РТГА с использованием càõàðo-ацетонового антигена, приготовленного иэ вируса Алма-Арасан штамм Ф Каэ- 1380 кл. Реакции ставятся по общепринятому способу — микрометодом íà аппарате Такачи.

У больной Т. была взята сыворотка крови в 1-й день заболевания

27.05.83. В РСК и РТГА результаты с антигеном штамма Каэ-1380 кл были отрицательными. В сыворотке крови, взятой 30.05.83, обнаружены антитела к указанному штамму соответственно 1:64 и 1: 10, а в сыворотке, взятой 8,06.83, титр был 1:128 и 1:40, в то время как в тех же реакциях антитела к другим арбовирусам (ЗН, Карши, Узун-Агач и др.) не выявились. Таким образом, приготовленный из предлагаемого штамма вируса антиген позволил лабораторно установить этиологию заболевания.