Способ количественного определения бромсульфалеина в крови

Способ количественного определения бромсульфалеина в крови

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ БГОМСУШ ФАЛЕШ1А В КГОВИ путем внутривенного введения .водного раствора бромсульфалеина, отбора пробы крови в цитратно-солевой буфер, отделения надосадошюй жвдкости, внесения .в нее нндикатора водного раствора едкого натра - с последующим фотометрнческнм определением концентрации бромсульфалеина, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, используют 10-12%-ный раствор едкого натра, дополнительно измеряют оптическую плотность до введения индикатора и рассчитывают концентрацию бромсульфалеина по разнице оптических плотностей до н после введения нндикатора. (Л

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

РЕСПУБЛИН (19) (11) (Я) 4 G 01 И 33 52

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

flO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ. »4»»аэаа «) (21) 3751592/28-13 (22) 13.06.84 (46) 07.11.85. Бюл. Ю 41 (71) Ленинградский санитарно-гигиенический медицинский институт (72) Е. Г. Доброхотова, П. 1Г. Денисенко, А. Т. Бурбелло, А. 10. Лимаренко, А. Ф. Са.фонова, Т. В. Виноградова и О. Д. Барнаулов (53) 616.073.56 (088.8) (56) Изуайлет Л. И. и др. Модификация бромсульфалеиновой пробы для изучения функционального состояния печени у крыс:—

Гигиена и санитария, 1976, И 3, с. 59.

Лисичкин В. C. Бромсульфалеиновая проба . при хронических гепатитах. — Клиническая ме)гущина, 1963, Р 8, с. 128. (54) (57) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕ—

ДЕЛЕНИЯ БРОМСУЛЬФАЛЕИНА В КРОВИ путем внутривенного введения .водного раствора бромсульфалеина, отбора пробы крови в цитратно-солевой буфер, отделения надосадочйой жидкости, внесения в нее индикатора— водного раствора едкого патра — с последующим фотометрическим определением концент. рации бромсульфалеина, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности способа, используют 10 — 12%-ный раствор едкого патра, дополнительно измеряют оптическую плотность до введения индикатора и рассчитывают концентрацию бромсульфалеина по разнице оптических плотностей до и после введения индикатора.

1 11902

Изобретение относится к биохимии и может быть использовано для диагностики при исследовании антитоксической функции печени.

Цель изобретения — повышение точности способа. S

Пример 1. В хвостовую вену крысе вводят 5%-ный раствор БСФ в количестве 20 мг/кг веса. Через 30 с, 1, 2, 5, 13, 15.

15, 20, 25 мин после введения отбирают по

0,1 мл крови из нижней части хвоста и по- !Q мешают ее в 5 мл цитратного буфера (4 ч.

0,9%-ного NaCl и 1 ч. 3,8%-ного цитрата натрия) . Содержимое центрифугируют, 4 мл надосадочной жидкости помещают в кювету спектрофотомегра 8 = 1 см и снимают опти- !5 ческую плотность раствора относительно дистиллированной воды при A = 582 ннм(Л,).

Затем в кювету вводят каплю 10%- ного раствора и снимают значение оптической плотности относительно воды при 9 = 582 ннм ваю (Д ) . По уравнениюг= if = !!/Qp)7 по градуированному графику находят С при

Д =Д-Д.

Результаты измерения концентрации БСФ в крови приведены в таблице. 25

Пример 2. В ушную вену кролику вводят 10%- ный раствор БСФ в количестве

5 мг/кг веса. Через 30 с, 1, 3, 5, 13., 15, 20. 35 мин после введения отбирают по

0,1 мл крови из вены другого уха и помешают ее в 5 мл цитратного буфера (4 ч.

0,9%-ного NaC1 и 1 ч. 3,8%-ного цитрата натрия) . Содержимое центрифугируют, 4 мл надосадочной жидкости помещают в кювету спектрофотометра f = 1 см и снимают оптическую плотн4сть буфера при h щс „=

= 582 ннм (Д,) ..Затем в кювету вводят

1 каплю 12%-ного раствора NaOH и снимают значение оптической плотности относи тельно воды или цитратного буфера при

%„„,,=582 (Дт). По уравнению D D

E.В О 017 или по градуированному графику находят

С при Д = Д вЂ” Д>.

Результаты измерения приведены в таблице, иэ которой, видно, что в условиях известного способа определяют либо увеличенное, либо уменьшенное значение концентрации БСФ в крови. Так, при больших концентрациях БСФ основная погрешность (более 50% основного значения) вызвана неправильной концентрацией индикатора — раствора NaOH (опыты при t = 30 с, 1 мин) и приводит к уменьшению истинного значения измеряемой величины. При более низких концентрациях в ряде случаев по известному способу наблюдается наличие БСФ в крови до 4 мт%, хотя на самом деле его,уже нет (опыт 15. мин). Эта ошибка вызвана отсутствием учета значения оптической плотности надосадочной жидкости и приводит к неправильным результатам измерения.

1д >

С0 а Я

w х

I х, о

Y и о и

1 ж й!( и о 1

O

Ц

3 о

v о (о х Хх

С»

Г\

D ф» о

Р о и

U о

Г4

О"

О

I»

v о

I» о

1/)

О

1»1

О (О

3.

О"

CV

О

О" (1

О

С»

)х

Ф

Е

CII

1»

О о х

4Ч х о ф о х о

Cl о

l о х

«( и

Cl з х

1 о о

Ю

=" R.

1/Ъ

С»

С»

С Ъ

О

Г4

С»

I/I

С»

О

С»

О" х х

Л

%/Ъ и

О о

5 о рЗ а х о о

l Q

Й1

I» n й." х

v х х

CI х

CO м х х и о

Б

К< в х

ClI х о

Il э а х о о

Г, Х et о х

К<

Ж Й о х

Р х

w x о

R, х о

К

D О а

Фе

D„ м

Г4

° °

° fI

ГФ

Ж

3„

3 о вх

Ю

5

v. ) и .

° (1

CI )3 ы 3 аь- е

Ц ха о у х

IC

2$ х х а

ЖВР и е.х х о р 34

g o ж43

1190264

3 8

»

1Х о

-о (д о

Я" х

v ь2

Cl

М о о

Й» м и о о о и в

Ю

C е

В о ю ф в