Способ получения @ -изолейцина

Способ получения @ -изолейцина

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН,.SU.. 1206305 (51)4 С 12 P 13 06

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТЫ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ н авТОРСКОМУ СВИДЕТВЪФТВУ с @,-с „ (21) 3788552/28-13 (22) 20.07.84 (46) 23.01.86. Бюл. ¹ 3 (71) Казанский ордена Трудового Крас. ного Знамени химико-технологический институт им.С.M.Êèðoâà и Фрунзенский завод антибиотиков (72) 0;А.Решетник, Э.С.Вернер, Д.Г.Победимский, Л.А.Музыченко, З.Ш.Мингалеева, Г.В.Ставинская, Л.А.Хабарова и В.А.Сотников (53) 668. 475 (088. 8) (56) Авторское свидетельство СССР № 943282, кл. С 12 P 13/08, 1982.

Primary Products of Metabolism.

Ed Ъу А.Н.Коке, G.Amino. Acid Ecomonic Microbiology, 1978, 2, р.232. (54) (57) 1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ Ь-ИЗОЛЕИЦИНА путем культивирования продуцирующих его микроорганизмов Brevi bacterium blavum в условиях аэрации на питательной среде, содержащей / углеводы, источник азота, минеральные соли и стимулятор роста, о т— л и ч а ю шийся тем, что, с целью повьппения выхода L-изолейцина, в качестве стимулятора роста используют дезоксирибонуклеазу.

2. Способ по п.1, о т л и ч а ю— ,шийся тем, что дезоксирибонуклеазу вносят в питательную среду в.. количестве 1 10 -1-10 мг/мл.

12063

Изобретение относится к микробиологической промышленности, к производству:аминокислот, а именно к способам получения L-изолейцина.

Цель изобретения — повышение выхо- 5 да L-изолейцина.

Введение в качестве стимулятора роста деэоксирибонуклеазы в концентрациях, близких-к концентрации ферментов, находящихся в живой клет- 1О ке, приводит к ускорению синтеза ДНК и связанного с этим процессом деления клеток, что положительным образом сказывается на росте и развитии всей клеточной популяции микроорганизма 15 продуцента и синтезе аминокислоты.

Пример 1. Односуточную куль. туру штамма Brevibacterium flavum

ВНИИГенетика 10-89, выращенную на косяках с агаром Хоттингера, переме" щают в колбы Зрленмейера емкостью ,750 мл, содержащие 100 мл питательной среды следующего состава, г/л:, Содержание Ь-иэолейцина в культуральной жидкости определяют методом тонкослойной хроматографии на пластинах Silufol после раэгонки в течение 40 мин в системе растворителей: изопропанол, ацетон, 28%-ный водный раствор аммиака, вода в соотношении

25 50:50:12,8, и обработки 1%-ным раст.вором нингидрина в ацетоне.

Полученные данные приведены в таблице .

Л

Как видно из таблицы, оптимальными являются концентрации дезоксирибонуклеазы 1 10 -1 ° 10 мг/мл сре- ды. При внесении в ферментационную среду стимулятора в этих концентрациях наблюдается увеличение концентрации L-изолейцина на 25-29% по

-сравнению с контролем, по сравнению с известным способом наблюдается увеличение выхода аминокислоты на

3,9 г/л (по известному способу

®О получено 14,5 г/л L-изолейцина, по предлагаемому 18, 1 г/л).

Концентрация ДНК-аэы, мг/мл

10

10 3

Контроль

Показатели .

Концентрация изолейцина на 72 ч роста, г/л

14,0

14,6

18,1

14,8

14,0

Стимуляция к контролю, %

5, 7 25,7 29,3

4,3

Меласса 30

Кукурузный экстракт ЗО

ИН, С1 4

Водопроводная вода Остальное

I г рН "реды доводят 40%-ным раствором

NaOH до 7,3-7,5.

Колбы вместе со средой предварительно стерилизуют в автоклаве при 1,0 атм в течение 40 мин.

После засева культуры колбы устанавливают на круговую качалку со скоростью 200-220 об/мин и выращивают посевной материал 16-18 ч при 30 С.

Готовый посевной материал вносят в количестве 6,6% (по объему) в кол05 2 бы Эрленмейера емкостью 750 мл, содержащие 30 мп ферментационной среды, содержащей сахар кубинский, (NEQ) SO

KHqPO MgSOg"7Н О, мел, дестибиотйн, тиамин и водопроводную воду". Ферментационную среду стерилизуют, одновременно с инокулятом в ферментационную среду вносят дезоксирибонуклеазу в концентрациях 1 10 з1 10 мг/мл. Ферментацию проводят, на круговой качалке со скоростью

200-220 об/мин при 30 С в течение

72 ч. Контролем служат клетки Brevi""

bacterium flavum 10-89, культивируемые в аналогичных условиях без добавления деэоксирибонуклеазы.

1206305

Поодолжение таблицы

Концентрация ДНК-азы, мг/мл

10

Показатели

Контроль

0,0863 0,0822

Стимуляция к контролю, 7

4,1

1,2

6,3 12,3

5,03

Коэффициент конверсии,Ж

17,6

16,1

18,9

16,3

15 3

5,2 15,7 23,5

6 5

Составитель Н.Афанасьева

Редактор Н.Яцола Техред З.Палий Корректор С. Шекмар

Заказ 8651/26 Тираж 490 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Средняя удельная скорость роста культуры, ч "(О22 ч роста) Стимуляция к контролю до коэффициенту конверсии, X

0,0856 0,0832 0,0874 0,0922

Филиал ППП "Патент", г,ужгород, ул.Проектная, 4