Способ получения тест-гусениц непарного шелкопряда и питательные среды для получения тест-гусениц непарного шелкопряда природной кладки и гусениц младших и старших возрастов лабораторной выкормки

Способ получения тест-гусениц непарного шелкопряда и питательные среды для получения тест-гусениц непарного шелкопряда природной кладки и гусениц младших и старших возрастов лабораторной выкормки

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

1. Способ получения тест-гусениц непарного шелкопряда, включаюший отбор природных кладок яиц, их хранение при температуре 1-5°С и использование отдельными партиями для выращивания тест-гусениц на искусственной питательной среде, о т л и ч аютийсятем, что, с целью повышения эффективности способа за счет круглогодичного получения тест-гусениц со стабильными биологическими показателями, сначала используют природные кладки яиц, а при снижении их жизнеспособности в результате хранения начинают использовать ки яиц от бабочек разовой лабораторной выкормки, прошедших этап хранения , при этом лабораторную вьжормку тест-гусениц проводят на средах, диф ференцированньгх в соответствии с тре бованиями гусениц различных воЪрастов. 2.Способ ПОП.1, отличаюш; и и с я тем, что тест-гусениц и гу сениц младших возрастов лабораторной выкормки культивируют на среде одного состава, 3.Питательная среда для получения тест-гусениц и гусениц младших возрастов лабораторной выкормки, содержащая фасоль, агар, кормовые дрож жи, 4м водньтй раствор гидроксида калия , сахарояу, 40%-ный водный раствор формалина, калий двузамещенный фосфорно-кисльш, аскорбиновую -кислоту , метабен и воду, о т л и ч.а юш а я с я тем, что, с целью повышения качества среды за счет приближения ее состава к природному корму, она дополнительно содержит фильтровальную бумагу при следующем соотношении компонентов, мас.% - и (Л 1С о ;о 00 Фасоль Агар 1;ормовые дрожжи водный раствор гидроксида калия Сахароза Фильтровальная бумага 21,00-22,00 1,50-1,70 1,50-1,70 1,40-1,60 1,20-1,40 0,84-0,88

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5ц4 А 0 ) К 67/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

21,00-22,00

1,50-1,70

Фасоль

Агар

Кормовые дрожжи

4М водный раствор гидроксида калия

Сахароза

Фильтровальная бумага

1, 50-1, 70

1,40-1 60

1,20-1,40

0,84-0,88

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3648930/30-15 (22) 05 ° 07,83 (46) 07,02.86, Вюл. )1- 5 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт микробиологических средств зашиты растений и бактериальных препаратов и Всесоюзный научно-исследовательский институт прик. — . ладной микробиологии (72) Л,К. Новикова,И.С, Захарченко, Е,М, Шагов и Л,П. Синицына (53) 595.787(088.8) (56) Технические условия на дендробациллин. ТУ 59,04.070 ° 08-78, 1978, О Dell Т,М, Rollinson W ° D,, J.Econ Fntomol, 1966, 59.3, Авторское свидетельство СССР . 9 577001, кл. A 0) К 67/00, 1976, (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТЕСТ-ГУСЕНИЦ

НЕ1»АРНОГО ШЕЛКОПРЯДА И ПИТАТЕЛЪН))Е

СРЕД1) ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ТЕСТ-ГУСЕНИЦ НЕПАРНОГО ШЕЛКОПРЯДА ПРИРОДНОЙ КЛАДКИ

И ГУСЕНИЦ МЛАД)1!ИХ И СТАРШИХ ВОЗРАСТОВ ЛАБОРАТОРНОЙ Bb KOPNKH (57) 1. Способ получения тест-гусениц непарного шелкопряда, включающий отбор природных кладок яиц, их хранение при температуре 1-5 C и использование отдельными партиями для выращивания тест-гусениц на искусственной питательной среде, о т л и ч аю m, и и с я тем, что, с целью повышения эффективности способа за счет круглогодичного получения тест-гусениц со стабильными биологическими показателями, сначала используют природные кладки яиц, а при снижении их жизнеспособности в результате хранения начинают использовать клад.ки яип от бабочек разовой лаборатор„„Я0„„1209131 ной выкормки, прошедших этап хранения, при этом лабораторную выкормку тест-гусениц проводят на средах, дифференцированных в соответствии с требованиями гусениц различных возрастов, 2, Способ по п,1, о т л и ч а юшийся тем, что тест-гусениц и гусениц младших возрастов лабораторной ныкормки культивируют на среде одного состава, 3. Питательная среда для получения тест-гусениц и гусениц младших возрастов лабораторной выкормки, содержащая фасоль, агар, кормовые дрожжи, 4М водный раствор гидроксида калия, сахарозу, 407.-ный водный раствор формалина, калий двузамещенный фосфорно-кисльп», аскорбиновую .кислоту, метабен и воду, о т л и ч.а ющ а я с я тем, что, с целью повышения качества среды за счет приближения ее состава к природному корму, она дополнительно содержит фильтровальную бумагу при следующем соотношении компонентов, мас,Ж:

1209131

40Х-ный водный раствор форма0,53-0,55 лина

Калий

3,14-3,18 двузамещенный фосфорнокислый

Аскорбиновая кис2,20-2,22

2,20-2,22

0142-0,44

1,57-1,59

1,41-1,44

),25-1,28

0,42-0,44

0)31-0,33

Ос )альное лота

Метабен

Вода

0,86-0,88,0,78-0,81. 0,65-0,68

0,31-0,33

0,31-0,33

0,22-0,25

0,22-0,25 ное

Холинхлорид

Фолиевая

01001-0,003

Остальное кислота

Вода

4, Питательная среда для получения гусениц старших возрастов лабо-, раторной выкормки по п,3 содержащая свекловичный жом, дрожжевой компонент, солодовые ростки, премикс для птиц, дисахара, агар, муку фасолевую, водный раствор формалина, аскорбиновую кислоту, калий двузамещенный фосфорно-кислый, метабен, масло льняное, холинхлорид и воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения качества среды за счет приближения ее состава к при.родному корму, в качестве дрожжевого компонента она содержит дрожжи пивные, в качестве дисахаров — сахарозу, формалин в виде 407-ного водного раствора, а также дополнительно

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в микробиологической и химической промышленности для массового разведения гусениц непарного шелкопряда, используемых для тестирования химических и микробиологических инсектицидов, Целью изобретения является повышение эффективности способа получения тест-гусениц непарного шелкопряда за счет круглогодичного получения тест-гусениц со стабильными биологическими показателями, а также повышение качества питательной казеин и фолиевую кислоту при следующем сОотношении компонентов, мас, ;

Свекловичный 5,60-5,80 жом

Е1 рожжи пивные

Солодовые ростки

Казеин

Премикс для птиц

Сахароза

Агар

Мука фасолевая

407-ный вод ный раствор формалина

Аскорбиновая кислота

Калий двузамещенный фосфорнокислый

Метабен

Масло льнясреды за счет приближения ее состава к природному корму, Пример, В сентябре-октябре в природных условиях собирают кладки

5 яиц непарного шелкопряда с массой яиц 0,9 мг и помещают их (для реактивирования) в бумажных пакетах по

)00 r в холодильник в условиях темпео ратуры +3 С. В январе-марте проводят разовую выкормку культуры от природных кладок яиц. Гусениц 1 и

)) возраста при этом культивируют в чашках. Петри (с глотностью 150 шт, на чашку, при свободной посадке отродившихся особей) на среде N- 1.

Состав среды - 1 а также сравни1209131

Компоненты

Значение, мас.7, Минимальное Среднее Максимальное т»

Фасоль

21 0

21,5

22,0

Агар

1 50

1,60

1,70

Кормовые дрожжи

1,50

1,60

1,70

4М водный раствор гидроксида калия

1,40

1,50

l 60

Сахароза

1,20

1,30!,40

Фильтровальная бумага

0,84

0,88

0,86

407-ный водный раствор формалина

0 53

0,54

0,55 тельные результаты по выживаемости гусениц непарного шелкопряда пред-, ставлены в табл ° 1.

Далее гусениц старших возрастов с Ill возраста культивируют в специальных садках-инкубаторах объемом 250 см (при плотности на инкуI батор 25 шт ., в Т11-м, 10 шт. в .-м и 5 шт. в Ч-м возрасте) на среде Ф 2, Состав среды Р 2, а также сравнительные результаты по выживаемости гусениц представлены в табл.

Выращивание гусениц ведут на стел,лажах,, оснащенных лампами дневного света, при 18-часовом фотопериоде и освещенности 800 люкс. Для гусениц

1-!1 возраста. поддерживают температуру 20 С, для гусениц старших воэо растов, куколок и бабочек ?3 С, Куколок содержат в банках емкостью

0,5 л по 20 шт, при относительной влажности воздуха 85Х. Бабочек содержат в трех литровых вегетационных сосудах по 30 шт. и соотношения полов 1:1, Отложенные в марте бабочками лабораторной выкормки кладки яиц, также как и природные кладки, помещают в холодильник для реактивирования, Культивирование тест-гусениц (до

11-. ro возраста) ведут при содержании их в чашках Петри по 150 шт, в условиях температуры 2С С на среде Ф 1.

Для получения гусениц используют в период с января по июнь хранящиеся в холодильнике кладки яиц природных

I популяций, в период с июля по декабрь кладки яиц бабочек лабораторной выкормки, Комплексное использование природных и лабораторных кладок яиц позволяет йолучать в течение круглого года тест-гусениц с высокой жизнеспособностью и стандартной восприимчивостью к бактериальным энтомопатогенным препаратам, Степень стандартности тест-гусениц в зависимости от их происхождения приведена в табл,3, Высокая жизнеспособность яиц и тест-гусениц, получаемых от бабочек разовой лабораторной выкормки, обеспечивается культивированием гусениц этой выкормки на разных ИПС, При таком культивировании гусениц получаемый биоматериал по основным биологическим показателям значительно превосходит таковой, получаемый при культивировании гусениц на стабильных средах °

Преимущества предлагаемого способа состоят в воэможности непрерывного получения тест-гусениц непарного шелкопряда (что необходимо для оперативной оценки качества инсектицидов при их промышленном производстве), в постоянно высокой жизнеспособности тест-насекомых и их стандартности (обеспечивающих высокое качество оценки инсектицидов в любое время года). а также в возможности получения бабочек лабораторной выкормки, не

35 уступающих по биологическим показателям природным особям.

Т а б л и ц а !

1209131

Продолжение табл.) KoMIIoHpHTbl

Максимальное

0,43

0,42

0,44

Аскорбиновая кислота

Ом, 43 0,44

0,42

0,33

0,31

0,32

Метабен

Остальное Остальное

Остальное

Вода

100,0

100,0

100,0

37,0

37,0

31,0

Примечание. На известной среде выживаемость гусениц 1- возрастов

95Х; гусениц до куколок 28%.

Таблица2

Компоненты

5,80

5,70

5,60

Свекловичный жом

3,18

3,16

3,14

Дрожжи пивные

Солодовые ростки

2,22

2,21

2,20

2,20

2,21

2,22

Казеин

1,58

l,59

1,57

Премикс для птиц

1,44

1,41

Сахароза

1,28

1,25

Агар

0,88

0,87

0,86

Мука фасолевая

0,81

0,78

0,68

0,65

Аскорбиновая кислота:

0,32

0,33

° 0,31

Калий двузамещенный фосфорнокислый

Выживаемость гусениц до ll возраста, Х

Выживаемость гусениц до куколки, X

40Х-ный водный раствор формалина

Калий двухзамешенный фосдюрнокислый

Значение, мас,Х

Минимальное Среднее

Значение, мас,X ((Минимальное Среднее Максимальное

l,425

1,265.

0,795

0,665.1209131

Продолжение табл.2

Компоненты

Значение, мас.7 ьное Среднее

Минимал Максимальное

0,33

0,32

033I

Метабен

0,25

0,235

0,002

0,22

Масло льняное

Холинхлорид

0,25

0,22

0,003

0,001

Остальное

Фолиевая кислота

Остальное Остальное

Вода

Выживаемость от Ш. возраста,до куколок, 84

85

Исходные кладки

Выживаемость тестЛК„к зталону дендробациллина, Х

О трождение гусениц из яиц, Е

Месяцы опыта гусениц, z

Природные"

Январь

I00

0,032

0,034

О, 028

86

Лабораторные

Природные "

Лабораторные

Природные "

Лабораторные

Природные

Лабораторные

Природные

Лабораторные"

Природные

Лабораторнъ е

-100

Март

90

0,030

98

Май

57

63

Июль

0,033

100

Сентябрь

h00

0,031

18

Ноябрь

100

0,034

100

"/ используемый по предлагаемому способу биоматериал.

ВНИИПИ Заказ 331/5 Тираж 679 Подписное

Филиал ППП "Патент", r.Óærîðîä, ул.Проектная, 4

Примечание. На известной среде выживаемость от Т111 возраста до куколок 777, Т а б л и ц а 3