Штамм бактерии bacillus mucilaginosus - продуцент биостимулятора неспецифического иммунитета телят

Штамм бактерии bacillus mucilaginosus - продуцент биостимулятора неспецифического иммунитета телят

Реферат

 

Штамм бактерии Bacillus micilaginosus ВКМВ N 1451 Д - продуцент биостимулятора неспецифического иммунитета у телят.

Изобретение относится к микробиологии и представляет собой новый штамм Bacillus mucilaginosus, используемый для получения препарата, способного повышать иммуногенез у животных. Целью изобретения является штамм бактерии Bacillus mucilaginosus продуцент биостимулятора неспецифического иммунитета телят. Предлагаемый штамм получен путем длительного (1,5 года) культивирования при комнатных условиях на питательном субстрате, который в своем составе имеет воду, хлористый натрий и крахмал. Периодически микробную взвесь подвергали ультрафиолетовому облучению и замораживанию в жидком азоте. После воздействия на штамм различными физическими агентами его культивировали на различных плотных питательных средах, содержащих крахмал и без него. В резульате селекционного отбора наиболее "пышных" колоний из питательной среды, содержащей крахмал, был выделен штамм ГК Bacillus mucilaginosus. Полученный штамм Bacillus mucilaginosus ГК имеет следующие признаки. Морфологические. Величина бактериальной клетки суточной культуры на мясопептонном агаре 4,5-6,0 х 1,5-2,0 мк. Преобладающая форма клеток палочковидные, с закругленными концами. Размножение клеток поперечное деление. Данному штамму присущи все три морфологические формы: вегетативная, капсульная, а в неблагоприятных условиях происходит спорообразование. В клетке спора имеет центральное расположение с размерами 2,5 х 1,2 мк. Физиологические. На жидкой питательной среде, мясопептонном бульоне, растет в виде помутнения среды и образования пленки. При длительном культивировании (более 16-18 ч) пленка и микробная взвесь оседают на дно и образуют осадок. При посеве уколом в желатиновую среду отмечается рост в виде елочки, опрокинутой верхушкой вниз. Желатина разжижается медленно, послойно (сверху вниз). На плотных питательных средах МПА в чашках Петри через 16-18 ч образуются круглые, выпуклые, гладкие колонии с ровными краями. Их внешний вид напоминает капли росы. Диаметр колоний 0,3-0,5 см. На среде, приготовленной из водопроводной воды (1 л), хлористого натрия (8,5-10,0 г), крахмала кукурузного (10,0-12,0 г), отмечаетcя рост в виде помутнения среды, на дне образуется белый осадок крахмала. Для полного расщепления крахмала необходимо периодическое взбалтывание посева. Критерием оценки расщепления крахмала служит реакция на раствор иода или люголя. Характерной особенностью роста является быстрое расщепление крахмала, который находится во взвешенном состоянии среды, и длительное расщепление осадка. Отношение к углеводам. Штамм обладает способностью усваивать глюкозу, мальтозу, сахарозу, арабинозу и крахмал. Слабо усваивает галактозу и не усваивает лактозу, маннит, рамнозу, рафинозу, дульфит, сорбит и глицерин. Для получения препарата КУК микробную взвесь осаждают центрифугированием при 6 тыс.об/мин в течение 15 мин. Прозрачную надосадочную жидкость сливают в фарфоровые чашки и выпаривают в термостате при 37^оС. Для более быстрого выпаривания применяют добавочно выветривание (настольный вентилятор). После выпаривания остаются белые кристаллы со светло-желтым оттенком, которые легко растираются в фарфоровой ступке до аморфного порошка. К оставшемуся осадку после центрифугирования (серого цвета биомасса и белого цвета крахмал, не расщепленный до конца) добавляют водопроводную воду и хлористый натрий до первоначального количества и продолжают культивировать. Так повторяют несколько раз до полного расщепления крахмала, о чем судят по реакции на иод. Как видно из табл.1, надосадочная жидкость через сутки после культивирования имеет отрицательную реакцию на иод. В осадке такая реакция наблюдается на 65 день культивирования. Этот процесс можно ускорить, если извлекать биомассу из среды через каждые 1-2 дня культивирования. Испытание стимулирующей способности препарата КУК проводят на телятах путем перорального и внутримышечного введения препарата. Эффективность стимулирующей способности препарата КУК в сравнении с известными стимуляторами представлена в табл.2. Как видно из представленных результатов, предлагаемый штамм синтезирует препарат, обладающий широким спектром биологической активности. Он по своей ферментативной активности значительно отличается от известных штаммов Bacillus mucilaginosus (см.табл.3).

Формула изобретения

Штамм бактерии Bacillus mucilaginosus ВКМВ N 1451 Д продуцент биостимулятора неспецифического иммунитета телят.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Номер и год публикации бюллетеня: 36-2000

Извещение опубликовано: 27.12.2000