Способ диагностики микробной аллергии

Способ диагностики микробной аллергии

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

IlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3677159J28-14 (22) 19.12.83 (46) 15.02.86. Бюл. У 6 (71) Киевский научно-исследовательский рентгено-радиологический и онкологический институт (72) Ю.А. Гриневич, В.А. Барабой, И.И. Ногачевский и В.Г. Коляденко (53) 615.373(088.8) (56) Адо А.Д., Кипервассер Е.И.

Алексеева Т.A. Лукманова Ф.Г. Макрофагальный тест в диагностике аллергических состояний.-B кн.: Клиническая и лабораторная диагностика аллергических состояний. Киев †Ужгор, 1974, с. 4-5.

f59g А 61 К 39/00, А 61 В 10/00 (54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ МИКРОБНОЙ АЛЛЕРГИИ, включающий добавление к суспензии сенсибилизированных макрофагов микробного аллергена в рабочем разведении и инкубацию с после— дующим учетом результатов, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения точности способа после инкубации исследуемую пробу помещают в эталонный радиолюминесцентный индикатор и учет результатов осуществляют путем измерения интенсивности хемилюминесценции, продолжительности и количества пиков свечения суспенэии макрофагов до и после контакта с аллергеном и при увеличении одного из параметров измерения в два и более раз диагностируют микробную аллергию.

1210836 разом.

Изобретение относится к медицине, а именно к применению в иммунологии, и может быть использовано для диагностики микробной аллергии, Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ поясняется следующим обПрямой тест. Интактные морские свинки подвергаются сенсибилизации четырехкратным введением аллергена ,на протяжении 10-14 сут. Трижды аллерген вводят подкожно в обьеме

0,5 мл и однократно — в подушечки задних лап свинки в объеме 0,1 мл.

Через 30 сут после начала сенсибилизации получают перитонеальный экссу6 дат, содержащий 3-4 10 микрофагов в мл. К 1,25 мл перитонеального экссудата (суспензии макрофагов) приливают 0,5 мл аллергена. Регистрируют свечение кюветы, затем суспензии макрофагов и кинетику свечения после приливания аллергена. Параллельно ставят пробы с различными аллергенами — специфическими (к которым свинка была предварительно сенсиби" лизирована), близкими к нему и далекими по своей природе микробными аллергенами.

Непрямой тест. К 1,25 мл перитонеального экссудата свинок добавляют

1,0 мл сыворотки крови исследуемого больного и 0,25 мл аллергена. Последовательно регистрируют интенсивность хемилюминесценции кюветы, экссудата, затем его смеси с сывороткой крови и кинетику СХЛ этой смеси после добавления аллергена. Пробы также ставят параллельно с несколькими аллергенами с целью выявления состояния сенсибилизации к одному из них.

Измерения СХЛ биологических проб производят на оригинальной установке, собранной из стандартных блоков отечественного производства. В качестве детекторов светового излучения используют ФЗУ-39а и ФЭУ-130. Регистрацию сигналов ФЭУ производят прибором "Пульт-А" с выводом получаемой информации на световое табло, цифропечать и на перфоленту, Предварительную калибровку прибора производят

2r>

ЗО

4О

51 с помощью эталонного радиолюминесцентного индикатора ЭЯ-1 и световодом с ослабляющим светофильтром.

Биопробу в объеме 1,5-2,5 мл помещают в кювету из нелюминесцирующего стекла с дном из оптического кварца, которую располагают непосредственно над фотокатодом ФЭУ. Кюо вету термостатируют при 38 С. После эталонных измерений определяют величину свечения кюветы (фон) и кюветы с биопробой (сигнал+фон) . Пробу перитонеального экссудата помещают в кювету и через 2-3 мин необходимые для достижения биопробой расчетной температуры 38 С, регисто рируют величину ее свечения в импульсах за 10 с (для чего вычисляют среднее из )О последовательных

10-секундных измерений). Затем непосредственно в кювету вносят аллерген и в течение 40-60 мин ре— гистрируют кинетику СХЛ. Наиболее часто производят измерения с интервалом по 5 мин. Исследования были проведены на 62 морских свинках (в том числе на 20 неиммунизированных), а также на 26 больных с дерматоаллергозами (главным образом с микробной экземой ) и на 5 здоровых донорах. Ус"àíîâëåíî,,что реакция сенсибилизированных морских свинок на неспецифический аллерген по показателю кинетики СХЛ суспензии перитонеальных макрофагов практически не отличается ни по высоте, ни по продолжительности, ни по количеству пиков от реакции несенсибилизированных свинок на различные аллергены.

Максимальная высота пика, измеряемая количеством импульсов свечения за 10 с, колеблется для разных аллергенов от 42+16 до 121+24 и лишь протейный аллерген вызывает у интактных свинок существенно более сильную реакцию (258!21 имп.), однако это следует отнести за счет свойств и концентрации самого аллергена.

У сенсибилизированных свинок реакция на неспецифический аллерген колеблется пс существу в тех же пределах: от 14 9 до 120 -18 имп. за 10 с.

Продолжительность этой реакции порядка 5 мин и во всех случаях наблюдают только один пик свечения.

Эту реакцию мы рассматривали в дальнейшем как нулевую, т.е. характеризующую отсутствие сенсибилизации

121

Составитель T. Козлова

Редактор М. Келемеш Техред 0.8àùHøèíà Корректор A Тяско

Заказ 571/8 Тираж 659 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 макрофагов к данному конкретному аллергену.

При контакте сенсибилизированных макрофагов со специфическим аллергеном реакция носит принципиально иной характер. Во-первых, высота пика превышает "нулевую" реакцию в

2-3 раза. Во-вторых, продолжительность реакции достигает 30-40 мин, а в отдельных случаях и более. Наконец, в-третьих, и это особенно характерно, реакция носит много0836 4 кратный характер, на кривой свечения регистрируется два-три пика.

Причем все эти три показателя (высота, продолжительность и кратность реакции) количественно характеризуют выраженность реакции, степень сен сибилиэации организма в каждом конкретном случае.

Таким образом, предлагаемое техническое решение позволяет повысить точность диагностики микробной аллер. гии в 2 раза (91,0Х против 41,4X) .