Способ стабилизации липосом

Способ стабилизации липосом

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„Я0„„1214101

use А 61 К 9/00

I (2, -.E

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ""

H ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (2 i) 3685602/28-14 (22) 04. 01. 84 (46) 28. 02. 86. Бкл. Ф 8 (71) Киевский научно-исследовательский институт эндокринологии и обмена веществ (72) В.В.Ховака, А.В.Стефанов и А.В,Шевченко (53) 615.014.27:615.357(088.8) (56) Авторское cBHpeTeJIbcTBo СССР

К - 774555, кл. А 61 К 9/00, 1980. (54)(57) СПОСОБ СТАБИЛИЗАЦИИ ЛИПОСОМ, включающий использование для их изготовления лецитина и холестерина с последующим суспендированием с раствором инсулина и ультразвуковым озвучиванием, отличающийся тем, что, с целью повышения устойчивости инсулинсодерхащих липосом к действию пищеварительных ферментов, в состав их мембранных слоев включают холестерин и лецитин в молярном соотношении 1:1 с добавлением 0 05с

0,1Е ингибиторов липаз.

1 ) 14 101 с г вия панку:-=ати-! а

СОставитель И,1(03 ïÿê

Редактор N.Ïåòðoçà Техред 1 1. Надь Корр ек".. Ор Q. 0бру -:гр

Заказ 81? /6 Тираж 659 Подписное

ВНИИГП1 Государственного комитета СССЕ по делам изобретений и открытий

113035, 1"1оскв11, Ж вЂ” 35„ РаушGêë!I наб, П., 4/5 филиал ГП1П Патент", г. " жгород, ул.Проектная, Изобрет-ние относится к медицине„, в частности к фармацевтической промышленности.

Цель изобретения — повышение устойчивости инсулинсодержащих липосом к действию пищеварительных ферментов за счет введения в их мембраны холестерина, лецитина и ин1-иби, торов липаз.

Способ осуществляют следующим 1Q образом.

В состав мембра.ны липосом на этапе их изготовления вводят микроколичества ингибиторов липаз 0,050,1%, таких как дезоксихолат натрия или додецилсульфат натрия. Увеличивают относительное содержание в лчпидном составе липссом холестерина.

Молярное.соотношение лецитина и холестерина 1:1.

Пример 1. Липосомы готовят иэ смеси лецитина и холестерина в молярном соотношении i:1. Смесь ли-, пидов, растворенных в хлороформе, высушивают в круглодонной колбе на роторном испарителе. К образовавшейся пленке добавляют смесь кристаллического инсулина в физиологическом растворе в концентрации 1,5-2,0 мг/мл.„ а также дезоксйхолат натрия в коли- ЗО честве 0,057. Смесь встряхивают в течение 1 ч до полного эмульгирования аипидов. Суспенэию липидов с конечной концентрацией 30 мг/мл и добавками обрабатывают ультразвуком на диспергаторе УЗДН-2Т в течение 4 мин с. частотой 22 кГц. Не связавшийся слипосомами инсулин удаляют с помощью гель-фильтрации на колонках с Sephadex С-75, стабилизированных физиологическим раствором или путем ультрацентрифугирования при 100000 g в течении 60 мин при 4 С.

В собргнньгх при гель — фильтрации фракциях а также в ресуспендировг ином осадке после ультрацентрифугирования

Опседеляют инсулин, B иссл сдованиях пo определению связывания инсулина липос:омами используют вместо кристалЛИЧ ЕСКОГО ИНСУЛИНа ЕГО СМЕСЬ С ИН супином — йод — 125, который берут в ко. -ичестве 0 1 мкКи/мл) .

При воздействии на липосомы этого состава панкреатина в разведении

1/10 связапнагo ". ними инсулина остается 91,3% при использовании в качестве ингибитора липаз деэоксихола. а HBTp&H H 80, 3„ состав липосо. 4 додецилсульфата нат— рия, Для липосом беэ включения ингибиторов липаз связг.нного с ними инсулина остается после воздействия панкреатина 58,2%.

П р и м е о 1, JJHIIGcoMbl гОТОВят из смеси лецитина и хслестерина в мслярном соотношении 1: 1. Смесь ли— пидов, растворенных в хлороформе, высушивают в круглодонной колбе на роторном иснарителе. К образовавшейся пленке добавляют смесь кристаллического инсулина в физиологическом растворе в концентрации 1,5-2,0 мгlмп с,цезоксихолатом натрия или додецилсульфатом натрия в количестве 0,17..

Далее аналогично примеру 1.

При воздействии на липосомы этого состава панкреатина в pa=-ведении

1/10 связанно-o = ними инсулина оставалось 96,,07 при использовании в качестве ингHQMTopB липаз дезоксихолата натрия и 81,4% при включении в состав липосoM додецилсульфата !IBT рия. Для липсссм бсз включения ингH биторов липаз связанногo с ними инсулина остается 58„27. после воэпей