Способ анализа аминосахаров

Способ анализа аминосахаров

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобре;тение относится к области аналитической химии, а именно к способу анализа аминосахаров. Цель способа - повышение его селективности . Способ осуществляют обработкой анализируемой пробы- h-диметйламинобензальдегидом элюированием полученной смеси на хроматографической колонке , заполненной сипикагелем с модифицированной поверхностью. Элюирование ведут при рН 5-5,5. В качестве элюента используют следующий состав, мас.%: метанол 66,0-77,0, додецилсульфат натрия 1,1-1,7, дигидрофосфат натрия 0,09-0,14, вода остальное. 3 ил. (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛ ИСТИН ЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ

К АВТОРСКОМ У СВИДЕТЕЛЬСТВУ!

i

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3729621/23-04 (22) 10.02.84 (46) 30.04.86. Бюл. У 16 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт биологического приборостроения (72) В.В. Помазанов, Е.Н. Храмов и О.Н. Шалыганова (53) 543.54.42(088.8) (56) Oray В., Lu Н., Gracy P. Разделение производных аминокислот методом высокоэффективной жидкостной хроматографии и их использование в изучении строения пептидов и протеинов. — I.Chromatogr., 1983, 270, р. 253-266;

Khim Heang S., Haerd W. Применение высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения аминокислот в природных водах.-I. Int.

I„, Environ Anal. Chem., 1983, v. 15, К 4, р. 309-318.

„SU„» 1228012 А1 (54) СПОСОБ АНАПИЗА АМИНОСАХАРОВ (57) Изобретение относится к области аналитической химии, а именно к способу анализа аминосахаров. Цель способа — повьппение его селективности. Способ осуществляют обработкой анализируемой пробы и -диметиламинобензальдегидом элюированием полученной смеси на хроматографической колонке, заполненной силикагелем с модифицированной поверхностью. Элюирование ведут при рН 5-5,5. В качестве элюента используют следующий состав, мас.Х! метанол 66,0-77,0, додецилсульфат натрия 1,1-1,7, дигидрофосфат натрия 0,09-0,14, вода остальное. 3 ил.

Смесь п-ДИБА — производных аминосахаров и этаноламина разводят в

10 раз элюентом и вводят в хроматограф, проводят разделение на колонке 50 ультрасфер 1р, длина колонки 25 см, внутренний диаметр 4,6 мм, зернение сорбента 5 мкм, привитая фаза аминопропил-силан, температура комнатная, давление 200 кг/см с элюентом, имею- 55 щим сс .тав, мас.%: метанол 66,0-77,0; цодсцилсульфат натрия 1,11-1,7; дигидрофосфат натрия (NaH РО ) 0,094 12280

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к высокоэффективной жидкостной хроматографии, и может использоваться в химических лабораториях при определении аминосахаров в биологических и других объектах.

Цель изобретения — повышение се.пективности анализа.

На фиг. 1 показана хроматограмма 10 разделения аминосахаров на колонке (25 смк4,6 мм) ультрасфер ip (5 мкм), элюент состава, мас.%: метанол 71,5; додецилсульфат натрия 1,4; дигидрофосфат натрия 0,11; ортофосфорная .кислота 0,0004; вода остальное, расхоц элюента 1 мл/мин, давление

200 атм: l-п-диметилбензальдегид, 2,3-маннозамин, 4,5-глюкозамин, б-галактозамин, 7-этаноламин. 20

На фиг. 2 показана хроматограмма разделения аминосахаров с элюентом остава, мас.%: метанол 66 0; додецилсульфат натрия 1,11 дигидрофосфат натрия 0,09; ортофосфорная кис- 2а лота 0,0004; вода остальное (обозначения как на фиг. 1).

На фиг. 3 представлена хроматограмма разделения аминосахаров с элюентом состава, мас.%: метанол 30

77,0; додецилсульфат натрия 1,7; дигидрофосфат натрия 0,14; ортофосфорная кислота 0,0004; вода остальное (обозначения как на фиг. 1).

Анализ проводят следующим образом;

ЗS

Навеску и-диметиламинобензальдегида (п-ДМБА) 10 мг растворяют в 1 мл метанола. Анализируемую пробу или отцельные навески аминосахаров маннозамина, глюкозамина, галактозамина и этаноламина (по 2 мг) смешивают и растворяют в 1 мл метанола.

К мл смеси добавляют 1 мл раствора и-Д<БА в метаноле, выдерживают 20 мин при 100 С в термостате, после чего охлаждают до комнатной температуры.

l2 2

0,14; ортофосфорная кислота 0,0004; вода остальное. Элюент имеет рН=5,05,5, расход элюента 1 мл/мин. Детектирование разделенных компонентов осуществляют при длине волны 390 нм.

Время анализа 18 мин.

Пример 1. Анализ проводят, используя в качестве элюента следующий состав, мас.%: метанол 71,50; додецилсульфат натрия 1-1,40; дигидрофосфат натрия (ИаН РО„ ) 0,11; вода остальное.

Элюирование ведут при рН 5-5,5.

Хроматограмма представлена на фиг. 1, из которой следует, что происходит полное и четкое разделение компонентов анализируемой смеси.

Пример 2. Анализ проводят с элюентом следующего состава, мас.%: метанол 66,0; додецилсульфат натрия

1,4; NaH РО 0,11; вода остальное.

Элюирование ведут при рН 5-5,5

На фиг. 2 приведена хроматограмма разделения аминосахаров и этаноламина.

Пример 3. Способ осуществляется также, как в примере 1, но состав элюента следующий, мас.% (максимальное соотношение компонентов элюента): метанол 77,0; додецилсульфат натрия 1,7; NaH РО„, 0,14; водг остальное.

Элюирование ведут при рН 5-5,5.

На фиг. 3 приведена хроматограмма разделения.

Пример 4. Способ осуществляется также, как и в примере 1, но элюент имеет или состав, мас,X (верхнее запредельное соотношение компонентов элюента): метанол 78,0; додецилсульфат натрия 1,8; NaH РО„. 0,15; вода остальное, или метанол 65,0; додецилсульфат натрия 1,0; NaH РО„

0,08, вода остальное.

Селективного разделения компонентов смеси в этом случае не происходит.

Формула изобретения

Способ анализа аминосахаров путем обработки анализируемой пробы ароматическим альдегидом с последующим элюированием полученной смеси на хроматографической колонке, заполненной силикагелем с модифициро66,0-77,0

1,1-1,7

0,09-0,14

Остальное при рН 5-5,5. ванной поверхностью, в потоке элюента, о т л .и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения селективности способа, в качестве ароматического альдегида используют и-диметиламинобензальдегид, в качестве элюента используют следующий состав, мас.7:

1228012

Метанол

Додецилсульфат натрия

Дигидрофосфат натрия

Вода и элюирование ведут

1228012

Ю

Фс/Г. д

Составитель В. Резников

Редактор В. Ковтун Техред В.Кадар Корректор О. Луговая

Заказ 2283/45 Тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4