Способ определения бергаптена
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Изобретение относится к области фармацевтической химии, a именно к способу определения лекарственного препарата - бергаптена. Цель изобретения - повышение чувствительности и селективности способа.Анализ ведут обработкой раствора анализируемой пробы в спирта раствором хлорамина Б в этаноле, концентрированной соляной кислотой и гидроокисью аммония с последующим нагреванием на кипящей водяной бане и измерением флуоресценции полученного раствора. Чувствительность способа 0,005 мкг/мл. 3 табл.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
Ф
РЕСПУБЛИН а91 аи дп 4 G 01 И 21/78
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ(СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3810303/23-04 (22) 06.11.84 (46) 15.05.86. Бюл. У 18 (71) Курский государственный медицинский институт (72) О.А,Григорьев и А.А.Хабаров (53) 543.42.063 (088.8) (56) Медицинская промьппленность СССР, 1965, и 4, с. 44-48.
Генкина Г.Л. Методы анализа фурокумаринов. — Химико-фармацевтический журнал, 1981, У 11, с. 108-113. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕРГАПТЕНА (57) Изобретение относится к области фармацевтической химии, а именно к способу определения лекарственного препарата - бергаптена. Цель изобретения — повышение чувствительности и селективности способа. Анализ ведут обработкой раствора анализируемой пробы в спирта раствором хлорамина Б в этаноле, концентрированной соляной кислотой и гидроокисьв аммония с последуккцим нагреванием на кипящей водяной бане и измерением флуоресцелции полученного раствора. Чувствительность способа 0,005 мкг/мп.
3 табл. е
1231443
10 l5
30 5.гаптена втаблетках Псоберана" по 0,01r раствора по отношению к стандартному с содержанием бергаптена 1 мкг/мл. По ка50 либровочному графику определяют содержание бергаптенав пробе. Результаты определения представлены в табл. 2., Пример 3. Количественное определение бергаптена в таблетках "Псоберана" по 0,01 r.
0, 118 г (точная навеска) мелкоизмельченных таблеток помещают в мерную колбу на 100 м;, и растворяют в
Флуоресценция до обработки реактивами
ФлуоресСоединения ценция после обработки реактивами
Бергаптен
Кумарин
Изобретение относится к фармацев— тической химии, а именно к способам определения бергаптена-5-метокси-6
7-фурокумарина, и может быть применено для качественного и количественного анализа этого соединения в различных объектах для фармацевтических исследований.
Целью изобретения является повышение чувствительности и селективности способа.
Пример 1. Качественное определение бергаптена.
К 1-2 мг субстанции бергаптена или порошка мелкоизмельченных таблеток прибавляют 6,5 мл 96%-ного этилового спирта и встряхивают до раст— ворения препарата. Прибавляют 0,2 мл
47 †но раствора хлорамина Б в эта— ноле и 0,5 мл концентрированной соляной кислоты, перемешивают и через
5 мин прибавляют 2,8 мл 25%-ного раствора гидроокиси аммония. В ультрафиолетовом свете со светофильтром
УФС-3 или УФС-6 наблюдают яркую зеленую флуоресценцию.
Время определения6-7 мин.Данныео .флуоресценции бергаптенаи родственных соединений представлены в табл,1.
Пример 2. Количественное определение бергаптена в субстанции.
0,01 г (точная навеска) субстанции бергаптена помещают в мерную колбу на 100 мл и растворяют в 80 — 90 мл
967-ного этилового спирта, доводят до метки объем полученного раствора.
К 0,5 мл данного раствора (аликвотная часть) прибавляют в пробирке
6 мл 96%-ного этилового спирта,0,2 ил
4%-ного раствора хлорамина Б в этаноле и 0,5 мл концентрированной соляной кислоты, перемешивают. Через
5 мин прибавляют 2,8 мл 25%-ного рас— твора гидроокиси аммония и перемешивают. Нагревают пробирку с раствором на кипящей водяной бане до 100 С и быстро охлаждают. Измеряют интенсивность флуоресценции полученного
80-90 мл 967-ного этилового спирта, довести до метки объем полученного раствора. 1 мл полученного раствора наносят на приготовленную хроматографическую пластину с тонким закрепленным слоем силикагеля марки LC
5/40ILI, чехословацкого производства и хроматографируют восходящим методом в системе растворителей гексанэтилацетат (3:1). Зону бергаптена, отмеченную в УФ-свете по величине
Rf (равной 0,58) или по отношению к стандарту, .количественно переносят в пробирку и элюируют 6,5 мл 967. этилового спирта. Жидкость после элюирования сливают с осадка, а к полученному раствору прибавляют 0,2 мл 4% раствора хлорамина Б в этаноле и
0,5 мл концентрированной соляной кислоты, перемешивают. Через 5 мин при— бавляют 2,8 мл 25% раствора гидроокиси аммония, перемешивают. Нагревают пробирку с раствором до 100 С и быстро охлаждают. Измеряют интенсив— ность флуоресценции полученного раствора по отношению к стандартному с содержанием бергаптена 4 мкг/мл. По калибровочному графику определяют содержание бергаптена в исследуемом образце. Содержание бергаптена в 1 таблетке колеблется от 0,0035 до
0,0045 r, что составляет около 407 от суммы двух фурокумаринов, содержащихся в таблетке. Результаты определения берпредставлены в табл.3.
По,цобной реакции не дают и не мешают определению близкие по структуре соединения:кумарин, ксантотоксин, виснадин, неодикумарин, фепромарон, синкумар,зоокумарин,что былодоказано на образцахданных соединений. Данные о флуоресценцииродственных бергаптену соединений представленыв табл,1.
Чувствительность способа
0,005 мкг/мл, что в 400 раз выше ра нее известного (2 мкг/мл).
Таблица1
Слабая ro- Яркая зелубая леная
Нет Нет
3 1231443
Продолжение табл. 1
КсантотокСлабая зе- э Слабая син зеленая леная
Таблица 3
Нет
Нет
Виснадин
Взято на анализ субстанции, г
Неодикумарин
Найдено бергаптена, г
Фепромарон
Синкумар
15 0,01
0,0098
0,0096
0,0098
0,0099
0,0095
Зоокумарин
Герниарин
0,01
Голубая
0,01
20 б-Метилкумарин
0,01
Нет
0,01
0,01
0,0097
Результаты определения бергаптена в таблетках "Псоберана" по 0,01 г представлены в табл.2.
Та блица 2
Oi01
0,0097
0,0098
0,0099
0,0095
0,01
Навеска иэмель- Найдено бергапченных таблеток, г тена, г
0,01
0,01
О, 1183
О, 1184
О, 1182
ВНИИПИ Заказ 2559/49
Тираж 778 Подписное
Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4
О, 1184
О, 1183
О, 1184
О, 1189
О, 1184
О, 1184
О, 1183
0,0036
0,0037
0,0039
0,0049
0,0042
0,0044
0,0040
0,0037
0,0045
0,0039
Содержание бергаптена в таблетках различной серии при одинаковой навеске, взятой на анализ, колеблется от 0,0035 до 0,0045 г в расчете на одну таблетку. Результаты количественного определения бергаптена в субстанции приведены в табл.3.
Содержание бергаптена в субстанции колеблется от 0,0095 до 0,0099 г.
Формула изобретения
Способ определения бергаптена, включающий обработку химическим реагентом и фотометриррвание, о т— л и ч а ю шийся тем, что, с целью повьппения чувствительности и селективности определения, раствор анализируемой пробы в спирте последовательно обрабатывают раствором хлорамина Б в этаноле, концентрированной соляной кислотой и гидроокисью аммония с последующим нагреванием на кипящей водяной бане и измерением флуоресценции полученного раствора.