Способ разделения микрочастиц

Способ разделения микрочастиц

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

А1

„„SU„„1233027 э

15У 4 С 01 11 27/26

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ /

И Д BTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Ф

ОЮ

° °

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3772183/24-25 (22) 31.07,84 (46) 23.05.86.Бюл. У 19 (71) Ордена Ленина институт химической физики AH СССР (72) А.А.Кузнецов, С.Н.Семенов и 3.И,Казакова (53) 543.257(088.8)(56) Доклады АН СССР, т.214, 1974, с.955-958.

Авторское свидетельство СССР

Р 44280!, кл. А 61 К 27/10, 1972. (54) СПОСОБ РАЗДЕЛЕНИЯ NHKPO×ÀÑÒÈÖ (57) Изобретение относится к технике

:препаративного и аналитического разделения микрочастиц, отличающихся по электрофоретической подвижности. Способ основан на проведении электрофореза в градиенте рН в иэофокусировочной колонке. С целью повышения производительности способа электрофорез проводят в ламинарном потоке буферного раствора, направленного вдоль колонки при градиенте рН, направленном перпендикулярно широкой стенке колонки, причем напряженность электрического поля направлена параллельно градиенту рН, а отбор фракций осуществляют по времени выхода их из колонки. Это дает воэможность фокусировать частицы в узких зонах ламинарного потока с малым разброоом скоростей, что позволяет повысить производительность способа. 1 ил.

1233027

Изобретение относится к способам разделения веществ, а именно к электрофорезу в рН-градиентах, и может быть использовано в биологии и ме- дицине.

Целью изобретения является повышение производительноСти способа.

На чертеже показана схема„осуществляющая предлагаемый способ.

Емкость 1 заполняют, например, борат-полиольной средой; Посредством микронасоса с регулятором 2 скорости устанавливают ламинарный поток борат-полиольного буфера в колонке 3 для иэофокусирования. Причем градиент рН в колонке 3 распределяют поперек колонки 3, Поперек колонки 3 пропускают электрофоретический поток посредством электродов 4. Разделяемую смесь вводят периодически порциями посредством узла 5 ввода пробы и прогоняют в ламинарном потоке через колонку 3. В зависимости от заряда каждого компонента. разделяемой смеси и его рЕ., ламинарный поток доста1 I вит их к выходу из колонки 3 за раз1 личные времена 7., Ha выходе из коI лонки 3 фиксируют разделенные компоненты детектором 6, например спектро- фотометром, и определяют в пробоотборники 7.

Пример. Проводят иэофокусирование в ламинарном потоке в боратполиольном градиенте с рН 4,4-8„0, которым заполняют емкость 1. Затем с помощью микронасоса с регулятором 2 скороСти устанавливают ламинарный поток в изофоретической колонке 3 с максимальной скоростью 1 мм/с. До того, как приступить к разделению, в колонке 3 должно установиться равно- . весие градиента рН поперек колонки.

При длине колонки 3 равной 1 м и поперечном сечении 1 см (5 см х 0,2 см,1 это происходит за 40 с.

fQ

Причем градиент рН распределяют перпендикулярно ребрам, равным 0,2 см и в том же направлении пропускают электрофоретический ток, прикладывай разность потенциалов к этим ребрам колонки порядка 20-40 В, при этом

Е=100-200 В/см соответственно. В качестве разделяемой смеси используют

1,0 л буферного раствора, содержащего смесь альбумина (pI - 5) и гемоглобина (pI - 7,5) в концентрации

0,17; Ее вводят порциями посредством узла 5 ввода пробы и прогоняют через колонку со скоростью потока до

1 мм/с. Разделение первой пробы происходит через 15 мин, что фиксируют на спектроАотометре 6. Разделенные компоненты отбирают в пробирки пробоотборника 7, Дпя разделения l л смеси пробу вводят порциями 40 pas что занимает в общей сложности 6-7 ч, Почти весь альбумин (960 мг) и весь гемоглобин (980 мг) отбирают в пробирки B пять раз быстрее, чем по известному способу.

Предлагаемый способ позволяет значительно повысить производительность процесса разделения. формула изобретения

Способ разделения микрочастиц путем изоэлектрического фокусирования, включающий электрофорез частиц в градиенте рН в изофокусировочной колонке, отличающийся тем, что, с целью увеличения производительности разделения, электрофорез проводят в ламинарном потоке буферного раствора, направленного вдоль колонки при граградиенте рН, направленном перпендикулярно широкой стенке колонки, причем электрическое поле направлено параллельно градиенту рН, а отбор фракций осуществляют по времени выхода их из колонки.

1233027

Составитель И.Рогаль

Редактор В.Иванова ТехредЛ.Сердюкова Корректор M.Самборская

Заказ 2761/44 Тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Производственно-полиграфическое предприятие,г.Ужгород,ул.Проектная,4